德国GONOTEC 050 胶体渗透压仪操作说明Word文件下载.docx
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1.图
2.安装和启动
3.准备测量池
4.校准OSMOMAT050
5.测量血浆胶体渗透压
管的长度:
在装入半透膜和拧紧测量池的过程中,OSMOMAT050内部的压力状况。
压力测量系统将会损坏!
声信号响
灯亮
18
逐渐地分步拧紧测量池,直到用手拧不动凸缘螺钉(34)。
装入渗透膜和拧紧测量池时的压力范围
安全范围
一旦进入此范围,将无法控制压力。
因此压力绝对不能进入此范围。
样品中不含低分子量成分的当样品中低分子量成分渗透过当半透膜膜孔堵塞时的渗透压平衡
正常的渗透压平衡,半透膜时的渗透压平衡。
(测量在4.5分钟后停止,或需要
9分钟时间)
第一个测量值第二个测量值第一个测量值第二个测量值第一个测量值第二个测量值
测量时间“a”和“b”相等。
记录第一个测量值的时间是测量值稳定后,或是在转折点处。
2.0安装和启动
收到仪器后,小心地拆封。
检查仪器是否有因运输导致的损坏。
如果有,通知负有责任的邮局、铁路、船运公司、代理商或制造商。
制造商:
Gonotec,Gesellschaftfü
rMeβ-
UndRegeltechnikmbH
EisenacherStr.56
D-1000Berlin62
Tel.:
030/7846027
2.1安装
OSMOMAT050应放置在无震动并且远离热源的地方。
此外,放置设备的表面必须是平稳的,否则压强传感器的灵敏性感和最终结果的自动测定,都将会受到影响。
2.2连接
用电源线(标配件)将OSMOMAT050与供电系统连接。
确保线电压与设备背面标示牌标示的一致。
还有必须注意设备是否正确地接地线。
如果更换了插头,必须保证黄绿线接地。
2.3开启OSMOMAT050
按设备背面电源插口上方的开关,打开设备。
设备即使很长一段时间不使用,也应该一直保持接通电源。
在每隔一段时间,测量池会自动清洗,以便OSMOMAT050随时都可以进行测量。
3.0准备测量池
除了配件中包含的工具,准备测量池还需要相应的溶剂预处理半透膜和滤纸。
3.1溶剂林格液
林格液应是纯电解质的,不含其他乳酸盐或溶质。
如果没有可用的林格液,可自行配制。
氯化钠0.8g
氯化钾0.02g
氯化钙0.02g
碳酸氢纳0.1g
蒸馏水100ml
有些情况,也可以使用浓度0.9%的等渗盐溶液。
使用的溶剂中不能含有任何气体。
如果有必要,使用前加热溶剂至沸点除气或放入真空中除气。
一般的情况下,用30ml的注射器(标配件)就能将溶剂中的气体去除(图6)。
连接橡胶管,吸入约20ml的溶剂。
然后用管夹夹住管。
用力拉注射器内芯,在注射器内部产生负压(图6)。
保持这样的真空条件几秒中,并振动注射器。
将注射器中除气的溶剂直接注入下半测量池(图5)。
3.2.0准备半透膜
选择合适的膜
+0
-0.5
如果可能,使用膜孔较小的膜。
膜的外径是25mmφ。
其他制造商的膜可能会稍大,用剪刀修剪到正好的尺寸。
建议使用的膜的截留量为10,000g/mol,货号02.04.12和
20,000g/mol,货号02.04.11.
