高考生物实验(16个).doc
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高考生物实验(16个).doc
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高考生物实验
必修一
一、观察核酸在细胞中的分布
材料:
人的口腔上皮细胞试剂:
甲基绿、吡罗红混合染色剂
原理:
甲基绿能使DNA呈现绿色,吡罗红能使RNA呈现红色,因此利用这两种染色剂将细胞染色,可以真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
步骤:
1、取材
①滴:
在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液(保持细胞渗透压);
②刮:
用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下;
③涂:
将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中;
④烘:
将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。
2、水解
①解:
将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸(改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色质中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合)的小烧杯中,进行材料的水解;
②保:
将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。
3、冲洗涂片
①冲:
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒钟;
②吸:
用吸水纸吸去载玻片上的水分。
4、染色
①染:
用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟;
②吸:
吸去多余染色剂;
③盖:
盖上盖玻片。
5、观察
①低:
在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;
②高:
转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。
实验结果:
细胞核呈绿色,细胞质呈红色
注意事项:
盐酸的作用——改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
二、检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质。
1、还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)的检测
试剂:
斐林试剂(甲液:
0.1g/ml的NaOH乙液:
0.05g/ml的CuSO4)
颜色变化:
浅蓝色─→ 砖红色沉淀
步骤:
取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
注意事项:
①甲乙液必须等量混合均匀后再加入样液中,现配现用 ② 必须用水浴加热
2、脂肪的鉴定
试剂:
苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 颜色变化:
橘黄色或红色
步骤:
制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1~2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
注意事项:
①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰,有的地方模糊。
②50%酒精的作用是:
洗去浮色
③需使用显微镜观察
3蛋白质的鉴定 颜色变化:
变成紫色
试剂:
双缩脲试剂(A液:
0.1g/ml的NaOHB液:
0.01g/ml的CuSO4)
步骤:
试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL,摇匀→加双缩尿试剂B液4滴,摇匀→观察颜色变化(紫色)
注意事项:
①先加A液1ml,再加B液4滴②蛋清要先稀释
4淀粉的检测和观察
试剂:
碘液颜色变化:
变蓝
三、使用显微镜观察多种多样的细胞。
高倍镜的使用步骤
(1)在低倍镜下找到物像,将物像移至视野中央。
(2)转动转换器,换上高倍镜。
(3)调节光圈和反光镜,使视野亮度适宜。
(4)调节细准焦螺旋,使物像清晰。
显微镜的放大倍数=目镜的放大倍数×物镜的放大倍数
面积的放大倍数=显微镜放大倍数的平方。
显微镜下的物像与实际上下,左右相反。
四、用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体。
1实验原理
(1)叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。
(2)线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,健那绿染液(活细胞染液)能专一性使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而线粒体周围的细胞质中为无色的状态。
通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。
2材料 藓类、菠菜或黑藻的叶,人的口腔上皮细胞。
3方法步骤:
1、观察叶绿体
低倍镜下找到叶片细胞→高倍镜下观察。
2、观察线粒体
取材→染色→制片→低倍镜下找到口腔上皮细胞→高倍镜下观察。
五、观察植物细胞质壁分离和复原
1原理:
植物细胞的吸水和失水
细胞内的液体环境主要指的是液泡里面的细胞液。
原生质层:
细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质(相当于选择透过性膜)
外界溶液浓度>细胞液浓度时,细胞质壁分离
外界溶液浓度<细胞液浓度时,细胞质壁分离复原
外界溶液浓度=细胞液浓度时,水分进出细胞处于动态平衡
中央液泡大小
原生质层位置
细胞大小
质壁分离(蔗糖溶液)
变小
脱离细胞壁
基本不变
质壁分离复原(清水)
逐渐恢复原来大小
恢复原位
基本不变
2、质壁分离产生的条件:
①具有大液泡 ②具有细胞壁 ③细胞内外溶液浓度差④活细胞
3、质壁分离产生的原因:
内因——原生质层伸缩性大于细胞壁伸缩性
外因——外界溶液浓度>细胞液浓度(不断失水)
4、材料:
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(具紫色大液泡),质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液,清水等。
