高中生物《微生物的实验室培养》教案5 新人教版选修1Word文件下载.docx
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(2)原核生物界(细胞结构有何特点?
代表生物?
)(3)真菌界(真核生物,代表生物:
酵母菌、霉菌、大型真菌等)(4)原生生物界(真核生物、单细胞,代表生物:
草履虫、变形虫、疟原虫、裸藻、小球藻、衣藻等)
新课教学:
一、细菌
出示:
高中教材中涉及的细菌
乳酸菌、硝化细菌(代谢类型);
肺炎双球菌S型、R型(遗传的物质基础);
结核杆菌和麻风杆菌(胞内寄生菌);
根瘤菌、圆褐固氮菌(固氮菌);
大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌(基因工程);
苏云金芽孢杆菌(为抗虫棉提供抗虫基因);
假单孢杆菌(分解石油的超级细菌);
谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌(微生物的代谢);
链球菌(一般厌氧型);
产甲烷杆菌(严格厌氧型)
提出问题:
如何判断一种菌是细菌?
(名称中带细菌字眼、形状上判断、特例)
1、细菌的形态(球形/杆形/螺旋形)
细菌的结构示意图,复习细菌的结构。
2、细菌的结构与功能
(1)基本结构与功能
结构
化学本质
功能或应用
细胞壁
细胞膜
细胞质
基质
核糖体
质粒
贮藏性颗粒
核区
细胞壁:
成分?
作用?
如何破坏细胞壁?
(青霉素)
细胞膜:
(有氧呼吸场所)
细胞质:
含有的结构有?
质粒的化学本质?
上有哪些基因?
存在部位?
在基因工程中有何作用?
所有的质粒都可作为基因工程的运载体吗?
需具备哪些条件?
拟核:
(2)特殊结构和功能
功能
举例说明何种细菌具有
荚膜
鞭毛
芽孢
3、细菌的繁殖及菌落
教师提问:
我们知道,生物的繁殖方式很多,而且在不同条件下,生物的主要繁殖方式又各不相同。
例如,酵母菌在环境适宜时,主要通过出芽生殖方式来繁殖后代。
那么细菌在环境条件适宜时的主要生殖方式是什么呢?
(1)细菌的繁殖
繁殖方式:
二分裂。
教师呈示问题情景:
那么细菌的二分裂过程又是怎样的呢?
这种分裂方式与以前学习的有丝分裂、减数分裂、无丝分裂是否一样?
如果不一样,它又有何特点呢?
多媒体演示并分析二分裂的过程:
(略)。
提示学生与真核生物的其他三种分裂方式做比较。
细菌二分裂的繁殖方式使细菌能快速增殖(N=2k)并在培养基上能形成菌落。
(2)细菌的菌落
出示菌落图片,学生自主阅读。
何谓菌落?
归纳菌落概念。
(关键词:
单个或少数细菌、固体培养基)
进一步追问:
(1)既然一个菌落是由一个或数个同一种类的细菌经过增殖形成的群体,那么菌落在生态学上属于什么单位?
(2)若要形成标准菌落,应选用几个细菌培养?
(3)不同种类的细菌形成的菌落,在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征,这有什么作用?
(4)记住以下实例:
无鞭毛的球菌、有鞭毛的细菌、R型与S型的肺炎双球菌、在伊红-美蓝培养基中培养的大肠杆菌菌落分别有何特征?
菌落特征
无鞭毛的球菌
有鞭毛的细菌
R型肺炎双球菌
S型肺炎双球菌
伊红-美蓝培养基培养大肠杆菌
呈示问题情景:
同学们思考一个问题:
培养细菌的培养基能否用来培养病毒?
为什么?
如果不可以,那么在科研中培养HIV病毒应使用什么培养基呢?
要解答这个问题,首先要了解病毒的结构和繁殖问题。
二、病毒
出示病毒的结构示意图,请同学填空。
1、病毒的结构
基本结构:
核衣壳
核酸:
贮存病毒的全部遗传信息,控制着病毒的一切性状,如病毒的形态结构、致病性等。
(一种病毒只含有一种核酸,DNA或RNA)
衣壳:
化学本质:
蛋白质,作用:
保护病毒核酸、决定病毒特异性等
衣壳粒:
电镜下能够看到的最小形态单位,通常由1~6个多肽分子组成。
病毒出现球形、杆形、蝌蚪形的直接原因?