通常,提供的膜都是干燥的,并且膜孔涂有甘油。
因此在将膜装入测量池之前,需将膜放在溶剂中浸泡一段时间。
最适合盛装溶剂的容器需带有盖子的烧杯(图7)。
其内部是由Gonotec提供的膜。
3.2.1预处理膜
烧杯中盛装1cm高的林格液。
然后将膜放入溶液(请注意,膜的上侧面一直朝上,以便保证膜的位置正确)。
膜在干燥的状态下,下侧面要比上侧面粗糙。
当在林格液中短时间浸湿膜后,用镊子将膜垂直方向夹起,可以观察到膜的上侧面(作用层)膜孔较小,液体从其表面滑落说明其具有憎水性。
而下侧面(支撑层)膜孔较大,并且完全浸湿了。
膜需负载O形橡胶环(44,图4),以防止膜漂浮在液体表面。
一段时间后,膜表面将出现暗点。
暗点会逐渐慢慢地扩散到整个表面。
这个过程需约30分钟,当膜完全浸湿(即呈现暗色),才可以将其装入测量池使用。
处理完膜后,膜孔将充满林格液。
此后必须防止膜再次干燥,否则膜将会收缩,膜孔会非常明显地缩小。
建议每次至少处理2个膜,以便需要时可随时更换。
润湿的膜可放在林格液中保存,放在+4℃的冰箱中可保存很长一段时间,甚至几个月。
盛装林格液的烧杯必须盖紧。
3.3.0准备滤纸
建议用一个圆盘将膜固定,滤纸放在半透膜的下面。
滤纸可增加半透膜的厚度,使0.10到0.15mm的厚度增加到0.3mm。
滤纸也有助于测量池拧紧后在其内部产生的压强适当。
如果如果其他产商的膜(例如Amicon产家的膜,厚度为0.35mm)比较厚,可以不使用滤纸。
我们提供的滤纸夹在膜中间,作用相当于分离层。
润湿的滤纸可以重复使用,即使更换了膜。
3.3.1浸湿滤纸
必须小心正确地浸湿滤纸,去除滤纸上所有的气泡。
用流水冲洗滤纸。
冲洗时,避免滤纸弯曲。
然后再次润湿冲洗滤纸。
用水冲洗完后,将滤纸放入30ml的注射器内除气(图6)。
首先将滤纸弯曲放入注射器圆筒内,再插入注射器内芯。
然后注射器吸入约15ml的林格液,将其内部的空气排出,用管夹将管口夹住。
用力拉内芯产生负压,这样可将滤纸上残留的气体去除。
最后将滤纸从注射器内取出,放入林格液。
此时可将滤纸放入测量池使用。
3.4.0组装测量池
首先,旋松螺丝(34),除去测量池的连接管(29),侧推固紧装置(32),取出上半测量池。
第一次操作时,要注意:
在装运前,就已经将O形环(44)和滤纸(45)装入测量池中,用以保护测量池防止运输时对其造成损坏。
当更换半透膜时,注意:
必须用镊子将O形环(44)和旧的膜从测量池中夹出。
然后将O形环和滤纸放入装有林格液的烧杯中(图7),以防干燥。
3.4.1接通测量设备电源
在组装测量池的过程中,必须接通OSMOMAT050的电源,以便监测和控制内部压强保护压力测量系统。
1.打开设备背面的电源开关。
2.按按钮(22)。
按钮(22)上的指示灯亮约10到20秒后,数字显示器(13)显示数值“0.00”。
数字显示器与压力测量系统直接连接,实时显示压力测量系统内的压力情况。
3.4.2清洁和填充下半测量池
首先,将溶剂注入下半测量池(参考5.1),溶剂高度到测量池的上边缘(图5)。
然后滴加两到三滴的洗涤液,用棉质清洁棒或软棉纸仔细地清洁测量池。
然后将带有特殊插口的曲管注射器(16mm长)(标配件)的管头插入到下半测量池底端的垂直孔处。
这个孔是连接测量池和压力测量系统的通道,在这个孔顶端有一个敏感的隔膜。
用注射器将其吸起,使林格液进入孔中。
通过注射器的吸收和排放溶剂的方式,清洁孔,去除气泡。
然后用30ml的注射器将测量池内的液体吸出。
向测量池注入新的溶剂(参考5.1),这次不需滴加洗涤液。
用除气的新林格液反复地清洗孔(48)和下半测量池,直到剩余的洗涤液被清洗干净,防止溶剂因洗涤液产生泡沫。
每次吸出测量池内的液体,都必须直接再注入新的溶剂。
最后一次注入溶剂后,用注射器再次去除孔(48)中的气泡。
曲管注射器内芯不需拉到底端,避免空气通过注射器进入孔。
这些措施的目的是避免小气泡附着在测量池和孔(48)壁上。
当清洗孔(48)时,可观察到显示器上数值短暂的变化。
3.4.3最后组装测量池
按照顺序组装测量池,参照图4.
首先,将O形环(44)装入洁净无气泡并盛有除气林格液的下半测量池(33)。
膜和O形环在装入测量池之前就已经在林格液中浸泡。
其次,将滤纸(45)放入下半测量池底部。
小心产生气泡。
接下来将经过预处理的半透膜(46)放在滤纸上。
确保作用面朝上并且没有气泡产生。
这时轻轻下按,以便半透膜更好的置于测量池内。
然后,将上半测量池(35)放在无气泡的下半测量池(33)上。
正确的操作方法,先将上半测量池(35)的前边缘进入林格液,再小心地放低后边缘。
这样液体可从前到后地将边缘空气取代。
确保在黑色O形环(44)中没有气泡!
