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从成像的原理看,物镜在成像过程中起主要作用,因此,物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度,目镜不过是放大物镜所成的像,而不能增加成像的清晰度。
聚光器的作用是集中反光镜反射光线,使光线汇聚而得到强的光束,升降聚光器可调节焦点。
聚光器上还附有光圈,用以调节进入物镜的光线。
(三)显微镜的放大倍数
显微镜的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积。
(四)使用显微镜的操作规程
1.取镜:
(1)自显微镜柜子内取出显微镜,左手握紧镜臂,右手托镜座。
(2)将显微镜置于实验台上时,应放在身体的左前方,离桌子边缘约80毫米处。
右侧可放记录本绘图纸等。
(3)取下登记本,登记实验名称、指导老师。
2.低倍镜观察:
(1)把切片放在载物台上,移动载物推进器,使切片在视野范围内。
(2)用亮度调节开关调节光线强度。
(3)为避免物镜压坏切片,必须用下面方法进行聚焦:
一方面转动粗聚焦螺旋,使镜筒逐渐下降,直到接近盖玻片为止,然后观察目镜视野,慢慢转动粗聚焦螺旋使镜筒逐渐上升,至显微镜的工作距离,物像自然清晰。
(4)物像为倒像,切片的移动方向与物像的移动方向相反。
3.高倍镜观察:
在低倍镜下看清物像后,把观察内容移至视野中部,直接转过高倍镜进行观察。
若不清楚,可逆时针微微调节细准焦螺旋。
(五)使用显微镜时必须遵守的规则
1.任何旋钮转动有困难时,绝不能用力过大,而应查明原因,排除障碍。
如果自己不能解决时,要向老师说明,帮助解决。
2.保持显微镜的清洁,尽量避免灰尘落到镜头上;
尽量避免试剂或溶液沾污或滴到显微镜上。
显微镜用过后,应用清洁棉布轻轻擦拭;
镜头有灰尘,必须用擦镜纸擦。
3.每次实验结束,把显微镜以拿出时的样子放回到镜盒里(即转动物镜头,使之“八”字形向外;
降低镜筒至底部)。
(六)操作练习
对显微镜的构造和使用方法有初步了解后,可以进行下列操作练习:
1.用“上”字片在低倍镜下观察。
掌握对光和聚焦器对物像的影响;
掌握物像的运动与切片移动的关系。
2.找不到物像的原因有:
“上”字不在视野范围内或不在其工作距离上。
在镜筒上移时在某一位置会发现一些东西出现,说明这些东西在你的视野范围和工作距离上,移动一下载物推进器,若这些东西会移动,说明你看到的东西是在你的载玻片上,那么“上”字没有在你的视野内,你必须移动载物推进器使你观察的内容进入显微镜的视野。
若移动载物推进器时,这些东西仍不动,说明你观察的内容可能是聚光器上的灰尘,你必须抬高镜筒。
3.完成低倍镜观察后,转过高倍镜(若转不过来,可能是切片的盖玻片朝下了)至工作位置,进行观察。
若不清晰,逆时针调节细聚焦螺旋至清晰(细聚焦螺旋的转动次数有限,转不动时不可硬转,要使它顺时针还原)。
四、植物细胞的基本结构
(一)材料:
洋葱鳞茎的鳞叶表皮细胞。
(二)制片方法:
撕片法(见附录)
(三)观察:
在低倍镜下可观察到细胞壁、液泡、细胞核和细胞质。
注意观察没有染色的细胞结构在光镜下的特征,折射率上有什么差异。
五、细胞内含物
马铃薯块茎、红辣椒
(二)方法:
涂片法、徒手切片法
切取小块马铃薯,用涂片法制临时制片,观察时光圈调小一些可看清脐和轮纹,然后加I-IK液一滴再镜检,有何变化