根本原因?
特殊结构:
囊膜、刺突(如流感病毒)
某科学家在一实验时,以同位素示踪技术来研究病毒的增殖过程,他以32S标记噬菌体的衣壳的蛋白质,以31P标记噬菌体的核酸;
当这样一个噬菌体去侵染一个以35S标记蛋白质、以32P标记核酸的细菌后,共释放出n个噬菌体,其中,含有31P标记核酸的噬菌体占总数的2/n,而且,所有病毒的衣壳中均只有35S标记蛋白质,这是为什么呢?
2、病毒的增殖
师生互动:
打开多媒体课件,学生观察并思考问题,教师结合问题分析。
增殖场所:
增殖过程:
同学们,有的细菌可使人体致病,但医疗部门为治疗这些疾病提供了大量的抗生素,你们知道这些抗生素主要是由什么微生物产生的呢?
三、放线菌
学生回答:
放线菌。
放线菌在结构、繁殖方式上与细菌是否相同?
如不同,请说出它们之间的异同?
师生共同活动:
学生自主学习课本P75放线菌内容,在小组内讨论,教师巡视指导。
总结:
(1)形态构造上放线菌是一类具有丝状分枝的单细胞原核生物。
其分枝状的菌丝可分为:
基内菌丝,伸入到培养基内部,色淡、较细,具有吸收营养和排泄代谢废物的功能;
气生菌丝,在基内菌丝上不断向空间分化,伸展在空气中的较粗、颜色较深的菌丝;
孢子丝,菌丝逐步成熟后,大部分气生菌丝分化为通过割裂方式产生成串的分生孢子的孢子丝,孢子丝形态多样,有杆形、波浪形、螺旋形等,且性状较稳定,是分类鉴定的重要指标。
(2)放线菌的繁殖方式:
主要为孢子生殖。
(3)放线菌的生产应用:
常用的抗生素,除青霉素和头孢霉素不是放线菌的产物外,多数抗生素都是放线菌的产物,如链霉素、红霉素等;
除此之外,放线菌还能产生酶类和维生素;
分解纤维素、石蜡、琼脂、橡胶等复杂有机物,提高土壤肥力,净化环境。
[教学目标巩固]
1、学生思考细菌的一般结构与特殊结构,并列表比较原核生物与真核生物在细胞结构上的异同。
2、学生思考病毒的一般结构与特殊结构以及病毒的增殖过程。
2019-2020年高中生物《微生物的实验室培养》教案6新人教版选修1
教学目标:
(一)知识与技能
了解有关培养基的基础知识;
掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术
(二)过程与方法
分析实验思路的确定和形成的原因,分析实验流程,对比前面的实验设计,归纳共性,分析差异,增加印象
(三)情感、态度与价值观
形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神
教学重点:
无菌技术的操作
教学难点:
无菌技术的操作
教学过程:
(一)引入新课
在传统发酵技术的应用中,都利用了微生物的发酵作用,其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中,为了提高发酵的质量,需要获得优良菌种,并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
(二)进行新课
1.基础知识
1.1培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖,在配制培养基中用作为凝固剂。
【补充】培养基的类型及其应用:
标准
培养基类型
配制特点
主要应用
物理性质
固体培养基
加入琼脂较多
菌种分离,鉴定,计数
半固体培养基
加入琼脂较少
菌种保存
液体培养基
不加入琼脂
工业生产,连续培养
化学组成
合成培养基
由已知成分配制而成,培养基成分明确
菌种分类、鉴定
天然培养基
由天然成分配制而成,培养基成分不明确
工业生,产降低成本
目的用途
鉴别培养基
添加某种指示剂或化学药剂
菌种的鉴别
选择培养基
添加(或缺少)某种化学成分
菌种的分离
1.2培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?
