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整理生物制品保存和使用
第13章生物制品的保存、运输与使用
第1节生物制品的保存与运输
1.1保存
生物制品厂应设置相应的冷库,防疫部门也应根据条件设置冷库、低温冷柜或冰箱冷藏箱。
生物制品一般不耐高温,特别是活苗,必须低温冷藏。
生物制品厂生产的疫苗均置冷库内保存。
冷冻真空干燥制品,要求在-15℃以下保存,温度越低,保存时间越长。
如猪瘟兔化弱毒冻干苗,在-15℃可保存1年以上,在0~8℃只能保存6个月,若存放在25℃的环境中,10d即可失去效力。
实践证明,一些冻干苗在27℃条件下保存1周后有20%不合格,保存2周后有60%不合格。
冻干苗的保存温度与冻干保护剂的性质有密切关系,一些国家的冻干苗可以在4~6℃保存,是因为用的是耐热保护剂。
多数活湿苗,只能现制现用,在0~8℃条件下仅可短时期保存。
灭活苗、血清、诊断液等保存在2~8℃较为适宜,不能过热,也不能低于0℃。
冻结苗应在-70℃以下的低温条件下保存。
工作中必须坚持按规定温度条件保存,不能任意放置,防止高温存放或温度忽高忽低,以免损害疫苗质量。
总之,不论何种疫苗,均应尽量保持疫苗抗原的一级结构、二级结构和立体结构,保护其抗原决定簇,才能保持疫苗良好的免疫原性。
1.2运输
在运输过程中,不论使用何种运输工具运送生物制品都应注意防止高温、暴晒和冻融。
如果是活苗需要低温保存的,可先将活疫苗装入盛有冰块的保温瓶或保温箱内运送。
在运送过程中,要避免高温和阳光直接照射。
北方寒冷地区要避免液体制品冻结,尤其要避免由于温度高低不定而引起的反复冻结和融化。
切忌把药品放在衣袋内,以免由于体温较高而降低药品的效力。
大批量运输的生物制品应放在冷藏箱内,有冷藏车者用冷藏车运输更好,要以最快速度运送生物制品。
第2节疫苗常用免疫接种方法
2.1免疫接种的类型
疫苗是用于免疫预防的生物制品。
疫苗的预防接种可以分为以下几种情况:
①有组织的定期预防接种;②环状预防接种(包围预防接种);⑧屏障(国境)预防接种;④紧急接种。
有组织的预防接种是将疫苗强制的或有计划的反复投给,是以易感动物全群为目标,此种接种多为全国性的,如我国的猪瘟疫苗和鸡新城疫疫苗接种、法国及德国的口蹄疫疫苗接种、日本的猪瘟疫苗接种均属此类。
环状预防接种是以疾病发生地点为中心,划定一个范围,对范围内所有易感动物全部免疫。
屏障预防接种是以防止病原体从污染地区向非污染地区侵入为目的而进行的,对接触污染地区边界的非污染地区的易感动物进行免疫。
土耳其在其国境的东部及南部沿着国境进行口蹄疫预防接种,以形成屏障,控制疾病,避免扩散。
紧急接种是在发生传染病时,为了迅速控制和扑灭疫病的流行,对疫区和受威胁区尚未发病的动物进行的应急性接种,与环状接种近似,只要受到威胁的地区均应接种,接种地区不一定呈环状。
2.2活疫苗免疫接种
1.滴鼻、滴眼、滴口免疫法
滴鼻、点眼法适用于弱毒苗的免疫方法。
使用时将疫苗稀释10~20倍后,用消毒过的玻璃滴管吸取稀释液,滴入小鸡鼻孔或眼内,每只鸡滴1~2滴。
此种免疫方法在接种后5~7d左右产生免疫力。
采用滴入法免疫应注意事项:
①用凉白开水或蒸馏水为疫苗的稀释液,不能随意加入抗生素。
②滴入时,把鸡的头颈提起,呈水平位置,用手堵住一侧鼻孔,然后将稀释疫苗液滴到眼和鼻内,稍停片刻,使疫苗液完全吸入鼻和眼内即可。
③注意不要让疫苗液外溢,否则,应补滴。
④疫苗稀释液配好后应在几小时内用完,暂时不用的稀释液要保存在低温室或冰箱中,但当天必须用完,不能放到第2天用。
⑤为减少应激,最好在晚上接种或光线稍暗的环境下接种。
