薄层色谱总结Word文档下载推荐.docx

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苯—醋酯乙酯—冰醋酸（92:

5:

5）、丹皮酚：

环己烷一醋酸乙酯（3:

1）,

结论：

以石油醚、正构烷和苯为体积百分数比较大的溶剂，通常起溶解和分离化合物的作用，而用醋酸乙酯为调节Rf（比移值）的溶剂。

为了减少拖尾之类其他相似相溶原则以外的影响，适

当加入添加剂，如有机酸或者有机碱。

2、类极性较小的不挥发性物质

3-谷甾醇：

环己烷一醋酸乙酯一甲醇（625:

1）或者环己烷一丙酮（5:

2）、

熊果酸：

甲苯一醋酸乙酯一冰醋酸

（12:

4:

0.5）、齐墩果酸：

氯仿一甲醇

（40:

1）、

猪去氧胆酸：

氯仿—乙醚一冰醋酸（2:

2:

1）、大黄素：

苯一醋酸乙酯一甲醇（15:

0.2）或者苯一乙醇（8:

丹参酮口A:

苯-醋酸乙酯-甲酸（40:

25:

4）、

穿心莲内酯：

氯仿-无水乙醇（9:

1）靛玉红、靛蓝氯仿—乙醇（9:

1）或者苯—氯仿—丙酮（5:

1）

这类物质展开剂极性比极性较小的挥发性物质洗脱力强一些，因为这类物质极性小的母核大，而极性大的基团通常可以形成氢键，比如羧酸、羟基。

以上物质，母核分子量减小、母核结构中不饱和健的增加（尤其是出现苯环），极性基团的增加，都使极性增加，展开剂极性也增大。

。

这个范围内的物质很多，一般展开剂大百分数的溶剂可以从环己烷一〉甲苯一〉二甲苯一〉苯一〉氯仿的顺序，按照极性要求选择。

这里注意，异丙醇、正丁醇极性指数也比较小，在这范围的化合物很少用，因为粘性大、展开慢，造成斑点扩散；

另外，羟基的氢键作用力也有不利。

调节Rf值的溶剂，从醋酸乙酯一〉甲醇一〉丙酮一〉乙醇。

挥发性物质也有很多带羰基、羟基的，但从它的挥发性就可以明白，分子间作用力不强，另外，母核与石油醚、正构烷和苯的结构差异小，估计更容易脱离硅胶吸附，更快进入溶剂中，而不需要通过提高展开剂的极性。

由于存在糖的多羟基结构，苷元的结构影响变小。

展开剂中使用极性大的有机溶剂（氯仿、醋酸乙酯、甲醇、正丁醇）和水。

乙酸和甲酸的使用，一方面增大展开剂极性，另外也可以抑制硅胶羟基的作用，减少拖尾。

由于混溶性和硅胶耐酸能力的限制，水和酸的使用是有限度的。

3、类极性大的小分子有机酸：

没食子酸：

氯仿一醋酸乙酯一甲酸（5:

1）、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸、异绿原酸。

例如下面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的增加，总体的极性就增力口，展开剂极性也增加了。

依次为肉桂酸、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸。

相应展开剂分别为：

正己烷一乙醚一冰醋酸（5:

0.1）、苯一冰醋酸一甲醇（30:

3）、氯仿一甲醇一甲酸（9:

0.5）、石油醚一乙酸乙酯一甲酸（3:

6:

1）、醋酸丁酯一甲酸-水（7:

2.5:

2.5）。

这类物质多数是苯乙烯母核的，这个结

构的极性本身比较大，另外有酚羟基和羧酸基团，个别有多羟基配基。

皂苷的展开剂差不多，极性大。

注意甲酸通常指的是浓度85%左右的，含有水。

4、类含氮有机物：

盐酸小檗碱：

苯-醋酸乙酯一甲醇-异丙醇

—浓氨试液（12:

6:

3:

0.6）（氨蒸气饱和）或正丁醇-冰醋酸-水（7:

麻黄碱：

氯仿一甲醇—浓氨试液（20:

0.5）或正丁醇一冰醋酸一水（8:

甘草酸铵:

醋酸乙酯一甲酸一冰醋酸一水（15:

2）。

结论分析：

由于NH2硅醇基的作用很强，在强极性展开剂加有机酸、有机碱扫尾。

对于极性化合物，使用正丁醇对斑点扩散影响较小，因为化合物和硅胶的作用强。

当被分离物质为弱极性物质，一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；

被分离物质为强极性成分，则须选用极性溶剂为洗脱剂。

如果对某一极性物质用吸附性较弱的吸附剂（如以硅藻土或滑石

粉代替硅胶），则洗脱剂的极性亦须相应降低。

3.TLC的通用显色方法

理想的显色希望灵敏度高，斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好，斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比，在样品组成并不完全已知的情况下，通用显色方法显得尤为重要，通用显色方法主要有：