C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素,约占原生质总量的97%以上。
【补充】碳源:
如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:
如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
1.3培养基除满足微生物生长的pH、特殊营养物质和氧气等要求。
【补充】生长因子:
某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子,如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素,培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性,培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
活动2:
阅读“无菌技术”,讨论回答下列问题:
1.4获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
1.5无菌技术包括:
(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;
(2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;
(3)为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行;
(4)避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
1.6比较消毒和灭菌(填表)
比较项
理化因素的作用强度
消灭微生物的数量
芽孢和孢子能否被消灭
消毒
较为温和
部分生活状态的微生物
不能
灭菌
强烈
全部微生物
能
〖思考5〗无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是防止感染实验操作者。
1.7消毒方法:
(1)日常生活经常用到的是煮沸消毒法;
(2)对一些不耐高温的液体,则使用巴氏消毒法(作简要介绍);
(3)对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒。
(4)实验操作者的双手使用酒精进行消毒;
(5)饮水水源用氯气进行消毒。
1.8灭菌方法:
(1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;
(2)玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;
(3)培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。
(4)表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。
〖思考6〗对接种环灭菌时要用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位。
〖思考7〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,目的是避免妨碍热空气流通。
〖思考8〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是有利于锅内温度升高;
随后关闭排气阀继续加热,气压升至100kPa,温度为121℃,并维持15~30min;
最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至零时打开锅盖,其目的是防止容器中的液体暴沸。
【补充】培养基的配制原则:
①目的要明确:
根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
②营养要协调:
培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
例如:
碳氮比4∶1时,谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少;
碳氮比为3∶1时,菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
③pH要适宜:
细菌培养基pH中性或偏碱性,霉菌培养基呈酸性。
2.实验操作
2.1计算:
根据配方比例,计算100mL培养基各成分用量。
2.2称量:
准确称取各成分。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
2.3溶化:
①加水加热熔化牛肉膏;
②加入蛋白胨和氯化钠继续加热;
③加入琼脂;
④用蒸馏水定容到100mL。
整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
2.4调pH:
用1mol/LNaOH溶液调节pH至偏碱性。
2.5灭菌:
将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌;
所用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。
2.6倒平板:
待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是:
①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞;
②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰;
③左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置。
〖思考1〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是消灭瓶口的杂菌,防止杂菌感染培养基。
〖思考2〗倒平板的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。
〖思考3〗若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板能否培养微生物?
不能。
空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖,并污染皿内培养基。
〖思考4〗配制斜面培养基中,试管要加塞棉塞的目的是保持通气并防止杂菌感染。
〖思考5〗试管培养基形成斜面的作用是增大接种面积。
2.7接种
2.7.1微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释涂布法,另外还有穿刺接种和斜面接种等。
2.7.2平板划线法:
通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。
其操作步骤是:
①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。
④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙,把接种环伸入平板内划3~5条平行线,盖上皿盖,不要划破培养基。
⑦灼烧接种环,冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。
重复上述过程,完成三、四、五区域内划线。
注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。
⑧将平板倒置放在培养箱中培养。
〖思考6〗取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物;
除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种;
取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行,其目的是防止高温杀死菌种;
最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
〖思考7〗在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是获得由单个细菌形成的标准菌落。
2.7.3 稀释涂布平板法:
将菌液进行一系列梯度稀释,并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌落。