取红辣椒用徒手切片法或涂片法制成临时制片,观察有色体。
六、绘图方法(见附录)
七、作业:
1、洋葱鳞叶表皮细胞示细胞基本结构
2、马铃薯块茎淀粉粒
实验二植物细胞分裂和组织
通过观察掌握细胞分裂方式,特别是有丝分裂。
掌握组织的主要类型和各种组织的主要形态、构造特征以及它们的功能。
二、材料
1、显微镜及解剖用具、载玻片、盖玻片
2、醋酸洋红、番红溶液(配制见附录)
3、永久切片(制法见附录):
洋葱根尖纵切,南瓜茎纵切,柑桔果皮横切
4、离析液:
鹅掌楸木质部、黑松木质部
5、临时制片:
女贞叶、泡桐叶柄
三、观察内容和方法
(一)植物细胞分裂与分生组织
分生组织是一群具强力分裂能力的细胞群。
植物细胞分裂的最普遍方式为有丝分裂,这类细胞分布在植物的顶端或两侧。
今天我们看的内容是洋葱根尖,有丝分裂存在于根尖的生长点部位,因此应在这一位置上寻找。
减数分裂是特殊的有丝分裂,它存在于植物繁殖后代的有性生殖器官上。
取含笑花药,用整体装片法(见附录),再轻轻一压,制成临时切片,进行观察。
(二)基本组织
该组织分布广,是分生组织和成熟组织的过渡,可以重新恢复分裂功能,成为次生组织。
这类组织均由一些圆形、椭圆形或多边形细胞组成,细胞大,壁薄,有液泡,常有胞间隙(见示范)。
(三)保护组织
初生保护组织:
撕下女贞叶下表皮,整体装片法制成临时切片,进行观察,表皮细胞成不规则多边形,互相紧密相嵌,其间有许多成对的半月形细胞,这为保卫细胞,保卫细胞之间的小孔为气孔。
次生保护组织:
周皮(见示范镜)
(四)输导组织
输导组织由输送水分的导管或管胞和输送有机养料的筛管或筛胞组成,它们分别存在于木质部和韧皮部。
1.导管分子的观察:
取鹅掌楸茎木质部离析液(离析材料制作过程见附录)一滴,制成临时切片进行观察:
细胞成圆柱形,壁有各种加厚方式,细胞两端壁有穿孔,鹅掌楸的成穿孔板,为梯状穿孔。
2.管胞的观察:
取金钱松(或黑松)茎木质部离析液制成临时切片进行观察,它没有穿孔,两端尖的长形细胞,细胞壁上有具缘纹孔。
3.筛管伴胞的观察:
取南瓜茎纵切永久制片,筛管分子为筒形,横壁上有筛孔,并有穿过筛孔形成“莲蓬头”的联络索,筛管旁较小的为伴胞。
(五)机械组织
机械组织分长轴和短轴,细胞壁强烈增厚,起机械支持作用。
1.纤维:
取观察导管用过的加拿大白杨茎木质部离析液制成的临时片,进行观察,两端尖锐的细长细胞是木纤维细胞。
2.石细胞:
取梨果肉,用镊子夹一“砂粒”置于载玻片上,用镊子柄部压碎,并将其散开,制成临时切片进行观察,细胞近矩形,细胞壁强烈增厚,上面有分纹孔,细胞腔小,这就是石细胞。
(六)分泌组织
分泌细胞是一类与分泌有关的组织,可以是单细胞,也可以是细胞群。
1.腺毛:
观察泡桐叶柄表皮上腺毛。
2.树脂道:
(黑松叶、茎横切,以后观察)
3.分泌囊:
观察柑橘果皮横切,它是一种溶生分泌腔。
四、作业
观察后完成下列各表:
1.分裂方式的比较:
分裂方式
存在部位
分裂过程
分裂结果
2.组织比较(按下列表格作次一级组织比较):
组织类型
存在位置
细胞特征
来源
功能
3.绘图:
1机械组织:
纤维
2输导组织:
导管、管胞
⑶保护组织:
表皮
⑷泡桐叶柄分泌组织(腺毛)
实验三种子、幼苗形态与根的解剖构造观察
一、目的要求:
2.通过观察进一步掌握种子一般形态和几种主要类型种子的基本构造,各组成部分、主要生理功能、种子萌发成幼苗的过程和幼苗的形态结构。
