基因工程试题库Word下载.docx

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（a）TFⅡB（b）TFⅢA（c）SLl（d）TFⅡD（e）TFⅢB（f）UBFl

10．剪接小体的组装（）

（a）按有序的途径一步步完成

（b）涉及snRNP与水溶性蛋白（即不是任何snRNP组分的蛋白）

（c）不需要ATP

（d）伴随着多次snRNP的重组合

（e）以上都正确

二、判断题（每题1分，共计10分）

1． 

一个带有反向重复序列的双链DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。

2．λ切核酸酶不能在双链DNA的gap和nick处切割DNA。

3.用限制性内切核酸酶HaeⅢ分别切割载体DNA和供体DNA后，可用E.coliDNA连接酶进行连接。

4．蛋白质合成时，每加入一个氨基酸要水解4个高能磷酸键（4个／密码子），所消耗的总能量比起DNA转录（每加入一个核苷酸用两个高能磷酸键，6个／密码子）要少。

5．tRNAfMet的反密码子是TAC。

6.ColEl是惟一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。

7.不匹配的黏性末端可以通过部分填补后进行连接。

8.用DNA探针同RNA分子杂交在测定一已知基因在某一细胞中是否表达时是很有用的，但不能用于检测转录起始位点、终止位点或内含子的位置。

9.NC（硝酸纤维素膜）和尼龙膜都可作为电转移DNA支持物。

10.因为组蛋白H4在所有物种中都是一样的，可以预期该蛋白基因在不同物种中也是一样的。

三、填空（每空2分，共计20分）

如果用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生3’突出的黏性末端，则可以用————进行3’末端标记。

如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3’突出的黏性末端，可以用——进行3’末端标记。

2． 

复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由—---—催化的，它利用来源于ATP水解产生的能量沿DNA链单向移动。

3.过—---------—基因重组，游动DNA序列和一些病毒可进人或离开一条目的染色体。

4.DNA中两种常见的自发突变是由于腺嘌呤、鸟嘌呤与脱氧核糖间的N-糖基连接断裂而导致的—-----—和使胞嘧啶变为尿嘧啶而导致的-------——。

5.在所有细胞中，都有一种特别的————————识别一密码子AUG，它携带一种特别的氨基酸，即—-------—，作为蛋白质合成的起始氨基酸。

6.真核生物有两种DNA连接酶，连接酶I主要是参与---------——，．而连接酶Ⅱ则是参与—-------------—。

四、简答题（每题3分，共计30分）

1.N—甲酰甲硫氨酸-tRNA的功能是什么?

2.请列举剪接体组装过程中的各个步骤，其中哪一个复合物是具有活性的剪接体?

3.RNA聚合酶Ⅲ的内部启动子位于起始位点下游50个核苷酸的位置，它是如何被定位并正确起始转录的?

4.人线粒体DNA的哪些特征表明了其基因组的组织方式具有经济性?

5.TnlO元件只有在自己的转座酶基因具有活性时发生转座（与利用基因组中TnlO元件表达的转座酶的情况正好相反），这种偏爱的原因是什么?

6.葡萄糖是如何影响涉及糖代谢的操纵子（葡萄糖敏感型操纵子）的表达?

7.写出利用突变研究以下问题的步骤：

（1）氨基酸X的代谢途径；

（2）E.coli中细胞分裂的控制。

8.对于所有具有催化能力的内含子，金属离子很重要。

请举例说明金属离子是如何作用的。

9.大肠杆菌染色体的分子量大约是2.5x109Da1），核苷酸的平均分子量是330Da，两个邻近核苷酸对之间的距离是0.34nm；

双螺旋每一转的高度（即螺距）是3.4nm，请问：

（1）该分子有多长?

（2）该DNA有多少转?

10.什么是顺反子?

