中药制剂分析Word文档格式.docx
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注射剂要求测定装量、澄明度,不溶性微粒。
2一般杂质检查:
指药材生长、采集、收购加工、制剂的生产或贮存过程中容易引入杂质。
如水分、灰分、酸不溶灰分,重金属、砷盐等。
3特殊杂质检查:
指有针对性的与质量直接有关的专项检查项目进行检查,大黄流浸膏中对大黄苷检查;
阿胶检查挥发性碱性物质。
中药分析的原始记录哪些内容?
供试药品名称、来源、批号、数量、规格、取样方法、外观性状、包装情况、检验目的、检验方法及依据、收到日期、报告日期、检验中观察到的现象、检验数据、检验结果、结论。
中药制剂的鉴别:
是利用一定的方法来确定中药制剂中原料药的组成,从而判断该制剂的真伪。
包括:
状态鉴别、显微鉴别、理化鉴别等。
中药制剂性状鉴别:
大小、色泽、表面特征、质地、气味等方面。
中药制剂的显微鉴别:
利用显微镜来观察中药制剂中原药材的组织碎片、细胞或内含物等特征,从而鉴别制剂的处方组成。
其在制作过程中原药材的显微特征仍保留在制剂中去,因此均可用显微定性鉴别法进行鉴别。
理化鉴别:
是指利用物理的、化学的或物理化学的方法对制剂中所含的化学成分进行定性鉴别,从而判断制剂的真伪。
目前中药制剂的理化定性鉴别方法有:
化学反应法、升华法、光谱法、色谱法等。
常用的为:
薄层色谱法。
理化鉴别的特点:
1否定功能,请与肯定力2操作简便3专属性强
可见-紫外分光光度法的常见鉴别方法:
1规定吸收波长法:
样品经适当处理后,测定其吸收光谱,在一定波长处有最大吸收。
2对照品对比法:
对照品或对照药材及供试品经处理后,制定称对照品溶液剂供试品,分别测定吸收光谱,比较二者吸收光谱的一致性。
3规定吸收波长和吸收度发:
取样品经处理后,测定吸收光谱,在吸收光谱的规定波长下应有若干个吸收峰,并有相应的吸收度值。
4规定吸收波长和吸收度比值法5多溶剂光谱法
红外分光光度法的特点:
取样量少、快捷、简便、准确。
纸色谱法:
系将适宜的吸附剂或载体涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。
待点样,展开后,与适宜的对照物按同法在同版上所得的色谱图对比,并可用薄层色谱扫描仪进行扫描,用于中药制剂的鉴别。
鉴别原理:
基于相同物质同一色谱条件下,表现出相同的色谱行为这一基本规律。
对照方式:
1一种药材或几种药材对照2用对照药材3对照品种对照药品同时对照(双对照)
薄层色谱规范化操作:
点样→展开→挥干溶剂→喷湿溶剂
薄层色谱法使用的材料:
1薄层板2涂布器3点样器材4展开箱(层析缸)5显色与检测仪器
显色方法:
喷雾显色、浸渍显色、蒸气熏蒸显色、荧光栓视。
影响薄层色谱分析的主要因素:
1样品的预处理及供试液的制备2薄层色谱的点样技术3吸附剂的活性与相对湿度的影响4湿度的影响
对照物的选择:
1阳性对照2对照片对照3阴性对照
薄层色谱的应用:
1医药工业2临床医学3环境科学4食品化学5化学化工
中药制剂的检查包括:
制剂通则检查、一般杂质检查、特殊杂质检查和微生物限度检查。
杂质:
系某种物质所夹杂的不纯成分。
中药制剂的杂质:
是指在该制剂的产生和贮存过程中,根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。
一般杂质:
是指在自然界中分布较广泛,在多种药材的采集、收购、加工以及制剂的生产或贮存过程中容易引入的杂质、如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等。
特殊杂质:
指在该制剂的生产和贮存过程中,根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引来的杂质。
中药制剂中存在的杂质,来源于三个方面:
(a种源不纯或假劣b未按要求采收c非要用部位)一、由中药材原料中带入;
二、实在生产制备过程中引入;
三、是贮存过程中受外界条件的影响而使中药制剂的理化性质改变而产生。
杂质限量检查的把关:
要把药物中的杂质完全去除,势必造成生产上操作处理困难减低产品的收率并增加成本,在经济上加重病员负担;
另一方面,要分离除尽杂质,从药物的效用、调剂、贮藏上来看,而且也不可能完全除尽。
在此限度内,不对人体有害,不会影响药物的稳定性和疗效。
因此《中国药典》中规定的杂质检查均为限量检查。
一般杂质的检查方法适用于什么?