3.通过根尖纵切面、根毛区横切面、侧根形成区横切面及老根横切面的观察,掌握根的内部构造,进一步了解根的构造是与根的生长、吸收、输导、支持固定的生理机能相适应。
4.掌握徒手切片法。
二、材料:
1.种子幼苗:
蓖麻、蚕豆、松子等种子。
银杏、杉木、小麦等幼苗。
2.洋葱根尖纵切、刺槐老根横切(永久切片);
禺毛茛根、蚕豆根、吊兰根(新鲜材料)。
三、观察内容与方法:
种子名称
种子类型
剖面简图(注名各部内容)
(一)观察种子与幼苗:
植物名称
出土类型
素描图(注名各部内容)
(二)根尖构造观察:
取洋葱根尖纵切切片用低倍镜观察,区别根冠、生长点、伸长区、成熟区各部,作简图并注明各部及细胞特征。
(三)根的初生构造及侧根的发生
1.切取禺毛莨幼根,用徒手切片方法制成临时切片,在显微镜下观察:
表皮由一层细胞组成,细胞排列紧密而整齐,无细胞间隙。
可看到有的细胞突出形成根毛,较老的根已不见根毛,外切向壁栓质化。
皮层由多层形状大的薄壁细胞组成,具有明显的细胞间隙。
靠近表皮的细胞较小,可看到有1~2层排列紧密的外皮层细胞,往内细胞渐大,胞间隙明显,接近内皮层细胞又小,在内皮层上可清楚地看到被番红染成红色的凯氏带,呈马蹄形加厚。
维管柱最外层为中柱鞘,一般由一层细胞组成,但对着木质部处常为二三层细胞。
维管束为辐射状,木质部的导管大小逐渐向内增大,为外始式。
2.侧根的产生,取刺槐老根永久切片,观察刺槐根为几原型,侧根的发生位置。
四、作业:
1.禺毛莨初生构造部分细胞图
2.刺槐侧根发生简图
实验四茎的解剖构造观察
1.通过观察掌握植物茎的构造并进一步了解它的构造与支持、输导等功能相适应。
2.掌握识别木材三切面的方法。
1.樟树一年生枝横切;
紫苏茎横切;
马尾松嫩枝横切;
小竹茎横切。
2.椴树多年生枝横切;
天目木兰木材三切面;
马尾松木材三切面。
3.茎尖纵切(示范)。
三、内容与方法:
(一)茎尖结构:
观察示范切片,了解茎尖的原套原体学说。
(二)茎的初生构造:
1.双子叶植物茎:
取紫苏、樟树一年生横切切片进行观察,从外到内为表皮、皮层、维管柱。
仔细观察各部组织特点。
2.单子叶植物茎:
取小竹茎横切切片,从外到内的观察为表皮、下皮、基本组织、维管束。
3.裸子植物茎:
取马尾松嫩枝横切切片,观察内容与双子叶相同,对照课本比较它与双子叶植物之间的区别。
(三)茎的次生构造:
1.取椴树茎横切切片,观察区别以下各部分:
周皮、皮层、韧皮部、形成层、木质部、髓部、射线。
(注意周皮的发生位置和组成,射线的类型和功能,年轮,中柱鞘的变化与根的区别)。
2.取天目木兰和马尾松木材三切面观察三个切面的显微特征。
注意它们之间的区别。
1.作比较表比较双子叶、单子叶、裸子植物茎的结构特征。
2.绘双子叶植物茎初生构造部分细胞图。
3.绘单子叶植物茎横切单个维管束放大。
4.绘椴树茎横切(次生构造)简图。
5.绘马尾松木材三切面。
实验五叶的解剖构造观察
1.通过观察,掌握叶的解剖构造,为进一步学习叶的生理功能提供理论基础。
2.比较针叶与阔叶的异同,进一步理解叶的功能与形态、结构的统一,以及环境与形态、结构之间的统一。
油茶叶横切、毛竹叶横切、马尾松叶横切(或黑松叶横切)
三、观察内容和方法:
1.双子叶植物叶——油茶叶(异面叶)
取油茶叶永久切片,低倍镜下观察叶片的构造从上部到下部依次为上表皮、叶肉组织、叶脉、下表皮。