最后轻轻按住上半测量池,将固紧装置(32)推回到原来的位置,小心地拧螺丝(34)。
在这个过程中,林格液会从下半测量池溢出,聚集在溢流槽中,用吸附性好的软纸将其吸出。
3.4.4拧紧测量池
在拧测量池上的螺丝时,密封的测量池内会产生很大的超压。
但在溶剂渗透过半透膜后,超压很快会消失。
拧螺丝时要小心分步地用手拧不用使用其他工具,因为拧的速度过快,无法控制产生超压的强度,会损坏敏感的压力测量系统。
图8以厘米水柱的形式显示最大可接受超压的压强刻度。
如果指示灯(18)(OVERLOAD)亮,还可以继续拧螺丝的动作。
灯亮时的超压等于550cm水柱。
但是如果声信号响(吱的噪音),必须离开停止拧螺丝,否则超压将会损坏压力测量系统。
用手分步地拧螺丝,直到不能再你拧动螺丝(34)。
3.5操作前的管连接
如图3所示将管(标配件)连接。
只能使用制造商提供的聚乙烯管,其他材质的管会渗透空气致使管内产生气泡,从而影响测量结果,甚至阻碍测量的进行。
将聚乙烯管套在不锈钢管上,长度至少5mm。
如有必要,用工具(标配件,货号02.04.08)将管口轻微扩张。
将聚乙烯连接管(27)和(28)插入两个瓶盖的孔中。
然后在每个管上安装一个柱塞(41),以便管头保持在瓶底处。
在每个盖上还有另外一个孔,必须一直保持这个孔是开启的,以保证外界与瓶内气压平衡。
(管的长度:
管27=45cm;
管28=59cm;
管29=8cm;
管39=9.5cm)
3.6填充供液瓶
溶剂(5.1节,林格液)注入位于后面的供液瓶(25),然后将盖子拧上。
3.7填充废液瓶
位于前面的瓶(26)用于盛装清洗完测量池后的溶剂。
为安全起见避免传染,建议将废液瓶(26)中注入一定量的消毒剂,注入高度约5到10mm。
此外在每次测量前建议将废液瓶中注入一定量的液体,以便确保有一个注入高度在测量中作为零点的参考值,OSMOMAT050自动保存该数值。
使用仪器时,需每天清空废液瓶(26)并清洗。
3.8清洗测量池
在OSMOMAT050的背面,有一个按钮。
按这个钮,蠕动泵可脱离微处理器的程序控制,自行运作。
当按这个钮,溶剂被蠕动泵从供液瓶(25)中吸出,通过测量池然后进入废液瓶(26)。
在这个过程中,必须小心在测量池和管中不能有气泡。
但仅仅是占据整个横截面特别是在连接管内(27)的气泡才会对测量有影响。
正确的组装测量池后,在数字显示器上将会显示0到10厘米水柱之间的数值。
但是显示的测量值并不稳定,有很强的变动性。
因此,需对平衡性特性行初步测试。
将瓶(26)从平台(31)上取下,置于桌面上,液体柱中液位差将正好是10.0厘米水柱,显示器显示差值。
但必须注意,在这些条件下通常开始值是处于超压的范围,而显示的更低测量值是在负压范围。
因为显示器没有正负符号,所以两个测量值(瓶处于高位置的显示值和瓶处于低位置的显示值)必须相加。
4.00校准OSMOMAT050
设备测量的是盛装溶剂并与外界隔离的下半测量池的渗透负压。
压力测量系统的灵敏性必须通过校准的方式进行调节。
可通过测量和调节OSMOMAT050达到已知胶体摩尔浓度溶液的数值来完成此校准。
但是,因为胶体非常容易分解,这类溶液在制备完后必须立即使用,所以这样的校准方法只在一些特殊的情况下使用。
由于此原因,OSMOMAT050配有一个校准仪器,可直接校准压力测量系统。
校准前,完成测量前所需的所有准备工作。
测量池和所有的管都已充满溶剂,没有气泡。
如果瓶(26)置于平台(31)上,液柱产生的静压透过半透膜的孔影响着压力测量系统。
如果瓶(26)从平台(31)上移到桌面上,液柱的静压变化量为10.0cm水柱,趋向负压。
数字显示器(13)直接显示压强的变化,并作为测量结果,单位“厘米水柱”。
4.10用校准液校准OSMOMAT050
校准液必须满足下面的条件:
1.电解浓度必须与林格液的电解浓度相同。
2.胶体渗透压或它们的摩尔浓度必须是已知的。
在低分子量范围内,多分散胶体中的分子量不能低于半透膜的截留量。
有些情况下,也可能使用混合血浆,但混合血浆的胶体渗透压需是已知的。
给定渗透压的单位转换为“厘米水柱”,必须使用下面的因式:
毫米汞柱=1.36厘米水柱
千帕斯卡=10.197厘米水柱
4.11校准步骤
1.按按钮(19)(RESET)。
如果钮上指示灯亮,等待直到测量池清洗完后,指示灯1(STANDBY)闪烁。
2.按按钮(22)(CALIBRATION)。
如果钮上指示灯亮,等待直到数字显示器(13)显示“0.00”。
按按钮(22)后,测量系统根据瓶(26)中液体的高度自动调为零。
设备自动切换为“厘米水柱”。
(开始校准时,必须保证瓶(26)置于平台(31)上,连接管内充满溶剂,没有气泡!