5、步骤:
制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察(液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离)→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察(质壁分离复原)
注意事项:
低倍镜下观察
填图并写出4、6、7处液体的颜色
六、探究影响酶活性的因素
1实验原理:
淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
麦芽糖和葡萄糖遇碘后,不形成紫蓝色的复合物,但能与斐林试剂发生氧化还原反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
2方法步骤:
(1)温度对酶活性的影响
编号
1
2
3
可溶性淀粉液
2ml
2ml
2ml
温度
60℃
100℃
0℃
新鲜的淀粉酶溶液
1ml
1ml
1ml
碘液,
1滴
1滴
1滴
实验结果
未变蓝
变蓝
变蓝
(2)pH对酶活性的影响
编号
1
2
3
新鲜猪肝研磨液
两滴
两滴
两滴
pH
盐酸
蒸馏水
氢氧化钠
H2O2溶液
2mL
2mL
2mL
实验结果
无气泡
很多气泡
无气泡
3实验结论:
(1)在最适宜的温度和最适宜的ph条件下,酶的活性最高。
(2)低温导致酶活性下降,高温、过酸、过碱导致酶活性丧失。
七、叶绿体色素的提取和分离
1、原理:
叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇——提取色素
各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素
2、步骤:
(1)称取5g绿色叶片并剪碎
提取色素研钵→研磨→漏斗过滤→
(2)加入少量SiO2、CaCO3和10ml无水乙醇收集到试管内并塞紧管口
(1)将干燥的滤纸剪成10cm长,1cm宽的纸条,剪去一端两角(使层析液同时到
制滤纸条达滤液细线)
(2)在距剪角一端1cm处用铅笔画线
(1)用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线,均匀,直,细,
滤液划线
(2)干燥后重复划2-3次
(1)向烧杯中倒入3ml层析液(不能让滤液细线触及层析液)
纸上层析
(2)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中
(3)用培养皿盖盖上烧杯(防止挥发)
观察结果:
滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带(如下图)
最宽:
叶绿素a;最窄:
叶绿素b;(含量)
相邻色素带最近:
叶绿素a和叶绿素b;相邻色素带最远:
胡萝卜素和叶黄素。
(溶解度)
注意事项:
(1)二氧化硅:
为了使研磨充分;碳酸钙:
保护色素免受破坏;无水乙醇:
色素的溶剂。
(2)过滤时不能用滤纸,用尼龙布。
(3)滤纸条要剪去两角:
防止两侧层析液扩散过快。
(4)滤液细线要直:
防止色素带的重叠;干后要重画几次:
增加色素量,使色素带的颜色更深一些。
(5)滤液细线不能触到层析液:
防止色素溶解到层析液中。
八、探究酵母菌的呼吸方式
1、原理:
酵母菌是一种单细胞真菌,属于兼性厌氧菌。
在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水:
C6H12O6+6O2+6H2O→6CO2+12H2O+能量
在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳:
C6H12O6→2C2H5OH+2CO2+少量能量
2、装置:
控制有氧无氧的条件:
有氧条件的控制:
向盛有酵母菌和葡萄糖溶液的锥形瓶(A瓶)中不断通入空气。
通入A瓶前应先通入NaOH溶液是为了除去空气中的CO2,这样才能说明A瓶产生的CO2是酵母菌产生的。
无氧条件的控制:
密封盛有酵母菌和葡萄糖溶液的锥形瓶(B瓶)。
B瓶应封口一段时间后再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶,这样做是为了耗尽瓶内的氧气,以证明B瓶产生的CO2是在无氧条件下产生的。
3检测:
(1)检测CO2的产生:
使澄清石灰水变浑浊或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
(2)检测酒精的产生:
橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与酒精发生反应,变成灰绿色。
九、观察细胞的有丝分裂
1实验原理:
(1)高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。
(2)有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同,可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况,识别该细胞处于那个时期。
(3)细胞核内的染色体易被碱性染料(如龙胆紫)染成深色。
2步骤:
(1)洋葱根尖的培养在上实验课之前的3-4天,取洋葱一个,放在广口瓶上。
瓶内装满清水,让洋葱的底部接触到瓶内的水面。
把这个装置放在温暖的地方培养。
待根长约5cm,取生长健壮的根尖制成临时装片观察。
(2)装片的制作
制作流程为:
解离—漂洗—染色—制片
过程
方法
时间
目的
解离
上午10时至下午2时,剪去洋葱根尖2-3mm,立即放入盛入有15%盐酸和95%酒精混合液(1:
1)的玻璃皿中,在温室下解离。
3-5min
用药液使组织中的细胞相互分离开来
漂洗
待根尖酥软后,用镊子取出,放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。
约10min
洗去药液,防止解离过度
染色
把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)的玻璃皿中染色。
3-5min
染料能使染色体着色。
制片
用镊子将这段根尖取出来,放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子尖把根尖能碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片。
然后,用拇指轻轻的按压载玻片。
使细胞分散开来,有利于观察
3、观察
a低倍镜观察:
找到分生区细胞,其特点是细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂
b高倍镜观察:
在低倍镜观察的基础上换高倍镜,直到看清细胞的物像为止
前期:
①出现染色体②核
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- 高考 生物 实验 16