2.7.4 系列稀释操作:
①取盛有9mL水的无菌试管6支,编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中,并吹打3次,使之混匀。
③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获得102倍液。
依此类推。
〖思考8〗操作中试管口和移液管应在离火焰1~2cm处。
整个操作过程中使用了1支移液管。
3.结果分析与评价
3.1 培养未接种培养基的作用是对照,若有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底。
3.2 在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整齐。
3.3 培养12h和24h后的菌落大小不同(相同、不同);
菌落分布位置相同(相同、不同)。
原因是时间越长,菌落中细菌繁殖越多,菌落体积越大;
菌落的位置不动,但菌落数增多。
〖思考9〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落,原因有培养基灭菌不彻底或杂菌感染等。
〖思考10〗频繁使用的菌种利用临时保藏法保存,长期保存菌种的方法是甘油管藏法。
前者利用固体斜面培养基培养后,保存在4℃冰箱中,每3~6个月转种培养一次,缺点是保存时间较短,容易发生污染和变异;
后者将菌种与无菌体积等量混合后保存在-20℃冷冻箱中。
(三)课堂总结、点评
(四)实例探究
例1.关微生物营养物质的叙述中,正确的是
A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量
解析:
不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。
对于A、B选项,它的表达是不完整的。
有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;
有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;
有的碳源同时是能源,如葡萄糖;
有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。
对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。
如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;
NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;
而NaCl则只能提供无机盐。
对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。
答案:
D
例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是
A.防止杂菌污染B.消灭杂菌
C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前
灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。
A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;
B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。
C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;
发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。
B
综合应用
例3.右表是某微生物培养基成分,请据此回答:
编号
成分
含量
①
粉状硫
10g
②
(NH4)2SO4
0.4g
③
K2HPO4
4.0g
④
MgSO4
9.25g
⑤
FeSO4
0.5g
⑥
CaCl2
⑦
H2O
100ml
(1)右表培养基可培养的微生物类型
是。
(2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。
如不想浪费此培养基,可再加入,
用于培养。
(3)若除去成分②,加入(CH2O),该培
养基可用于培养。
(4)表中营养成分共有类。
(5)不论何种培养基,在各种成分都溶化
后分装前,要进行的是。
(6)右表中各成分重量确定的原则
(7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是。
对于一个培养基,它能培养何种微生物,要看它的化学成分。
当然这只适用于合成培养基,如果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上区分它是培养何种微生物的。
分析化学成分要从营养物质的类型出发。
右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类,缺乏碳源和特殊营养物质。
对特殊营养物质,有的微生物是不需要的,但没有微生物是不需要碳源的。
该培养基中没有碳源,说明培养的微生物是从空气中获得碳源的,即可培养的微生物就是自养型微生物了。
该培养基中加入了过量食盐,就可以成为金黄色葡萄球菌鉴别培养基,但金黄色葡萄球菌是异养型微生物,这个培养基就还需要加入有机碳源。
该培养基若加入(CH2O),培养基中就有了碳源,但除去成分②,却使培养基中没有了氮源,这时就只能用于培养固氮微生物了。
对于菌种鉴定,往往用的是固体培养基,而表中没有凝固剂,需要加入常见的凝固剂——琼脂。
⑴自养型微生物⑵含碳有机物金黄色葡萄球菌⑶固氮微生物⑷3⑸调整pH⑹依微生物的生长需要确定⑺琼脂(或凝固剂)
(五)巩固练习
1.不可能作为异养微生物碳源的是
A.牛肉膏B.含碳有机物C.石油D.含碳无机物
2.根瘤菌能利用的营养物质的组别是
A.NH3,(CH2O),NaClB.N2,(CH2O),CaCl2
C.铵盐,CO2,NaClD.NO2,CO2,CaCl2
3.配制培养基的叙述中正确的是
A.制作固体培养基必须加入琼脂B.加入青霉素可得到放线菌
C.培养自生固氮菌不需氮源D.发酵工程一般用半固体培养基
4.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是
A.碳源B.氮源C.无机盐D.特殊营养物质
5.下表是有关4种生物的能源、碳源、氮源和代谢类型的概述。
其中正确的是()
生物
硝化细菌
根瘤菌
酵母菌
谷氨酸棒状杆菌
能源
氧化NH3
N2的固定
分解糖类等有机物
光能
碳源
C02
糖类
氮源
NH3
N2
NH4+、NO3-
尿素
代谢类型
自养需氧型
异养需氧型
异养兼性厌氧型
A.根瘤菌、谷氨酸棒状杆菌B.硝化细菌、酵母菌
C.酵母菌、谷氨酸棒状杆菌D.硝化细菌、根瘤菌
6.甲、乙、丙是三种微生物,下表Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。
甲、乙、丙都能在Ⅲ种正常生长繁殖;
甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;
乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。
下列说法正确的是()
4g
蔗糖
Ⅰ
+
-
Ⅱ
Ⅲ
A、甲、乙、丙都是异养微生物
B、甲、乙、丙都是自养微生物、丙是异养微生物
C、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
D、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物
7.微生物(除病毒外)需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。
下列有关微生物营养的说法正确的是
A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的
B.微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子
C.培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利
D.生长因子一般是酶或核酸的组成成分,微生
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