2.单子叶植物叶——毛竹(等面叶)
取毛竹叶横切永久切片对照植物学进行观察,注意各部组织特点。
3.裸子植物叶——马尾松或黑松叶
取一马尾松或黑松叶横切的永久切片,观察时注意各部组织形态构造特征和树脂道的位置。
1.绘油茶叶横切面图。
2.绘毛竹叶横切面图。
3.作黑松(或马尾松)叶横切面图。
实验六花和果实的解剖构造观察
通过花的各组成部分形态、构造的观察,进一步了解花各组成部分的生理功能,以为生产实践中的了解花芽分化,进行人工辅助授粉、培育新品种、分析落花落果原因……提供理论基础。
具体要求:
(1)掌握花的各组成部分的基本构造和生理功能。
(2)掌握果实、种子各组成部分的基本构造和生理功能。
(3)掌握自花至果实,种子形成的主要变化过程。
二、仪器用具及材料:
1.显微镜及其清洁用具、解剖器。
2.新鲜材料:
油茶果、油茶花。
3.浸制材料:
油茶花、油茶幼果(示幼胚及胚乳)、桃花、黑松雌、雄球花、梨、桃果实浸制材料。
4.永久切片:
紫玉兰花药横切、黑松或马尾松雌球花、雄球花纵切、花粉粒各式(示范)、成熟百合胚囊(示范)。
1.花的各组成部分观察:
(1)取一浸制油茶花(或桃花),放在有水的培养皿中,观察花各组成部分:
花萼、花冠、雄蕊群、雌蕊的外部形态作一简图记载。
观察马尾松雌、雄球花材料,区别与被子植物的不同。
然后将雌蕊子房部分解剖,主要注意识别子房壁、子室、胚珠各部。
(2)取一紫玉兰花药横切永久切片,用低倍镜观察。
参考植物学P144~146,观察各部位,并掌握花药发育中各部分的变化。
(3)取黑松树雌、雄球花永久切片。
观察大、小孢子叶的着生、结构。
参考植物学P170,与被子植物相区别。
(4)观察成熟花粉粒的各种类型,萌发孔、萌发沟(示范镜)。
(5)观察成熟百合胚囊(示范片),并参考教材P153~154掌握成熟胚囊结构。
四、果实的基本构造观察
1.取荠菜子房纵切永久切片,在低倍镜下,观察各个胚珠,可见胚珠内的早期幼胚和胚乳,参考P163,了解胚珠各部分的发育及种子形成各部分的变化。
2.观察梨、桃果实的浸制标本,掌握果实的构造和类型。
五、作业
1.绘紫玉兰花药横切细胞图。
2.绘荠菜子房纵切一个胚珠示胚的形成。
3.绘黑松雌球果纵切简图。
实验七藻、真菌与地衣
一、目的
了解藻类、菌类与地衣的特征。
生活的念珠藻、颤藻、水绵、衣藻装片、轮藻装片、海带及海带横切制片、伞菌切片、地衣切片。
用具:
显微镜、镊子、蒸馏水、碘液、载玻片、盖玻片、布块、吸水纸。
三、内容和方法:
(一)藻类
1.念珠藻:
摄取少量念珠藻的藻体装片后置显微镜下观察。
可见胶质内有很多丝状体,每一丝状体即为一个体,在高倍镜下观察,由单列的营养细胞组成的丝状体中部或两端,有个别形状较大的细胞,称异型胞,异型胞断离而将植物体分成数段,每段称为连锁体,见课本P153(图5—1)。
2.衣藻:
取衣藻封片观察,可见前端具有鞭毛,细胞内是杯状色素体、淀粉核及细胞核。
3.水绵:
水绵装片。
置显微镜下观察,可见水绵为许多圆柱形细胞组成的丝状体,绿色的色素体呈螺旋带状。
色素体上有许多发亮的小颗粒,为淀粉核,细胞中央为一大液泡,有时可见由原生质丝悬挂于细胞中央的细胞核。
并观察接合生殖。
4.轮藻:
取轮藻装片置显微镜下观察,可见轮藻的“茎”由多细胞组成,有节及节间的区别。
在节上长出单细胞的“叶”、“茎”及“叶”内有粒状的色素体。