用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。

五、设计分析题（每题5分，共计10分）

1.在一个体外蛋白翻译系统，poly（UC）可被翻译成由Phe和Cys组成的蛋白，但其中

没有Ala。

1962年Chapeville用拉内镍（Raneynickel）处理携带Cys的tRNA，削弱了Cys与Ala的连接，当这种被改变的氨酰tRNA用于体外系统中时，Ala能掺人蛋白中，解释该结果的重要性。

2.现在对人类基因组的主要研究工作是进行基因组的序列测定。

然而，有人根据人类基因组是由重复序列组成为由，认为反复对同一种DNA进行测序是不明智的。

你能否拟定两份计划，一份计划应保证仅仅单一序列DNA被测序，第二个计划应允许仅仅转录的单一DNA序列被测序。

请简述你的两份计划。

六、问答题（10分）

讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性。

假如核糖体从3’端到5’端读它的模板mRNA的话，那么将会发生什么情况?

《基因工程》试题库

（二）

一、选择题（单选或多选）（每题2分，共计20分）

1.Ds元件：

（a）是自主转座元件

（b）是染色体断裂的位点

（c）与Ac元件相似

（d）内部有缺失，

（e）没有末端倒位重复

（f）靠一种非复制机制转座

2.假基因是由于不均等交换后，其中一个拷贝失活导致的。

选出下面关于此过程的正确叙述。

（a）失活点可通过比较沉默位点变化的数量和置换位点变化的数量来确定

（b）如果假基因是在基因复制后立即失活，则它在置换位点比沉默位点有更多的变化

（c）如果假基因是在基因复制后经过相当长一段时间才失活，则它在置换位点与沉默位点有相同数量的变化

3.哪些有关免疫球蛋白基因重排的叙述是正确的?

（a）所有物种中V基因的数目是一样的

（b）J是恒定区的一部分

（c）各部分连接时，将产生缺失或重排．

（d）当一个等位基因中发生有意义的重排时，另一个等位基因也发生重排

4.选出所有正确的选项：

（a）基因必须经过完全的甲基化才能表达

（b）具有活性的DNA是非甲基化的

（c）随着发育阶段的改变，DNA的甲基化也要发生变化

（d）在DNA复制过程中，通过识别半甲基化的酶，甲基化得以保存

5.参与前体mRNA剪接的snRNP（）

（a）与一组Sm蛋白结合

（b）含有独特的蛋白（即不存在任何其他snRNP的蛋白）

（c）其RNA和蛋白组分都是其作用不可缺少的

（d）主要通过蛋白组分与前体mRNA结合

6.下列关于核糖体肽酰转移酶活性的叙述正确的是：

（a）肽酰转移酶的活性存在于核糖体大亚基中（50S或60S）

（b）它帮助将肽链的C末端从肽酰tRNA转到A位点上氨酰tRNA的N末端

（c）通过氨酰tRNA的脱乙酰作用，帮助氨酰tRNA的N末端从A位点移至P位点中肽酰tRNA的C末端

（d）它水解GTP以促进核糖体的转位

（e）它将肽酰tRNA去酰基

7.下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?

（）

（a）限制酶是外切酶而不是内切酶

（b）限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割

（c）同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的

（d）一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链DNA，产生黏末端

（e）一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端

8.下列哪一种酶作用时需要引物?

