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6、组织培养的研究类型
(1)组织培养
(2)器官培养(3)胚胎培养(4)细胞培养(5)原生质体培养
7、植物组织培养的应用
⏹植物离体繁殖
⏹无病毒苗木培育
⏹培育新品种或创制新物种
⏹次生代谢物生产
⏹植物种质资源的离体保存
⏹人工种子
8、培养基的构成
(1)水分
(2)无机盐类
●铁盐
(3)有机营养(糖、维生素、氨基酸)
(4)植物生长调节剂
●生长素:
IAAIBANAA2,4-D
●细胞分裂素:
KTZT6-BATDZ2-ip
(5)天然有机添加物
(6)pH(5.0-6.0)
(7)凝固剂(琼脂)
9、培养基的基本类型
(1)含盐量较高的培养基:
其代表是MS培养基。
无机盐浓度高,特别是硝酸盐、钾离子和铵离子含量丰富;
元素平衡较好,缓冲性能好;
微量元素和有机成分含量齐全且较丰富。
(2)硝酸钾含量较高培养基:
培养基的盐浓度高,铵态氮含量较低,但盐酸硫胺素和硝酸钾含量较高。
(3)中等无机盐含量的培养基:
大量元素含量约为MS培养基的一半,微量元素种类少但含量较高,维生素种类较多。
(4)低无机盐含量的培养基:
无机盐含量非常低,为MS培养基的1/4左右,有机成分也很低。
10、外植体的选择原则
▪再生能力强
▪遗传稳定性好
▪外植体来源丰富
▪外植体灭菌容易
11、常用的灭菌药剂
酒精次氯酸钠氯化汞
12、植物细胞全能性
每一个植物细胞都带有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整再生植株。
13、细胞分化
是指导致细胞形成不同结构,引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。
14、脱分化
也称去分化,是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分手状态,形成无组织结构的细胞团或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
15、再分化
离体培养的周五细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化,形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官,甚至形成完整植株,这个过程称为再分化。
16、愈伤组织形成
(1)诱导期
(2)分裂期(3)分化期
17、愈伤组织生长过程发生的生理生化变化
(1)RNA先增加后减少
(2)同工酶谱发生变化
(3)连续继代培养可能改变次生物质的积累水平或能力
(4)可能出现驯化现象
18、胚状体
在离体培养条件下,植物离体培养的细胞、组织、器官也可以产生类似胚的结构,其形成也经历一个类似胚胎的发生和发育过程,这种类似胚的结构称为胚状体。
19、体细胞胚胎发生过程
原胚球形胚心形胚鱼雷形胚成熟胚
20、植物器官和组织培养的基本程序
(1)无菌外植体的获得
①茎尖、茎段、叶片的灭菌
②根、块茎、鳞茎的灭菌
③花蕾的灭菌
④果实、种子的灭菌
(2)初代培养物的建立无菌环境
①规范操作
②条件合适
(3)形态发生和植株再生
(4)培养产物的观察记载
①愈伤组织
②胚状体
③芽
④根
21、胚培养的应用:
①克服远缘杂交不亲和性②打破种子休眠,缩短育种周期③提高种子萌发率
22、胚珠培养的意义
①使杂种尽早培养,防止杂胚早期败育,获得杂种植株
②通过受精前胚珠培养以及未受精的胎座或子房培养,可以作为试管受精的基础
③未受精的胚珠培养能和花药培养一样,诱导出大孢子或卵细胞增殖,形成单倍体,用于单倍体育种
23、花粉培养方式
●平板培养
●看护培养
●液体培养
●双层培养
●微室培养
●条件培养基培养
24、影响雄核发育的影响因素
(1)基因型
(2)植株生长条件和生理状态
(3)花粉发育时期①花粉粒发育时期的观察②花粉发育时期的确定
(4)预处理①高低温处理②化学物质处理a高糖b甘露醇c秋水仙素d乙烯利
③其他aγ射线b离心c磁场
(5)培养基
①基本培养基②碳源③氨基酸和其他有机物质④植物激素⑤活性炭⑥pH
(6)培养条件①温度②光照③植板密度
(7)花药壁因素
25、人工种子的优点
(1)使自然条件下不易结实或种子昂贵的材料能够快速繁殖和保存
(2)繁殖速度快
(3)固定杂种优势,可使F1杂种优势多代利用
(4)为基因工程技术应用于生产提供桥梁
(5)在人工种子的制作中,加入各种营养成分或生长调节剂,调节植物生长,提高植物抗性
(6)在一定程度上可取代天然种子而节约粮食,贮运方便,可播种育苗
26、原生质体融合
是指通过物理或化学方法使原生质体融合,经培养获得具有双亲全部(或部分)遗传物质的后代的方法,亦称体细胞杂交。
27、细胞质工程
又称细胞拆合工程,是通过物理或化学方法将细胞质与细胞核分开,再进行不同细胞间核、质的重新组合,重建成新细胞。
28、影响原生质体培养的因素
(1)原生质体活力
(2)原生质体起始密度
(3)渗透压稳定剂
(4)培养基成分
①基本培养基
②碳源
③无机盐浓度和氮的形态
④植物生长调节剂的浓度配比
(5)培养条件
(6)植物材料和基因型
29、原生质体融合类型
●对称融合
●不对称融合
●微原生质体融合
30、植物离体繁殖
又称植物快繁或微繁,是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。
31、褐化
是指培养材料向培养基中释放褐色物质,致使培养基和培养材料逐渐变褐而死亡的现象。
32、污染:
是指在组培过程中,由于真菌、细菌等微生物污染,在培养容器中滋生大量菌斑,使培养材料不能正常生长和发育的现象。
33、玻璃化:
是试管苗的一种生理失调症状,表现为试管苗叶片、嫩梢呈水浸透明或半透明状。
1、植物脱病毒的机理
(1)植物病毒自身不具有主动转移到能力,无论在病田植株间还是在病组织内,病毒的移动都是被动的
(2)在旺盛分裂的细胞中,代谢活性很高,使病毒无法复制
(3)在植物体内可能存在着病毒钝化系统,在分生组织中比其他任何区域具有更高的活性
(4)茎尖中存在高水平内源激素,可抑制病毒增殖
34、种质资源离体保存
是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体等材料,采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存,在需要时可重新恢复其生长,并再生植株的方法。
35悬浮培养(suspensionculture)
在愈伤组织液体培养的基础上发展起来。
是指将单个游离细胞或小细胞团在液体
培养基中进行培养增殖的技术。
36、悬浮培养的特点:
(1)细胞可以不断增殖,形成高密度的细胞群体,并且适于大规模培养;
(2)可大量提供较均匀的细胞,为深入细致地研究细胞的生长、分化创造了一个很
好的实验方法和条件。
37、固相化细胞培养的优缺特点
1、优点:
Ø
消除或极大地减弱流质流动引起的切变力。
细胞生长缓慢,次生代谢增强。
改善了细胞生长的理化环境,有利于次生代谢。
培养的环境条件容易控制,细胞稳定性高。
便于次生代谢物的收集。
2、缺点:
(1)固相化细胞培养要求代谢产物必须是分泌到细胞外。
但次生代谢产物多是存在于细胞内的,为促进次生代谢产物的合成和分泌,需要借助表面活性剂或对细胞进行透性改造。
(2)植物细胞次生代谢产物的积累是不连续的,这也限制了固相化细胞方法的应用。
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