滴口法将按照要求稀释之后的疫苗滴于家禽口中,使疫苗通过消化道进入家禽体内,从而产生免疫力的免疫接种方法。
具体操作方法:
按1000羽份疫苗用53~55mL生理盐水或凉开水稀释,充分摇匀后用滴管吸取疫苗,然后将鸡腹部朝上,食指托住头颈后部,大拇指轻按前面头颈处,待张口后在口腔上方1cm处滴下1~2滴疫苗溶液即可。
滴口免疫时需注意:
①确定稀释量,普通滴瓶每毫升水有25~30滴,差异较大,所以必须事先测量出每毫升水的滴数,然后计算出稀释液用量,最好购买正规厂家生产的疫苗专用稀释液及配套滴瓶;②稀释液可选用疫苗专用稀释液或灭菌生理盐水;③疫苗稀释后必须在0.5~1h内滴完;④防止漏滴,做到只只免疫;⑤要注意经常摇动疫苗,以保持疫苗的均匀。
⑥在滴口免疫前后24h内停饮任何有消毒剂的水。
2.饮水免疫法
此方法是根据鸡只的数量,将疫苗混合到一定量的蒸馏水或凉白开水中,在短时间内饮用完的一种免疫方法。
水的用量根据不同日龄鸡的饮水量计算,如15日龄鸡饮水量为7~9mL/只,30~40日龄鸡为19~25mL/只,60~90日龄为38~42mL/只,120日龄为50mL/只。
饮水免疫时应注意事项:
①用作饮水免疫的稀释用水,必须符合卫生要求,不得含有氯、铜等离子,最好使用凉开水;②饮水免疫时可在水中加入适量脱脂奶粉,延长疫苗的存活时间和效价,提高免疫效果;③不能用金属器具盛水。
饮水器具必须预先洗刷干净,防止清洁剂残留,影响药效;④夏天饮水免疫最好在早晨进行,疫苗使用时不受高温影响,其他季节多在中午饮水,水量必须充足,雏鸡饮水器中的水必须保持在一定的深度,保证饮水免疫前后2d内不断水,保证有1/3的鸡同时能饮到水;⑤饮水免疫前后2d内,在饮水或饲料中不添加含有抗菌、抗病毒的药物成份;⑥疫苗必须现配现用,并在短时间内用完,但要保证每只鸡都能饮到足够量的疫苗。
3.气雾免疫法
这种方法是将疫苗稀释后用压缩空气通过气雾发生器,使稀释的疫苗液形成直径为1~10μm的雾化粒子,均匀地悬浮于空气中,随呼吸而进入鸡体内,从而达到免疫效果。
气雾免疫包括气溶胶和喷雾两种形式,但最主要的是气溶胶免疫。
气溶胶根据粒子大小及运动性质可以分为三种:
①高分散度气溶胶,又称蒸发性气溶胶,雾粒在0.01μm以下,粒子随空气布朗运动而上升;②中分散度气溶胶,又称浮游性气溶胶,粒子大小为0.01~10μm,粒子的布朗运动和重力下降作用相平衡,在大气中较稳定漂浮;③低分散度气溶胶,粒子在10~100μm,粒子大,易下沉。
气雾发生器喷出的疫苗雾粒多为高分散度和中分散度气溶胶,90%以上小于5μm,吸入后产生免疫应答。
气雾免疫的效果与粒子大小直接有关。
据认为4~5μm以下的气雾粒子容易通过上呼吸道屏障进入肺泡,有利于吞噬细胞的吞噬,产生良好的免疫力。
气雾免疫的优点是省力、省工、省苗,缺点是容易激发潜在的慢性呼吸道病,这种激发作用与粒子大小成反相关,粒子越小,激发的危险性越大。
所以,在存有慢性呼吸道病潜在危险的鸡群,不应采用气雾免疫法,也可用粗分散度气溶胶(雾粒60μm左右)法以减少激发病的发生。
气雾接种应注意以下5个问题:
①所用疫苗必须是高价的、倍量的;②稀释疫苗应该用去离子水或蒸馏水,最好加0.1%的脱脂奶粉或明胶;③雾滴大小要适中,一般要求喷出的雾粒在70%以上,成鸡雾粒的直径应在5~10μm,雏鸡30~50μm;④喷雾时房舍要密闭,要遮蔽直射阳光,保持一定的温度、湿度,最好在夜间鸡群密集时进行,待10~15min后打开门窗;⑤气雾免疫接种时对鸡群的干扰较大,尤其会加重鸡病毒、霉形体及大肠杆菌引起的气囊炎,应予以注意,必要时于气雾免疫接种前后在饲料中加入抗菌药物;⑥手持喷头口向鸡群均匀喷雾,喷头距鸡群1~1.2m,使鸡舍形成良好的局部雾化区。