（a）限制酶

（b）末端转移酶

（c）反转录酶

（d）DNA连接酶

9.pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自：

（a）ColEl（b）Ri质粒（c）pSCl01（d）pUCl8

10.M13噬菌体基因组编码10个基因，在它的成熟过程中起调节作用的蛋白是（）

（a）gp2蛋白（b）gp5蛋白（c）gp7蛋白（d）gp9蛋白

Cot1/2与基因组大小相关。

2．通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。

3.在染色体步移中，可通过DNA测序知道已到达所感兴趣的基因。

4．PCR既能用于扩增任何天然存在的核苷酸序列，又能重新设计任何天然核苷酸序列的两个末端。

因此，任意两个天然存在的DNA序列都能快速有效的扩增，并拼接在一起。

5．以黏粒为载体的重组体虽然在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的。

6.酚法和碱法分离质粒DNA都要用溶菌酶破壁，但碱法用的溶菌酶的浓度要高。

7.任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。

8.用外切酶Ⅲ作系列缺失突变时，可以从突出的3’端开始。

9.负责λ噬菌体DNA合成的酶是在裂解循环的晚期形成的。

10.一般性重组需要交换的双方都有一长段同源DNA序列，而位点专一重组仅需要短而专一的核苷酸序列，某些情况下，只需要交换双方中的一方具有该序列即可。

1．反向转录酶（reversetranscriptase）是由—————kDa和—————kDa两个亚单位组成的二聚体，作用时以RNA为模板合成DNA。

2．质粒拷贝数是指细胞中—------------—。

3．黏粒（cosmid）是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自—-------—、COS位点序列来自—--—，最大的克隆片段达到—---—kb。

4．在分离DNA时要使用金属离子螯合剂，如EDTA和柠檬酸钠等，其目的是---------——。

5．平末端连接法（bluntendligation）的连接效率比黏性末端连接的效率低得多，所以通常在连接反应体系中适量添加促进大分子凝聚的凝聚剂，以提高平末端DNA连接的效率。

常用的凝聚剂是—--------------—。

6.通过—-------—，两个单链的互补DNA分子一起形成—个完全双链螺旋,人们认为这个反应从一个慢的—-----—步骤开始。

四、简答题（每题4分，共计32分）

1.当剪接的分支位点被移到内含子内的另一个位置，其活性将会消失。

相反，正确位置附近隐藏的一个分支位点被激活。

请作出解释。

2.线粒体DNA的突变率与细胞核DNA突变率有什么不同?

为什么?

3.在什么过程中会形成一个共整合体?

它的结构是什么?

4.什么是安慰诱导物?

5.在工业微生物菌种的选育中，人们喜欢用诱变的方法筛选解除了酶合成阻遏的突变株，而不要解除了酶活性反馈抑制的突变株。

请解释原因。

6.描述滚环复制过程及其特征。

7.为什么DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?

8.为什么只有DNA适合作为遗传物质?

1．某公司要招聘技术人员加入他们的抗病毒小组帮助设计新药对抗艾滋病病毒感染。

为了得到这份工作，要求应聘者设计一个方案来阻止艾滋病病毒基因表达但不影响宿主基因的表达。

你能设计吗?

2.一种野生型E．coli菌株的一种蛋白质的108位为Val残基，分离出三种突变体（A，B和C）发现它们在这个位置分别是Gly,Glu和Leu。

A和B的回复突变株中这个位置上的氨基酸分别是Trp和Iys，突变C没有做进一步的实验，A，B和C中哪两个菌株的杂交将会由于108位密码内的交换而产生野生型重组体?

六、问答题（8分）

《基因工程》试题库（三）

1.为了正确地构建一个真核基因组的物理图谱：

（）。

（a）必须有可能清晰地分离各个染色体（通过脉冲场凝胶电泳）

（b）必须从单倍体细胞（配子）中分离DNA，这样避免了由二倍体细胞中同源染色体的存在而产生的干扰信息

（c）必须进行单个染色体分析，这只能在细胞分裂后期进行

（d）必须找到对于每个染色体只切割一次的限制酶

（e）必须首先分离核DNA和细胞器DNA，然后对它们分别作图

2.下列酶中，除（）外都具有磷酸酶的活性

（a）λ核酸外切酶（b）外切酶Ⅲ

（c）单核苷酸激酶（d）碱性磷酸酶

3.同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：

（a）OCDNA>

SCDNP>

LDNA（b）SCDNA>

LDNA>

OCDNA

（c）LDNA>

OCDNA>

SCDNA（d）SCDNA>

LDNA

4.关于M13的IG区，下列说法中哪一项不妥当?

