执业助理医师考试生物化学总12章 9Word文件下载.docx
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(三)基本单位
核酸的基本组成单位为核苷酸。
碱基与戊糖通过糖苷键连接形成核苷;
核苷与磷酸通过磷酸酯键相连接构成核苷酸。
根据戊糖2-位碳原子是否含有羟基,分为核苷酸或脱氧核苷酸。
核苷酸存在于RNA分子中,而脱氧核苷酸存在于DNA分子中。
核苷酸中戊糖上的所有游离羟基均可与磷酸形成酯键,但生物体内多数核苷酸的磷酸连接在核糖或脱氧核糖的C-5′上,形成5′-核苷酸。
含有l个磷酸基团的核苷酸称为核苷一磷酸(NMP),含有2个磷酸基团的核苷酸称为核苷二磷酸(NDP),有3个磷酸基团的核苷酸称为核苷三磷酸(NTP)。
如AMP是腺苷一磷酸,GDP是鸟苷二磷酸,CTP是胞苷三磷酸。
第二节 DNA的结构与功能
(一)一级结构
四种脱氧核苷酸按一定的排列顺序,以3′,5′-磷酸二酯键相连接,形成多聚脱氧核苷酸链,即DNA。
DNA的一级结构是指DNA分子中核苷酸的排列顺序及其连接方式。
DNA分子中脱氧核苷酸的连接有严格的方向性,前一个脱氧核苷酸的3′-羟基(-OH)下一个脱氧核苷酸的5′-磷酸形成3′,5′-磷酸二酯键,从而构成一个没有分支的线性大分子,其两个末端分别是5′-末端(游离磷酸基)和3′-末端(游离羟基)。
(二)DNA双螺旋结构
DNA分子的组成中:
①腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔数总是相等(A=T),鸟嘌呤与胞嘧啶的摩尔数总是相等(G=C);
②不同生物种属的DNA碱基组成不同;
③同一个体的不同器官、同组织的DNA具有相同的碱基组成。
1953年JamesWatson和FrancisCrick两位青年科学家提出了著名的DNA右手双螺结构模型,确立了DNA的二级结构,其结构要点:
1.DNA分子由两条反向平行互补的多核苷酸链组成,一条链走向5′—3′,另一条链3′一5′;
两条多核苷酸链通过碱基之间的氢键连接在一起。
A与T、G与C配对。
2.两条链都以右手螺旋,围绕同一中心轴构成双螺旋结构,脱氧核糖与磷酸相连构成的链状骨架位于螺旋的外侧,碱基位于螺旋的内侧。
螺旋表面有两条凹槽,一条深宽称为深沟、一条浅窄称为浅沟,沟状结构与蛋白质、DNA之间的相互识别有关。
3.双螺旋每10个核苷酸旋转一周,每一螺距为3.4nm。
螺旋的纵向稳定性靠碱基平面间的疏水性堆砌力维持。
小结:
与蛋白质比较,核酸一般不含S,而P的含量较为稳定,占9-11%。
核酸的基本结构单位:
核苷酸
核苷酸的组成:
含氮碱基、戊糖和磷酸。
DNA和RNA的组成区别:
一级结构是指核酸分子中核苷酸的排列顺序及连接方式
核苷酸的连接方式:
3¢,5¢磷酸二酯键
多核苷酸链的方向:
5ˊ端→3ˊ端
碱基组成规则(Chargaff规则)
[A]=[T],[G]=[C];
[A]+[G]=[T]+[C]
有种属特异性
无组织、器官特异性
不受年龄、营养、性别及其他环境等影响
Watson-Crick双螺旋结构模型
1)反平行双链:
脱氧核糖-磷酸骨架位于外侧,碱基对位于内侧
2)碱基互补配对:
AT配对(两个氢键),GC配对(三个氢键);
碱基对平面垂直纵轴
3)右手双螺旋:
螺距为3.4nm,直径为2.0nm,10bp/圈
4)表面功能区:
小沟较浅;
大沟较深,是蛋白质识别DNA碱基序列的基础
5)维持结构稳定的力量:
氢键维持双链横向稳定,碱基堆积力维持螺旋纵向稳定
第三节 RNA的结构与功能
RNA主要分为信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)和核糖体RNA(rRNA)三类。
此
外还有近年很受重视的小分子RNA(miRNA)。