)
如果条件满足,微处理器可不依据瓶(26)中液体的高度自动测定零点,
3.通过隔塞(36),将校准液注入测量池,至少注入150到200µ
l的溶液。
分三次注入溶液,每次注入测量池的量约为注射器容量的三分之一。
间歇期间不用将注射器从隔塞中拔出。
4.不久后(30秒到3分钟,取决于半透膜),显示最终数值,如有必要,转动电位器(21)校正数值。
4.20通过静压差校准OSMOMAT050
校准前,完成测量前所需的所有准备工作。
4.21校准步骤
2.按按钮(22)(CALIBRATION)。
3.将瓶(26)从平台(31)上移到桌面上。
数值差将正好是10.0cm。
如果测量值稳定后(约30秒),显示器显示的偏差大于10.0,立即转动电位器(21)调整数值。
4.然后,将瓶(26)再放回到平台(31)上,检验调整后的设置:
显示器应显示零。
如果在半透膜装入测量池后,立即进行校准,测量系统将有轻微的浮动。
这种情况下,当将瓶放回到平台(31)上后,设备重设不为零。
因此建议,直到压力条件完全稳定了,再执行校准。
如果显示数值被调回零,必须重新进行校准,按按钮(19)和(22)。
5.0测量血浆胶体渗透压
首先完成OSMOMAT050测量前的准备工作.
血浆样品必须混合肝素,防止凝固。
建议不要使用酒石酸溶液或其他抗凝固剂,因为它们对样品有很强的稀释能力。
5.1注入血浆样品
1.每次测量前都必须用溶剂清洗测量池,并且零点稳定。
如果进入此状态,指示灯1(STANDBY)闪烁。
如果不是这样,测量前按按钮(19)(RESET)清洗测量池,然后校正零点。
2.按按钮(24)(START),系统自动检验零点。
10秒钟后,前面板上的指示灯(10)(INJECT)和测量池上的指示灯(37)闪烁。
这时就可以注入样品了。
3.用注射器将肝素血浆样品通过隔塞(36)注入测量池,
建议使用带针头插口的专用注射器(配件)。
专用插口穿过橡胶塞时,会在橡胶塞上留下光滑自动封闭的小孔。
而普通插口垂直插入橡胶塞多次后,很可能导致橡胶颗粒脱落进入测量池,从而堵塞测量池。
此外,使用普通插口时,隔塞的使用寿命会明显地缩短。
在一些特殊的情况下,使用普通的插口必须考虑到一些特殊的问题。
一次测量的最小需要量是150µ
l。
这个最小量是清洗上半池必须的,最后这些溶剂将会被样品所取代。
首先,注射器中吸满样品(避免产生气泡!