（a）具有正负链的复制起点

（b）具有噬菌体DNA被包装的信号

（c）具有150个碱基的AT富集区

（d）具有八个回文序列，可形成五个发夹环

5.用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：

（a）染色体DNA断成了碎片（b）染色体DNA分子量大，而不能释放

（c）染色体变性后来不及复性（d）染色体未同蛋白质分开而沉淀

6.在DNA的酶切反应系统中，通常：

（a）用SSC缓冲液

（b）加入Mg2+作辅助因子

（c）加入BSA等保护剂

（d）上述说法中，有两项是正确的

7.在利用lacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是（）

（a）诱导宿主的α肽的合成

（b）诱导宿主的ω肽的合成

（c）作为酶的作用底物

（d）作为显色反应的指示剂

8.DNA在30nm纤丝中压缩多少倍?

（a）6倍（b）10倍（c）40倍（d）240倍（e）1000倍10000倍

9.在I型剪接的过程中，（）

（a）游离的G被共价加到内含子的5，端

（b）GTP被水解

（c）内含子形成套马索结构

（d）在第一步，G的结合位点被外来的G占据，而在第二步时，被3，剪接位点的G所取代

（e）被切除的内含子继续发生反应，包括两个环化反应

10.DNA多聚体的形成要求有模板和一个自由3，-OH端的存在。

这个末端的形成是靠：

（a）在起点或冈崎片段起始位点（3，-GTC）上的一个RNA引发体的合成

（b）随着链替换切开双链DNA的一条链

（c）自由的脱氧核糖核苷酸和模板一起随机按Watson-Crick原则进行配对

（d）靠在3，末端形成环（自我引发）

（e）一种末端核苷酸结合蛋白结合到模板的3，末端

1．大多数看家基因编码低丰度的mRNA。

2．TnlO高水平表达转座酶。

3．当一个λ噬菌体侵染一个合适的大肠杆菌寄主细胞时，通常是裂解性侵染，释放出几百个子代噬菌体；

更少见的是，它会整合到寄主染色体中，产生带有原噬菌体λ染色体的溶原菌。

4．λ噬菌体整合到大肠杆菌基因组上是由一个位点专一的拓扑异构酶（λ整合酶）催化的，它可以识别在两条染色体上短的特异DNA序列。

5.DNA的5’→3’合成意味着当在裸露3'

-OH的基团中添加dNTP时，除去无机焦磷酸DNA链就会伸长。

6.不匹配的黏性末端是不能通过黏性末端连接的。

7.核酸杂交的原理是根据DNA分子间互补。

8.用寡聚DNA进行高度严紧的杂交可用于胎儿遗传病的诊断，可检测到因单个核苷酸变化而造成的基因突变。

9.低丰度的mRNA不仅拷贝数少，而且种类也少。

10.插入到质粒DNA中的EB可以用正丁醇抽提除去。

1．偶然情况下，在同一基因两个稍微不同拷贝（等位基因）间发生重组的过程中，一个等位基因经过—----------—过程会被另一等位基因代替。

2．据估计，单倍体人基因组包括50000个基因，如果每个世代每个基因的突变率为5×

10-5，那么，每个个体中存在—-----—刚产生的突变。

3.蛋白质合成的起始过程很复杂，包括一系列被——————催化的步骤。

4．—------—年，美国斯坦福大学——————等在—--------——工发表了题为：

“将新的遗传信息插入SV40病毒DNA的生物化学方法：

含有λ噬菌体基因和E．coli半乳糖操纵子的环状SV40DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。

这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有—--------------------—。

5．完全的回文序列具有两个基本的特点，就是：

（1）一-------------------------

（2）------------------------------------------------------------------。

6.质粒的消失同染色体基因的突变是不同的，前者不能恢复，后者可以通过—---------恢复该基因的性状。

1.你打算扩增下图所示的两段序列之间的DNA，请从所列出的引物中选出合适的一对。

5’-GACCTGTGGAAGC．．．．．CATACGGGATTG-3’

3’-CTGGACACCTTCG……………GTATGCCCTAAC-5’

引物1引物2

5'

-GACCTGTGGAAGC5’-CATACGGGATTG

5’-CTGGACACCTTCG5’-GTATGCCCTAAC

-CGAAGGTGTCCAG5’-GTTAGGGCATAC

-GCTTCCACAGGTC5’-CAATCCCGTATG

2.可变剪接如何控制果蝇中的性别分化?