在“叶”中生有卵囊,在卵囊下生有精子囊,卵囊呈卵形,由扭转的多细胞组成,精子囊呈球形,由盾形的多细胞组成。
通过上述观察,思考以下问题:
1原核生物有什么主要特征
2藻类植物有何主要特征
3所观察的藻类中有哪些是单细胞的哪些是群体哪些是丝状体叶状体哪些有类似茎叶的分化
(二)真菌:
观察伞菌子实体,可分为菌盖、菌柄两部分,在菌盖下有菌褶,菌褶两侧生有子实层,菌柄上生有菌环。
观察菌褶的纵切面,可见疏松菌丝组成的菌褶两侧有平行排列的菌丝即子实层,由隔丝及担子组成,每个担子有4个小的担子梗,担子梗上生着担孢子。
(三)地衣:
观察茶渍、梅衣、松萝、树花等地衣的外形,区别壳状地衣、叶状地衣、枝状地衣,再观察地衣横切制片,可见分为上皮层、藻层、髓、下皮层四层。
在高倍镜下可见上皮层与下皮层均由紧密交织的菌丝组成。
这种菌丝很像薄壁组织执行保护机能,藻层内可见藻类的球形绿色细胞,行同化作用。
髓层内菌丝疏松,具大的胞间隙,其间充满空气。
1.绘念珠藻丝状体示营养细胞及异型胞。
2.绘衣藻细胞图。
3.绘图表示水绵的构造及接合生殖。
4.轮藻示意图。
实验八苔藓、蕨类植物
了解苔藓、蕨类植物的特征,并识别苔类及藓类、蕨类。
地钱的植物体,地钱精子器托及颈卵器托纵切制片,葫芦藓的植株及其雄器苞、雌器苞纵切制片,孢蒴纵切制片,卷柏孢子叶整体装片、蕨原叶体装片、蕨孢子叶横切、贯众。
三、内容和方法
(一)地钱
1.观察地钱新鲜标本,可见地钱为绿色,具二叉分枝、扁平匍匐的叶状体,背腹异构。
腹面中肋处有单细胞的假根、鳞片、背面着生两种生殖器官——孢芽杯和精子器托或颈卵器托。
地钱雌雄异株,雄株的叶状体上生出盘状的雄托,具波状边缘。
雌株的伞状颈卵器托具星芒状边缘。
受精后在雌株上发育形成孢蒴。
2.观察地钱精子器及颈卵器托切片:
可见精子器托呈半圆形,下具一短柄,精子器的壁由一层细胞组成,壁内充满具二根长鞭毛的游动精子,在精子器托上有气孔、气室、假根及鳞片,颈卵器在颈卵器托的星芒体之间,呈倒悬的花瓶状。
颈卵器可分颈及腹两部分。
颈壁由一层细胞组成,其内成深沟状称为颈沟,颈沟内细胞称为颈沟细胞。
腹壁也由一层细胞组成,其内有两细胞,靠近颈部的细胞为腹沟细胞,另一个为卵细胞。
颈卵器成熟时,颈沟细胞及腹沟细胞消失,仅能看到卵细胞,在颈卵器托上还可看到气室、假根及鳞片。
(二)葫芦藓
1.观察葫芦藓的新鲜标本:
植物体矮不具有直立的“茎”和“叶”,基部生有假根。
这是它的配子体。
在茎的顶端为伸出的孢子体,有基足、蒴柄、孢蒴三部分组成,在孢蒴内产生孢子,在孢蒴上盖有蒴帽。
葫芦藓为雌雄同株植物。
颈卵器和精子器着生在同一株但不同茎的顶端,着生精子器的茎顶端叶片较大,向外开张,密生像花被状形成雄器苞,着生颈卵器的茎顶端叶片紧包如芽,即为雌器苞。
2.取藓的雄器苞和雌器苞横切制片在显微镜下观察。
在雄器苞中可见精子器呈棒状,下具短柄,着生在顶端中央,周围有隔丝及绿色的小叶片,具两根鞭毛的游动精子,在雌器苞中可见颈卵器,它的构造与苔纲的颈卵器相似。
3.取藓孢蒴纵切片置显微镜下观察:
在孢蒴中央为数列不育细胞称为蒴轴,在蒴轴的周边有一小部分造孢组织,由造孢组织发育成孢子,下部的不育的营养组织为蒴托。
孢蒴顶端有蒴盖,成熟脱落。
在蒴盖下为蒴齿层,孢蒴的表皮组织常有气孔。
表皮以内为多层疏松的含有叶绿体的薄壁组织,故孢蒴也能进行光合作用。
通过上述观察,思考下列问题:
1苔藓植物有何特征为什么将它列入高等植物