)。
然后将注射器针头插入隔塞(36),直到针头抵到底部。
这样不会刺破半透膜。
然后,将注射器中的样品分三步间歇地注入测量池。
间歇地注入会增强清洗的效果,同时在测量池内也会产生超压脉冲。
当触发脉冲,OSMOMAT050开始测量程序。
在这个过程中,指示灯
(2)亮,显示器上之前的测量结果将被删除。
注入时,一定要小心避免注入气泡或泡沫。
最后,将针头从隔塞中拔出,用水清洗。
5.2测量池自动识别、保存和显示
注入样品后,指示灯
(2)亮。
一小段时间后,从第30秒到最大4.5分钟,在充满溶剂的下半测量池中达到渗透负压平衡状态。
这个平衡状态将被电子元件识别作为一个标准。
数字显示器(13)显示测量值。
同时,指示灯
(2)灭,而指示灯(3)和(11)亮。
此时获得的测量结果,即是胶体的摩尔浓度。
如果不按(14)、(15)和(16)按钮,OSMOMAT050显示的结果的单位是“毫米汞柱”,按钮指示灯(16)亮。
如果想要让结果以“厘米水柱”或“千帕斯卡”为单位显示,必须在测量前按按钮(14)或(15),即在按按钮(24)(START)之前。
如果需要OSMOMAT050尽快执行下一步测量,下一步记录测量值的自动测量程序可以节省很多的时间。
读取测量值后,按按钮(19)(RESET),溶剂自动清洗测量池,系统重设电子元件为零。
按按钮(24),指示灯(10)和(37)亮,此时可以注入样品。
5.3记录和保存第二个测量值
自动测量循环包括保存和显示测量结果(RESULT)、保存第二个测量结果(2.RESULT)、清洗测量池和重设零点。
通过简单保存和显示第一个测量结果的所有功能,以简单的方式参照平衡特性判断比较测量结果。
(图9,10,11),未使用记录仪。
指示灯(3)亮后,在保存测量结果前,OSMOMAT050将等待同注入样品到获得测量结果时相同的一段时间;
在这段时间,指示灯(4)、(5)和(6)中的一个会亮。
然后,测量池自动清洗。
按按钮(23)(RESULTCHECK),储存的第二个测量结果显示在显示器(13)上。
同第一个测量结果相比较:
如果平衡特性同图9的曲线图形一样,指示灯(5)亮;
如果第二个测量值偏离了第一个测量值超过了2个数字,指示灯(6)亮,这是由于低分子量渗透而导致的(图10);
如果是较慢的平衡特性,测量结果需很长的时间显示,在约4.5分钟后保存第一个测量值,而需再过4.5分钟后才能保存第二个测量值。
这时,指示灯(4)亮(图11)。
5.4自动清洗测量池和检测零点
在第二个测量结果保存和指示灯(4)、(5)和(6)中的一个亮了之后,溶剂自动分五个步骤清洗测量池。
在清洗和重设零点阶段,指示灯(7)亮。
OSMOMAT050故障检修
故障
原因
检修
1.装入新的膜后,很长的平衡时间
下半测量池中有气泡
打开并清洗测量池。
然后注入除气溶剂,装入新的膜
膜不渗透(膜的孔径太小,或者膜保存的时间太长)
装入截留量20,000道尔顿的新膜
2.使用一段时间后,平衡时间长
膜孔堵塞(例如蛋白分子)
装入新的膜
3.无测量结果:
当测量样品时,结果为零(正确校准过)
膜面的方向装错(作用面朝下)
装入新的膜(作用面朝上)
测量池拧的不够紧
将测量池再拧紧一些
4.测量结果的重复性不够(结果显示太慢)
泵的聚乙烯管太旧。
注入的部分样品流向泵。
换新泵管
在测量池和废液瓶之间的系统局部堵塞
清洁测量池后面所有的管,废液瓶内的柱塞,上半池内的管和管口
室温变化大(阳光直射,通风等)
变换设备放置的位置
测量池与废液瓶间的管中有气泡
清洗出气泡
废液瓶清空,不存在零点
将5cms的水注入废液瓶
废液瓶中的柱塞未将管口保持在底部
检查柱塞的位置
测量池的入口处堵塞
打开测量池,然后清洁
5.红色信号灯”Overload”闪烁(在注入样品或溶剂自动清洗测量池时)
在测量池和废液瓶间的系统局部堵塞
6.当注入样品时,在测量池和蠕动泵间管的连接处液体泄漏
7.渗透压仪连续间隔的清洗,没有进入“待机”位置,设备不能发现的基线值的原因:
压强传感器故障(压力膜损坏)
更换压强传感器(将设备运到代理商处或厂家修理)
测量池干燥了一段时间,内部有盐晶体形成
打开测量池,用蒸馏水清洗
8.隔膜泄漏,在螺丝下面有盐结壳形成
硅酮膜太旧,溶剂可以浸透
更换硅酮膜
OSMOMAT050标准配件
1根电源线
1份使用说明手册
1包截留量20,000道尔顿的膜
1包小的零部件,包括:
-2个蠕动泵管
-2个管接头
-1根连接管(1.12m)
-10个硅酮膜
-1个O形环(26×
2mm)
-2个备用保险丝(220V–0.25Alag/110V–0.5Alag)
1包2个柱塞
2个塑料瓶(分别
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