3.哪些转录因子含有TBP?

为什么它们被称为定位因子?

请用一个模型解释为什么所有三种RNA聚合酶都能与TBP发生作用?

4.RNA聚合酶Ⅱ起始转录后，起始复合物必须转变为延伸复合物。

因此聚合酶复合物必须解旋一小段DNA。

在线性DNA上，解旋需要ATP，TFⅡE，TFⅡH和解旋酶活性。

然而，超螺旋DNA的转录并不需要这些因子。

请解释这一现象。

5.哪些细胞器带有自身基因组?

为什么这些细胞器带有自身的基因组?

6.当

（1）DNA在两个定向重复之间

（2）DNA在两个反向重复之间发生重组的效应各是什么?

7.列举两种受调控蛋白控制的、与氨基酸的生物合成有关的操纵子。

8.为什么一个基因座的正向突变发生的频率要比回复突变高?

9.解释在DNA复制过程中，后随链是怎样合成的。

10.请问哪些条件可促使DNA复性（退火）?

1.一种野生型E．coli菌株的一种蛋白质的108位为Val残基，分离出三种突变体（A，B和C）发现它们在这个位置分别是Gly,Glu和Leu。

A和B的回复突变株中这个位置上的氨基酸分别是Trp和Iys，突变C没有做进一步的实验，解释上述结果并推测六种菌株中该位置上的密码。

2.某公司要招聘技术人员加入他们的抗病毒小组帮助设计新药对抗艾滋病病毒感染。

采用什么措施保证DNA化学合成的方向性和专一性？

《基因工程》试题库（四）

1.DNA在10nm纤丝中压缩多少倍（长度）?

（a）6倍（b）10倍（c）40倍（d）240倍（e）1000倍10000倍

2.I型剪接需要（）

（a）单价阳离子

（b）二价阳离子

（c）四价阳离子

（d）U1snRNP

（e）一个腺苷酸分支点

（f）一个鸟嘌呤核苷酸作为辅助因子

3.哺乳动物线粒体和植物叶绿体基因组是靠D环复制的。

下面哪一种叙述准确地描述

了这个过程?

（a）两条链都是从oriD开始复制的，这是一个独特的二级结构，由DNA聚合酶复

合体识别

（b）两条链的复制都是从两个独立的起点同时起始的

（c）两条链的复制都是从两个独立的起点先后起始的

（d）复制的起始是由一条或两条（链）替代环促使的

（e）ter基因座延迟一条链的复制完成直到两个复制过程同步

4.色氨酸操纵子的调控作用是受两个相互独立的系统控制的，其中一个需要前导肽的翻译，下面哪一个调控这个系统?

（a）色氨酸

（b）色氨酰-tRNATrp

（c）色氨酰-tRNA

（d）cAMP

（e）以上都不是

5.玉米控制因子：

（a）在结构和功能上与细菌转座子是相似的

（b）可能引起染色体结构的许多变化

（c）可能引起单个玉米颗粒的表型发生许多变化

（d）在植物发育期间的不同时间都有活性

6.以下关于假基因的陈述哪些是正确的?

（a）它们含有终止子

（b）它们不被转录

（c）它们不被翻译

（d）它们可能因上述任一种原因而失活

（e）它们会由于缺失或其他机理最终从基因组中消失

（f）它们能进化为具有不同功能的新基因

7.位于ELC的VSG基因有一个不寻常的结构，包括：

（a）不含限制性内切酶切割位点的5’无义区

（b）由一个简单序列重复多次组成的3’无义区

（c）以上都正确

（d）以上都不正确

8.以下关于亮氨酸拉链蛋白的叙述哪一项是正确的?

（a）它们通过保守的亮氨酸残基与DNA结合

（b）它们与HLH蛋白相似之处是：

它们都具有相邻的DNA结合结构域和二聚化的结构域

（c）Jun蛋白可以形成同源二聚体而Fos蛋白不可以

（d）Fos／Jun复合物与Jun／Jun复合物结合的DNA序列不同