第一法:
此法适用于供试品不经有机破坏,在酸性溶液中显色的重金属限度检查;
第二法:
此法适用于供试品需灼烧破坏,取炽灼残渣项下遗留的残渣,经处理后在酸性溶液中显色的重金属限量检查。
第三法:
此法适用于能溶于碱而不溶于稀酸(或在稀酸中即生成沉淀)的药品中的重金属。
第四法:
用微孔滤膜过滤,使重金属硫化物沉淀富集成色斑,用于有色溶液或重金属限量低的品种。
中药注射剂的一般要求检查:
1澄明度检查;
2无菌;
3装量差异或装量;
4不溶性微粒;
5可见异物;
6有关物质;
7热原或细菌内毒素。
中药注射二级的特殊要求检查:
1PH值检查;
2蛋白质检查;
3鞣质检查;
4重金属检查;
5砷盐检查;
6草酸盐检查;
7钾离子检查;
8树脂检查。
中药注射剂的安全性检查:
1异常毒性检查;
2降压物质检查法;
3过敏反应检查法;
4溶血与凝聚检查法;
5热原检查法;
6细菌内毒素检查法。
砷盐法分为:
古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法。
Ag-DDC法的基本原理:
利用金属锌与酸反应生成新态的氢,与药品中的微量亚砷酸盐反应生成具有挥发性的砷化氢,用二乙基二硫代氨基甲酸银溶液吸收,使之还原生成红色胶态银,与同条件一定量标准砷溶液所产生的红色胶态银,与同条件下一定量标准砷溶液所产生的红色胶态银510mm处测吸光度,进行比较,以判定砷盐的限量或含量。
药典的规定杂质的检查均为:
限量检查。
杂质限量:
是指药物中所含杂质的最大允许量,通常用百分之几或百万分之几来表示。
杂质限量=杂质最大允许量/样品量*100%
重金属:
是指在实验条件下能与硫化乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。
炽灼法:
适用于烘焙品需要有机破坏,在酸性溶液中显色的重金属显色测定。
砷盐检查法:
指用于药品中微量砷限量检查的方法。
药品的干燥湿重:
系指药品在规定的条件下,经干燥后所减重的重量,主要是指水分、结晶水,但也包括其他挥发性的物质和乙醇等。
干燥失重的检查方法:
1常压恒温干燥法2干燥剂干燥法3减压干燥法4热分析法
干燥失重测定法:
是指测定水分及其他挥发性成分的方法,而水分测定仅仅是测定供试品的水分。
水分测定法:
指采用规定的方法对不同性质的中药材及其他制剂进行水分含量测定。
水分测定法的测定方法:
1烘干法:
适用于不含或含少量挥发性成分的药品。
2苯甲法:
适用于含挥发性成分的药品3减压干燥法:
适用于含挥发性成分的贵重药品。
4气相色谱法:
适用于各类中药制剂中微量水分的精密测定。
炽灼残渣:
使有机物质破坏分解变为挥发性物质溢出,残留的非挥发性无机物质称为硫酸盐,称为炽灼残渣。
灰分测定法:
中药经粉碎后加热,高温炽灼至灰化,则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留,由此所得灰分为“生理灰分”,即总灰分。
酸部溶性灰分:
中药经高温炽灼得到的总灰分加盐酸处理,得到不溶于盐酸的灰分,称为酸部溶性灰分。
酸部溶性灰分测定的意义:
酸不溶性灰分的测定对于那些生理灰分本身差异较大,特别是在组织中含有草酸钙较多的中药,更能准确标明其中泥土沙石等杂质的惨杂含量。
为什么要进行黄曲霉毒素的检查?