(一)mRNA
DNA通过转录而产生mRNA,使DNA遗传信息传至RNA分子,并以此作为蛋白质合成的模板,决定合成蛋白质的氨基酸排列顺序。
mRNA约占总RNA的3%。
真核细胞核内合成的mRNA初级产物是不均一核RNA,其分子量比成熟的mRNA大,经剪接生成成熟的mRNA,并移位到细胞质。
mRNA的结构特点如下:
1.mRNA分子为单链,从5′-端的AUG开始,每3个核苷酸为一组,决定肽链上的一个氨基酸。
按一定顺序排列的3个核苷酸称为三联体密码。
2.大多数真核mRNA的5′端在转录后均加上一个7-甲基鸟苷二磷酸基,形成mTGpppN的结构,称为帽子结构。
3.绝大多数真核mRNA的3′-端有200多个腺苷酸的尾巴,这是在转录后逐个添加上去的,其作用在于增加mRNA的稳定性和维持其翻译活性。
(二)tRNA
tRNA是主要功能是携带蛋白质合成所需的氨基酸,并按mRNA上的密码顺序,将其转运到mRNA分子上。
每种tRNA只能运载一种氨基酸,但一种氨基酸可以由一种或一种以上的tRNA运载。
tRNA的结构特点如下:
1.tRNA分子是单链,碱基互补的片段形成局部双螺旋结构,呈三叶草形二级结构。
5′-端和3′-端7对碱基组成的螺旋区称氨基酸臂,能直接与氨基酸结合,在3′末端为CCA,被激活的氨基酸就连接于此3′末端核糖的3′-OH上。
反密码环由7个核苷酸组成,第3、4、5三个核苷酸组成反密码子,携带不同氨基酸的tRNA有其特异的反密码子,与mRNA上相应的密码子互补。
2.tRNA分子中含有较多的稀有碱基,每一分子常含有7~15个稀有碱基,包括假尿嘧啶(ψ)、次黄瞟呤(I)、双氢尿嘧啶(DHU)和甲基化的嘌呤等。
3.tRNA的三级结构呈倒L型,一端为氨基酸臂,另一端为反密码子。
L型的拐角处是DHU环和Tψc环。
(三)rRNA
rRNA是细胞内蛋白质合成的场所,由蛋白质和RNA结合组成。
rRNA是细胞内含量最多的RNA,真核生物含有4种rRNA,其中28S、5.8S和5s存在于大亚基,小亚基只含有l8S一种。
小结
mRNA:
1.5’端“帽子”:
m7GpppNm-。
2.3’端“尾巴”:
polyA。
3.中部:
其前体包含“外显子”和内含子,需加工去除内含子。
外显子以“密码子”形式体现遗传信息
4.功能:
蛋白质生物合成的模板。
5.细胞内特点:
短寿,少量,多样
tRNA:
1.二级结构为“三叶草”型,“倒L”型三级结构
2.氨基酸臂:
3`末端的CCA-OH3`单链用于连接该tRNA转运的氨基酸。
3.反密码环:
反密码环中部的三个碱基可以与mRNA的三联体密码形成碱基互补配对,解读遗传密码,称为反密码子
转运氨基酸到蛋白质合成的场所。
rRNA:
1.有大小两个亚基做成。
2.功能:
与特殊蛋白质一起组成核蛋白体,为蛋白质生物合成提供场所
第四节 核酸的理化性质
核酸是两性电解质,在一定pH条件下带有电荷,可用电泳或离子交换方法分离。
(一)核酸的紫外吸收
核酸分子的碱基含有共轭双键,在260nm波长处有最大紫外吸收,可利用这一特性对核酸进行定量和纯度分析。
(二)DNA变性和复性
DNA变性是指在某些因素作用下,DNA双链互补碱基之间的氢键发生断裂,DNA双螺旋分子被解开成单链的现象。
DNA变性的本质是互补碱基之间的氢键断裂而破坏DNA二级结构,但不影响一级结构即碱基的排列顺序。
引起DNA变性的因素有加热和化学物质的作用,如有机溶剂、酸、碱、尿素和酰胺等。
DNA的变性是可逆的,热变性后温度缓慢下降时,解开的两条链可重新缔合形成双螺旋,这一过程称为DNA的复性。
若复性的温度缓慢下降,可以使DNA复性至天然状态,若在DNA变性后,温度突然急剧下降到4℃以下,复性则不能进行,这是保存DNA变性状态的良好办法。
DNA变性与复性的原理在分子生物学中已被广泛地应用。