1、紫外照射法：

方便、不破坏样品；

2、碘蒸气法：

通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用；

3、荧光试剂：

制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别，有荧光物质更明显；

4、硫酸溶剂：

对绝大多数有机物有效，但有破坏性。

4.薄层层析和纸色谱操作注意事项

1、点样点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0〜1.5cm，样点直径一般不大于2mm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。

若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。

点样时必须注意勿损伤薄层表面

2、展开将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至规定距离（一般为8〜15cm）,取出薄层板，晾干，待检测。

注：

展开缸如需预先用展开剂预平衡，可在缸中加入适量的展开剂，密闭，一般保持15-30分钟。

3、显色与检视供试品含有可见光下有颜色的成分可直接在日光下检视，也可用喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂显色，或加热显色，在日光下检视。

有荧光的物质或遇某些试剂可激发荧光的物质可在356nm紫外光灯下观察荧光色谱。

对于可见光下无色，但在紫外光下有吸收的成分可用带有荧光剂的硅胶板（如GF254板），在254nm紫外光灯下观察荧光板面上的荧光猝灭物质形成的色谱。

把我的祖传秘方告诉你吧

PE（60-90）EtAc/PE=1:

2

EtAc/PE/AcOH=15:

1

EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:

8年来我用这四种体系，没有出现过什么问题.我一直在用的是乙酸乙酯：

环已烷，不断调节比例，直到有满意的Rf值，有拖尾时可能要加酸或碱，我一般乙酸和三乙胺。

我用了好几年了，都还好。

不妨一试！

铺板

铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：

过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；

过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。

匀浆配比一般是硅胶G:

水=1:

2〜3,硅胶G:

羧甲基纤维素钠水溶液=1:

2。

研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。

匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。

涂层薄，点样易过载；

涂层厚，显色不那么明显。

通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很大，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。

点样

尽量用小的点样管。

如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管。

这样，点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。

样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。

样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。

点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。

展开剂配制

选择合适的量器把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，如果分层,取用体积大的一层作为展开剂。

绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。

混合不均匀和没有分液的展开剂，会造成层析的完全失败。

各组成溶剂的比例准确度对不同的分析任务有不同的要求，尽量达到实验室仪器的最高精确度，比如：

取1ml的溶剂,应使用1ml的单标移液管，移液管应符合计量认证要求，尽管多数时候这不是必须的。

展开系统的饱和一般使用的是双槽的展开缸，一槽用来放展开剂，另一槽可加入氨水或硫酸。

把待展开的板放入两槽间的平台，斜架着，盖上展开缸的盖子。

让展开剂的蒸气充满展开缸，并使薄层板吸附蒸气达到饱和，防止边沿效应，饱和时间在半个小时左右。

展开时难免要打开盖子把薄层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气的吸附平衡影响不大，当然动作应该尽量轻、快。

温湿度的控制

温湿度对薄层影响都很大。

不冻结的前提下，通常温度越低分离越好，较难的分离需在低温下分离，例如人参皂昔。

湿度的影响，估计主要是影响薄层板的吸附能力，导致选择性（容量因子）的变化，湿度应根据实际情况确定。

温度控制使用空调器或冰柜，湿度控制是通过在另一展开槽放置相应浓度的硫酸。

显色

喷显色剂显色最重要是有好的雾化器。

solvent

polarity

Viscosity（cp20°

C）

Boilingpoint

（C）

UVcutoff（nm）

i-pentane（戊烷）

0.00

--

30

n-pentane

0.23

36

210

Petroleumether（石油醚）

0.01

0.30

30-6

Hexane（己烷）

0.06

0.33

69

Cyclohexane（环己烷）

0.10

1.00

81

lsooctane（异辛烷）

0.53

99

Trifluoroaceticacid（三氟乙酸）

72

Trimethylpentane（三甲基戊烷）

0.47

215

Cyclopentane（

环戊烷）

0.20

49

n-heptane（庚烷）

0.41

98

200

Butylchloride（丁基氯；

丁酰氯）

0.46

78

220

Trichloroethylene（三氯乙烯;

乙炔化三氯）

0.57

87

273

Carbontetrachloride（四

1.60

0.97

77

265

氯化碳）

Trichlorotrifluoroethane（三氯

1.90

0.71

48

231

三氟代乙烷）

i-propylether（丙基醚；

丙醚）

2.40

0.37

68

Toluene（甲苯）

0.59

111

285

p-xylene（对二甲苯）

2.50

0.65

138

290

Chlorobenzene（

氯苯）

2.70

0.80

132

o-dichlorobenzene（领二氯苯）

1.33

180

295

Ethylether（二乙醚;