黄曲霉毒素:
是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物,具有较强的毒性和致癌性,其最敏感的动物是鸭雏,还能引起多种动物发生癌症,主要诱发肝癌。
黄曲霉的特点:
1耐热:
一般制药加工的温度下很少被破坏,在280℃时发生裂解2水中溶解度低:
低浓度黄曲霉毒素B1受紫外线破坏,与氧化性物质和NaOH、氨水等均可被破坏。
黄曲霉毒素的检查方法:
1高效液相色谱法2荧光分析法3免疫化学分析法
免疫化学分析法:
为测定黄曲霉毒素的常用方法。
1酶联免疫吸收法。
2放射免疫测定法3免疫亲和-高效液相色谱法4免疫亲和-荧光光度法5免疫色谱法
二氧化硫残留量测定法:
1蒸馏滴定法2四氯汞纳、副玫瑰苯胺比色法3离子色谱法4示波极谱法5其他方法:
利用酒石酸、NaOH、NaCl等溶液
含量测定样品的处理主要作用有:
1将被测定成分有效的从样品中释放出来,并制成便于分析测定的温度试样2除去杂质、纯化样品、以提高分析方法的重现性和准确度3富集浓缩或进行衍生化,以测定低含量被测成分。
4使试样的形式及所用溶剂符合分析测定的要求
样品粉碎的目的:
1保证含量测定所取样品均匀而有代表性,提高测定结果的精密度和准确度。
2使样品中的被测组分能更快地完全提取出来
样品常见的提取方法:
1冷浸法2回流提取法3连续回流提取法4超声提取法5超临界流体提取法
含量测定方法验证的目的:
是证明采用的分析方法是否适合于相应检测要求。
含量测定方法验证内容:
1准确度:
指用该方法测定的结果与真实值或参与值接近的程度,一般用回收率(%)表示。
2精密度:
在规定的测试条件下,同一个均匀供试品,经多次取样测定所得到结果之间的接近程度。
3专属性:
指在其他成分可能存在下,采用的方法能正确测定出被测成分的特征。
4线性:
在设计的范围内,测试结果与供试品中被测物质浓度或质量直接呈正比关系的程度。
5范围:
能达到一定精密度、准确度和线性,测试的方法使用的高低限浓度或量的区间。
6耐用性:
在测定条件有效的变动时,测定结果不受影响的承受度,为使方法用于常规检验提供依据,开始研究分析方法时,就应该考虑其耐用性。
化学分析法的特点:
仪器简单。
结果准确。
重量分析法包括:
挥发法、萃取法、沉淀法。
滴定分析法包括:
酸碱滴定法、沉淀滴定法、配位滴定法、氧化还原滴定。
可见——紫外分光光度法:
具有选择性。
薄层扫描发的两种方法:
1薄层吸收扫描法:
适用于在可见、紫外区有吸收的物质2薄层荧光扫描法:
适合于本身具有荧光或经过适当处理后可产生荧光的物质测定。
区别:
定量依据;
吸收扫描遵循:
K-M理论。
薄定量分析方法的工作曲线目的是:
1检查所选择的散射参数SX值是否适宜;
2考察工作曲线是否过原点,以便确定采用一点法或二点法定量3确定点样量的线性范围
为了克服薄层板间差异,外标法及内标法均应采用随行标准法,即标准溶液与供试品溶液交叉点在同一块薄层板上。
薄层扫描法的常用定量方法:
外标法、内标法、追加法(叠加法)及回归曲线定量法。
HPLC法测定其重要制剂的成分含量时,如何确定选用外标一点法或外标二点法?