分子杂交与PCR都是基于原理设计的。
1.紫外吸收,260nm
2.DNA变性:
DNA变性是指在理化因素作用下,DNA分子中的氢键断裂,碱基堆积力遭到破坏,双螺旋结构解体,双链分开形成单链的过程。
3.变性后的DNA一级结构没有改变。
第五节 核苷酸的代谢
食物中的核酸主要以核蛋白形式存在,核蛋白在胃中被胃酸水解成核酸与蛋白质。
核酸进入小肠,在胰液和肠液中的各种水解酶催化下不断被水解,生成核苷酸及其进一步的水解产物磷酸、碱基、戊糖,这些消化产物可被肠黏膜吸收,核苷酸、核苷还可在肠黏膜细胞内进一步分解。
体内核苷酸主要由细胞自身合成,不需从食物提供,因此核苷酸不是营养必需物质。
(一)嘌呤核苷酸的分解产物
嘌呤核苷酸首先在核苷酸酶的作用下水解生成核苷,再经核苷磷酸化酶催化,生成游离的嘌呤碱与核糖-1-磷酸。
核糖-1-磷酸可进一步转变成核糖-5-磷酸,用于合成新的核苷酸,也可经磷酸戊糖途径氧化分解。
AMP和GMP首先分别脱氨和氧化脱氨生成IMP和鸟嘌呤,再生成次黄嘌呤。
次黄嘌呤被黄嘌呤氧化酶催化生成黄嘌呤,进一步氧化生成尿酸,并随尿液排出体外。
嘌呤代谢异常导致尿酸过多会引起痛风症,患者血中尿酸含量升高(血尿酸>
8mg/dl),尿酸盐晶体可沉积于关节、软组织、软骨及肾等处,导致关节炎、尿路结石及肾疾病。
痛风可能是一种多基因病,某些参与嘌呤核苷酸代谢的酶先天性缺陷可引起痛风症,主要表现为尿酸生成增多,产生高尿酸血症。
临床上常用次黄嘌呤的类似物别嘌呤醇(allopurino1)来治疗痛风症,别嘌呤醇是黄嘌呤氧化酶的竞争性抑制剂,能抑制尿酸的生成;
别嘌呤醇还可与PRPP反应生成别嘌呤醇核苷酸,这不仅消耗核苷酸合成所必需的PRPP,还作为IMP的类似物代替IMP反馈抑制嘌呤核苷酸的从头合成。
(二)嘧啶核苷酸的分解产物
嘧啶核苷酸是在核苷酸酶和核苷磷酸化酶的催化下,生成磷酸、核糖和嘧啶碱。
胞嘧啶脱氨基转化成尿嘧啶,并继之再还原成二氢尿嘧啶,二氢尿嘧啶水解开环,最终生成NH3、C02和β-丙氨酸。
胸腺嘧啶水解生成NH3、C02和β-氨基异丁酸。
β-氨基异丁酸可进一步代谢或直接随尿排出。
3.嘧啶核苷酸的分解代谢:
最终产物:
β氨基酸、CO2、NH3
例题:
10.关于DNA的二级结构(双螺旋结构),正确的是
A.两条同向的多核苷酸
B.两条反向的多核苷酸
C.腺嘌呤和鸟嘌呤配对
D.碱基之间以共价键连接
E.磷酸骨干在双螺旋之中
[答疑编号500827080101]
『正确答案』B
12.DNA和RNA完全水解后,产物的特点是
A.糖不同,碱基相同
B.糖相同,碱基不同
C.糖相同、碱基部分不同
D.糖不同、碱基部分不同
E.糖和碱基都相同,只是含量多少不同
[答疑编号500827080102]
『正确答案』D
14.下列哪种碱基只见于DNA而不见于RNA
A.腺嘌呤
B.鸟嘌呤
C.胞嘧啶
D.尿嘧啶
E.胸腺嘧啶
[答疑编号500827080103]
『正确答案』E
60.下列有关RNA的叙述错误的是
A.tRNA是细胞内分子量最小的一种RNA
B.RNA主要有mRNA、tRNA和rRNA三类
C.胞质中只有mRNA和tRNA
D.RNA并不全是单链结构
E.rRNA可与蛋白质结合
[答疑编号500827080104]
『正确答案』C
62.DNA碱基组成的规律是
A.A=C:
T=G
B.A=T:
G=C
C.A+T=G+C
D.A=G=T=C
E.(A+T)/(C+G)=1
[答疑编号500827080105]
『正确答案』B
63.DNA变性时其结构变化表现为
A.磷酸二酯键断裂
B.N—C糖苷键断裂
C.碱基内C—C键断裂
D.戊糖内C—C键断裂
E.对应碱基间氢键断裂
[答疑编号500827080106]
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