2苔类和藓类有何区别
3苔藓植物的孢子体和配子体有何不同生活史中哪一个占优势,能否独立生活何谓世代交替
(三)蕨类
1.卷柏:
取卷柏大、小孢子叶整体装片在显微镜下观察:
可见腹部的大、小孢子囊。
大孢子囊内有4个大孢子,小孢子囊内有多数小孢子。
2.贯众:
为多年生草本,具横走的根状茎。
叶从根状茎上长出,散生,幼叶拳卷。
叶有长柄,为一回羽状复叶。
当植物体进行繁殖时,在小叶的下表面产生许多孢子囊,孢子囊集生成孢子囊群,孢子囊群外有囊群盖覆盖。
3.取蕨原叶体装片置显微镜下观察:
可见原叶体甚小,具叶绿体,心脏形,凹陷处为生长点,其附近生有数个颈卵器。
原叶体下面生有假根、假根丛中生有若干球状的精子器。
4.取蕨孢子叶横切面切片在显微镜下观察:
叶片扁平,具有上下表皮,在上下表皮之间是由薄壁组织组成的叶肉,在叶肉中有维管束。
中央较大者为小叶片的中脉。
在叶的下表皮,叶脉的两侧有孢子囊群、孢子囊群外面为囊群盖,囊群盖下两侧有许多孢子囊。
孢子囊呈椭圆形,下具一短柄,囊壁由一层细胞组成,囊壁细胞除其中一环为木化加厚的环带,其余均为薄壁细胞,在孢子囊中有发育成熟的孢子。
此外,尚可在新鲜的孢子叶上取下囊群,置于载玻片上,加水及盖玻片,在显微镜下观察,则孢子囊的构造更为清楚。
1蕨类植物有何特点
2蕨类植物孢子体和配子体的主要特征是什么何者占优势能否独立生活蕨类植物的世代交替过程与苔藓植物比较有何主要变化
1.绘藓精子器、颈卵器构造图。
2.绘葫芦藓植株外形图。
3.绘贯众孢子叶横切细胞图示孢子囊群,并绘一孢子囊的放大细胞图。
附录一
实验中常用溶液的配制
一、固定液的配制
1.取70%酒精90ml,加入5ml甲醛和5ml冰醋酸即成。
2.卡诺固定液
取3份95%的酒精和1份冰醋酸混合即成。
不宜长期保存。
3.盐酸——酒精固定离析液
将浓盐酸1份和95%酒精1份等量混合后,即可使用。
二、番红染色液
1.将1g番红溶于100ml50%酒精中,配成1%浓度的番红染色液
2.固绿染色液
将固绿溶于100ml95%酒精,配成%固绿染色液
3.改良苯酚品红染液
按下列顺序配制:
母液A:
取3g碱性品红,溶于100ml的70%酒精中,此液可以长期保存。
母液B:
取A液10ml,加入90ml15%苯酚(即石炭酸)水溶液,在2周内使用。
苯酚品红染液(C):
取B液55ml,加入6ml冰醋酸和6ml37%甲醛,可长期保存。
改良苯酚品红液(D):
取10~20mlC液,加入90~80ml45%冰醋酸和1g山梨醇,2周后使用。
核和染色体呈鲜紫红色,细胞壁、细胞质不着色,是很好的核染色剂。
三、其他
1.铬酸——硝酸离析液的配制
先取10ml铬酸加入90ml蒸馏水中,再取10ml浓硝酸加入另外90ml蒸馏水中,将上述两液等量混合备用。
此液适于对导管、管胞和纤维等木质化的组织进行解离时使用。
2.碘——碘化钾溶液的配制
先用3g碘化钾溶于100ml蒸馏水中,再加入1g碘,溶解后即可使用。
若用于淀粉的鉴定,还要稀释3~5倍,用于观察淀粉粒上的轮纹,则需稀释100倍以上。
3.各级酒精的配制
由于无水酒精价格较高,故常用95%的卫生酒精加上一定量的蒸馏水配制稀释的酒精。
具体配方见下表:
欲配的浓度95%酒精用量加入的蒸馏水量
85%85ml10ml
70%70ml
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