1外标一点法:
工作曲线通过原点(截距为0)时可用外标一点法定量。
只需点一种,浓度的对照品溶液,与供试液同板展开,对比,测定组分含量。
2外标二点法:
工作曲线不通过原点时,只能用外标二点法定量,至少需点二种不同浓度的对照品溶液,才能决定一直线。
外标一点法和外表二点法的共同点:
二者是指用一种或二种浓度的表中溶液对比定量,为减小误差,同一薄板上供试品点样不得少于4个,对照品每一浓度不得少于2个;
并调整对照品溶液的浓度或供试品与对照品溶液的点样量,使其峰面积相接近;
且点样量必须准确,宜用定量毛细管点样。
薄层扫描法定量测定中药制剂中有效成分含量时为何常用随行外标法?
外标法是包层色谱扫描最常用的定量方法,方法简便,但点样必须准确,由于薄层板间差异较大,微客服这种差异,应采取随行标准法,即供试品与标准溶液(对照溶液)交叉点在同一块板上,包括外标一点法和外标二点法。
薄层扫描法的定量方法有?
1外标法2内标法3回归曲线定量法
气相色谱法的基本原理:
气相色谱是根据气化后的试样被载气带入色谱柱,由于各组分在两相间作用不同,在色谱柱中移动有快又慢,经一定柱长后得到分离,一次被载气带入检测器,将各组分浓度或质量变化转换成典型好变化记录成色谱图,利用色谱峰保留值进行定性分析,利用峰面积或峰高进行定量分析的方法。
气相色谱法载气的选择:
选择载气主要从对峰展宽、柱压降和检测器灵敏度的影响三方面考虑。
1:
N2是常用的载气2:
热导检测器应选用氢气、He;
3:
当载气流速较低时,宜用分子量较大的载气如N2;
当流速高时,宜用低分子量的载气如H2,He。
常用的载气流速20-80ml/
Min.
气相色谱法其他条件的选择:
1气化室温度:
决定于样品的挥发性,气化室温度高于柱温30℃-50℃。
2检测室温度3进样量。
气相色谱法检测器有:
热导检测器(TCD)、氢焰离子化检测器(FID)、氮-磷检测器(NPD)、电子捕获检测器(ECD).
气相色谱法(定量分析方法)的内标法使用范围、优点、缺点:
范围:
样品组分不能全部流出色谱柱,或检测器不能对每个组分都产生信号或只需测定样品中某几个组分含量时的情况。
特点:
常用定量的方法。
优点:
可抵消仪器稳定性差、进样量不够准确等因素引起的定量分析误差。
缺点:
其不足之处是样品的配制较麻烦,有些内标物不易寻找。
气象色谱法的归一化法的使用范围:
通常只用于粗略考察供试品中的杂质含量,除另有规定外,一般不宜用于微量杂质的检查。
气象色谱法定量分析方法有哪些?
1内标法加矫正因子2外标法3归一法4标准溶液加入法。
HPLC(高效液相色谱)试验条件的选择:
1色谱柱的选择2流动相的选择3洗脱方式4检测器5HPLC前处理
流动相的选择:
种类、配比、PH值及添加剂都能显著影响分离效果。
洗脱方式有:
等度洗脱、梯度洗脱。
高效液相色谱法(HPLC)的检测器:
1紫外检测器(UV/UVD):
只有紫外吸收物质;
2荧光检测器:
能产生或发荧光;
3蒸发光散射检测器(ELSD):
用于检测糖类、高分子化合物。
4电子学检测器(ECD):
用于能氧化、还原的有机物质的检测。
5示差折光检测器(RID):
使用于糖类;
6化学发光检测器。
HPLC前处理中的流动相处理:
1溶剂的纯化2过滤3流动相脱气
HPLC前处理中样品的处理:
HPLC分析前需对样品进行预处理,以便将待测物质有效地从样品基质中释放出来,制成便于HPLC分析测定的稳定试样;
除去杂质,纯化样品;
浓缩样品或进行衍生化,是样品的形式及所用溶剂符合HPLC要求。
荧光分析法包括:
1直接荧光2制备荧光衍生物3猝灭荧光
荧光分析法定量分析方法:
1标准曲线法2对照品比较法3标准加入法
生物碱:
是生物界除生物体外必须的含氮化合物之外的所有含氮有机化合物,因其结构中氮原子上的未共享电子对而大多具有碱性。
生物碱类定性鉴别:
(一)一般理化鉴别:
1.沉淀反应是生物碱理化鉴别常用方法,主要利用生物碱能与一些试剂生成沉淀这一特性,有些成分如蛋白质、多肽和鞣质等也可与试剂生成沉淀而造成假阳性结果,因此,制备样品供试液时必须净化处理,除去干扰成分,方能用沉淀反应进行中药制剂中生物碱类成分鉴别;
2.中药制剂中有两种以上中药含有生物碱成分,则沉淀反应进行定性鉴别就难以说明问题。
(二)色谱鉴别:
1.薄层色谱法:
生物碱成分常用硅胶或氧化铝薄层色谱。
2.纸色谱法3.高效液相色谱法
总生物碱:
分光光度法。
单体生物碱:
气象色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法。
总生物碱化学分析法含量测定:
1.酸性染料比色法:
利用生物碱盐的阳离子与染料阴离子定量地结合成有色的配合物(离子对);
此离子可定量的溶于某些有机溶剂,测定有机溶剂的吸收度或碱化后释放出的染料的吸收度,即可按分光光度法计算生物碱的含量。
2.雷氏盐比色法:
雷氏盐在酸性介质中可与生物碱类成分定量的生成难溶于水的有色配合物。
3.异羟肟酸比色法:
含有酯键结构的生物碱,在碱性介质中加热酯键水解,常熟的羧基与羟胺反应生成异羟肟酸。
单体生物碱的含量测定:
简便、快捷。
2.高效液相色谱法:
在反相高效液相色谱法中一般采用非极性键合相作为固定相,如ODS/C18,由于硅醇基酸性较大,为了克服游离硅醇基的影响,可采取以下措施:
1)改进流动相2)固定相改进3)气相色谱法:
只适用于挥发性的,遇热不分解的生物碱类。
黄酮类成分定性鉴别:
(一)显色反应:
1.盐酸-镁粉/锌粉反应;
2.与金属盐类试剂的配合反应。
(二)薄层色谱法:
1硅胶薄层色谱法;
2.聚酰胺薄层色谱法:
用于有力酚羟基的黄酮苷和苷元较好。
黄酮类的总黄酮含量测定:
可见-紫外分光光度法。
单体黄酮的总量测定:
1薄层色谱法2.高效液相色谱法。
三萜皂苷定性鉴别:
1.泡沫反应;
2.薄层色谱法:
硅胶薄层,其常用的溶剂系统有:
氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水、氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水、氯仿-甲醇。
皂苷的成分分为:
总皂苷测定,皂苷元测定和单体皂苷测定。
总皂苷的含量测定:
1.比重法;
2.比色法;
常用的显色剂有:
香草醛-硫酸、香草醛-高氯酸、高氯酸、浓硫酸、甲基蓝。
单体皂苷类成分含量测定:
薄层洗脱-比色法、薄层扫描法;
蒸发光散射检测器(ELSD)。
醌类成分分析:
苯醌、萘醌、菲醌、蒽醌。
定性鉴别:
1.显色反应:
利用了碱性条件下的显色反应或醋酸镁显色反应等可对羟基蒽醌类成分进行鉴别。
2升华法:
游离的蒽醌及其他醌类衍生物多具有升华性。
3.薄层鉴别:
薄层色谱法是中药制剂中醌类成分最主要的定性鉴别方法(硅胶薄层色谱法)。
挥发性成分的提取方式:
水蒸气蒸馏法。
(1)定性鉴别:
1.化学反应法2.薄层色谱法3.气象色谱法4.GC-MS联用与GC-FTIR联用分析。
(2)含量测定:
1.气相色谱法2薄层扫描法3.高效液相色谱法4.GC-FTIR和GC-MS联用技术。
木脂素类:
1一般理化鉴别2色谱鉴别
(2):
含量测定:
1总木脂素:
变色酸比色法。
2.单体木脂素:
薄层色谱法和高效液相色谱法。
其他类成分:
一:
有机酸类含量测定:
1酸碱滴定法2高效液相色谱法3薄层扫描法4分光光度法5其他:
超临界流体色谱法、高效毛细管电泳法。
二:
香豆素类定性鉴别:
1.化学反应法2.荧光法3薄层色谱法。
1分光光度法2薄层扫描法3荧光光度法4高效液相色谱法5气相色谱法
三:
多糖类定性鉴别:
1.薄层色谱法2纸色谱法3电泳法:
滤纸电泳
玻璃纤维纸电泳
醋酸纤维薄膜电泳
凝胶电泳:
琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳。
4.高效液相色谱法5气象色谱-质谱联用。
1.总多糖测定
3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色谱;
苯酚-硫酸法。
2.单体多糖:
高效凝胶液相色谱法。
牛黄及其制剂分析:
化学成分:
胆红素、胆汁酸、脂类、肽类、氨基酸和无机元素。
鉴别:
pettenkofer反应:
利用蔗糖和浓硫酸反应生成羟甲基糠醛,羟甲基糠醛与胆汁酸结合生成紫色。
麝香及其制剂分析:
1.大环化合物2甾族化合物3胆固醇,脂和蜡4蛋白质、肽、氨基酸5无机盐。
1气相色谱法2紫外光谱法3薄层色谱法。
1气相色谱法2薄层色谱法3高效液相色谱法
矿物药的分析方法:
1化学分析法:
容量分析法、重量法。
2.热分析法:
热重法、差热分析法、差示扫描量热法、热重分析举例--石膏的热重分析。
3.可见分光光度法。
3原子吸收光谱法。
第七章各种中药制剂分析
1、液体中药制剂包括:
合剂、酒剂、酊剂、注射剂等。
液体中药制剂的一般质量要求:
1性状;
2相对密度和总固体含量;
3pH值;
4装量;
5乙醇量;
6甲醇量;
7防腐剂量;
8微生物限度。
相对密度的测定:
在相对温度、压力条件下,某药物的密度与水的密度之比。
测定时的温度除另有规定外,均定为20℃。
液体或半固体中药制剂测定相对密度的方法:
比重瓶法。
若样品易挥发且数量足够时:
韦氏比重称法。
半固体中药制剂包括:
流浸膏剂、浸膏剂、糖浆剂和煎膏剂(滋膏)。
糖浆剂和煎膏剂是用规定方法制成的含有大量蜂蜜和蔗糖的半固体状的水溶液制剂,又是糖浆剂中还加有一定量的防腐剂。
半固体中药制剂的一般质量要求:
2乙醇量;
3含糖量;
4pH值;
5相对密度和总固体含量;
6不溶物;
7装量;
固体中药制剂包括:
丸剂、片剂、散剂、颗粒剂、栓剂、滴丸剂。
丸剂包括:
蜜丸、水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸、浓缩丸和微丸。
丸剂的一般质量要求:
2水分;
3重量差异、装量差异和装量;
4溶散时限;
5微生物限度。
片剂的一般质量要求:
2重量差异;
3硬度(或脆碎度):
硬度(又称抗张强度或破碎强度)、脆碎度;
4崩解时限;
颗粒剂的一般质量要求:
2粒度;
3水分;
4溶化性;
5装量差异或装量;
6微生物限度。
栓剂的一般质量要求:
3融变时限;
微生物限度。
外用膏剂包括:
软膏剂、膏药、橡胶膏剂、巴布膏剂。
软膏剂的一般质量要求:
1粒度;
2装量;
3无菌;
4微生物限度。
硬胶囊剂质量要求:
1水分;
2装量差异;
3崩解时限;
硬胶囊剂质量分析特点:
应根据胶囊剂处方分析及所含药物成分的理化性质,选定被分析成分和所能采用的分析方法。
注意在进行分析时,应将药物从胶囊中全部取出。
可参考浸膏剂的特点,设计分离和排除干扰的方法。
生物样品内药物分析的任务:
1分析方法学的研究;
2在药物浓度检测中的应用;
3在药代动力学研究中的应用;
4生物样品内源性物质的测定。
生物样品内药物分析具有下列特点:
1干扰杂质多:
体液和组织中的内源性物质如蛋白质、多肽、脂肪酸、色素等,不仅能同药物结合,而且还常常干肉测定。
2
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