醚）

2.90

35

Benzene（苯）

3.00

80

280

Isobutylalcohol（异丁醇）

4.70

108

Methylenechloride（二氯甲烷）

3.40

0.44

40

245

Ethylenedichloride（二氯化乙烯）

3.50

0.79

84

228

n-butanol（丁醇）

3.90

2.95

117

n-butylacetate（醋酸丁酯；

乙酸丁酯）

4.00

126

254

n-propanol（丙醇）

2.27

Methylisobutylketone（）

4.20

119

330

Tetrahydrofura

n（四氢呋喃）

0.55

66

ethanol

4.30

1.20

79

Ethylacetate

0.45

260

i-propanol（丙醇）

2.37

82

Chloroform（氯仿）

4.40

61

Methylethylketone（甲基乙基酮）

4.50

0.43

Dioxane（一恶烷；

二氧六环;

二氧杂环己烷）

4.80

1.54

102

Pyridine（吡啶）

5.30

115

305

Acetone（丙酮）

5.40

0.32

57

Nitromethane（硝基甲烷）

6.00

0.67

101

380

Aceticacid（乙酸）

6.20

1.28

118

230

Acetonitrile（乙

腈）

Aniline（苯胺）

6.30

184

Dimethylformamide（二甲基甲酰胺）

6.40

0.92

153

270

Methanol（）

6.60

0.60

65

Ethyleneglycol（乙二醇）

6.90

19.90

197

Dimethylsulfoxide（）

7.20

2.24

189

268

water

100

常用溶剂参数表

吸

匕合物名称

〔名称

中收

中极性粘度沸点收

波

i-pentane

戊烷）

正00.2336

Petroleumether

油醚）

石0.01

30〜

0.3

60

Hexane

己0.060.3369

Cyclohexane

（

环

己烷）

Isooctane（

异

辛烷）

Trifluoroaceticacid

二

氟乙酸）

Trimethylpentane

甲基戊烷）

Cyclopentane

n-heptane（

庚

0.11.081

0.10.53

0.1-

0.10.47

0.20.47

0.20.41

Butylchloride（

基氯；

丁1.00.4678220

1.00.5787273

Toluene

Trichloroethylene（

氯乙烯；

乙炔化三氯）

p-xylene

二甲苯）

Chlorobenzene氯2.70.8132-

o-dichlorobenzene

二氯苯）邻2.71.33180295

Ethylether

二2.90.2335220

乙醚；

Benzene

「3.00.6580280

（苯）

Isobutylalcohol（丁醇）

Methylenechloride（

氯甲烷）

Ethylenedichloride（氯化乙烯）

n-butanol（

丁醇）

n-butylacetate（酸丁酯；

n-propanol（

醇）

化合物名称文名称

j异

3.04.7108220

3.40.44240245

二3.50.78

84228

正

3.72.95

117210

醋

4.0-

126254

丙

4.02.27

98210

极性粘度沸点波

长

Methylisobutylketone（

基异丁酮）

甲

4.2-

119330

Tetrahydrofuran

四

氢呋喃）

4.20.55

Ethanol

乙

4.31.20

酸乙酯）

（乙

4.30.45

i-propanol

4.32.37

丙醇）

Chloroform

氯

仿）

4.40.57

Methylethylketone（

基乙基酮）

4.50.43

Dioxane（

二恶烷；

二氧

4.81.54

102220

六环；

Pyridine

吡

啶）

5.30.97

115305

Acetone

丙5.40.32

Nitromethane（

基甲烷）

Aceticacid（

酸）

Acetonitrile（

Aniline（

胺）

硝6.00.67101330

6.21.28118230

6.20.3782210

苯

6.34.40184-

Dimethylformamide（甲基甲酰胺）

Methanol（

Ethyleneglycol（二醇）

Dimethylsulfoxide（甲亚砜DMSO）

Water

6.40.92153270

6.60.6065210

6.919.9197210

7.22.24189268

（水）10.21.0100268

乙酸乙酯（8:

2）<

氯仿:

乙醚

（9:

）<

苯:

甲醇（95:

5）

<

苯:

乙醚（6:

4）

环己烷:

乙酸乙

酯（1

:

1）<

乙醚（8:

甲醇

（99:

1）

丙酮（85:

15）

苯：

（4:

6）

乙酸乙酯（1:

（95:

丙酮

（7:

3）

5）<

丙酮（9:

1）<

乙酸乙酯（3:

7）<

乙醚:

甲醇（99:

1）甲醇（99:

仿:

甲醇（9:

乙醚（1:

9）

乙酸乙酯：

丙酮（1:

氯