4.翼膜刺种
用消毒过的刺种针或钢笔尖蘸取疫苗在家禽翅膀内侧无血管处的“三角区”刺种,通过在穿刺部位的皮肤处增殖产生免疫。
具体操作方法为拉开一侧翅膀,抹开翼翅上的绒毛,刺种者将蘸有疫苗的刺种针从翅膀内侧对准翼膜用力快速穿透,使针上的凹槽露出翼膜。
每次刺种针蘸苗都要保证两凹槽能浸在疫苗液面以下,出瓶时将针在瓶口擦一下,将多余疫苗擦去。
在针刺过程中,要避免针槽碰上羽毛以防疫苗溶液被擦去,也应避免刺伤骨头和血管。
每1至2瓶疫苗就应换用一个新的刺种针,因为针头在多次使用后会逐渐变钝。
针头变钝意味着需要加力才能完成刺种,这可能使一些疫苗在针头穿入表皮之前被抖掉。
在接种后4~7d,在刺种部位形成小肿块表明免疫成功。
若无反应出现,说明免疫失败,必须再行接种。
2.3灭活疫苗免疫接种
1.颈部皮下注射
将疫苗注射于动物颈部皮下的方法。
多选在皮肤较薄,富有皮下组织的部位,大动物多在颈部两侧,猪在耳根或股内侧,羊在颈侧、肘后或股内侧,禽类在翼下,犬可在颈侧及股内侧。
这种方法适用于注射灭活疫苗,凡需注射而不适于肌肉注射的疫苗可采用这种方法接种。
操作方法:
用手轻轻地提起动物的颈部皮肤,用9号针头从颈部中段以下朝身体方向刺入,使疫苗注入皮肤与肌肉之间。
2.胸部肌肉注射
胸部肌肉注射时,在家禽龙骨突处左右两侧约2cm自后向前进针,与身体轴线呈30°夹角,针尖刺入0.5~1cm即可。
不可与身体轴线垂直进针,也不能刺入过深,以免把药物注入胸腔或腹腔,甚至损伤脏器。
3.腿部肌肉注射
此部位由于注射油苗后吸收不良,几个月后仍然有未吸收的部分油苗,摸时有疙瘩,已不主张在此部位注射油苗防疫,仅可采用冻干苗在此部位注射免疫,原因是冻干苗易被鸡体吸收,如果非要在腿部肌肉注射油苗时,建议正确的注射部位在大腿的外侧上方肌肉最丰满处注射,不要在腿部肌肉不发达的下部注射,以免埙伤神经与血管或吸收不良造成的腿部长期肿胀问题。
4.尾部注射
尾部的腹面。
该部位正确的接种是注射于避开尾部中线的位置,避免损伤血管。
用9号针头,朝头部方向,沿着尾骨的一侧刺入尾部。
为了防止疫苗渗漏,不能过早拨出针头。
该部位的经济价值很低,因此即使发生严重的组织反应,对鸡的影响也很小。
2.4使用生物制品的注意事项
⑴免疫接种前应结合当地的实际情况制订出适合本地、本场疫病防疫的免疫程序,接种时应做好记录,记录项目包括接种对象、时间、抗体水平、使用疫苗名称、剂量、途径、生产厂家、生产批号、失效期等,以便查询。
⑵接种前要对疫苗质量进行检查,严格把关并做详细记录,若遇以下情形之一者,应弃之不用。
①没有标签,无头份和有效期或不清者。
②疫苗瓶破裂或瓶塞松动者。
③生物制品质量与说明书不符,如色泽、沉淀发生变化,瓶内有异物或已发霉者。
④超过有效期者。
⑤未按产品说明和规定进行保存的疫苗。
⑶疫苗的运输和保存均在冷冻低温下进行,在运输过程中忌阳光照射,应尽量缩短运输时间,并要求有冷藏设备,即使是短途,也必须将疫苗存放在有冰的广口保温瓶中。
⑷疫苗稀释,应注意按说明所规定或相应稀释液进行稀释,注意水的质量要求,稀释时应反复冲洗以防疫苗损失,并注意小心操作,避免疫苗菌液漏失。
⑸器械消毒。
疫苗接种用注射器、针头、镊子、滴管、稀释用的瓶子要事先清洗,并用沸水煮15~30min。
消毒切不可用消毒药消毒。
一个注射器和针头注射一定数量动物后,一定要换用新的,有疫情发生时,接种不同动物要更换针头。
⑹畜群的健康状况。
预先对畜群进行健康状况检查,对病或不健康畜群不宜接种,在恶劣气候条件下也不应该接种疫苗。
⑺接种后的免疫效果检查。
接种后定期对动物进行检查,如接种鸡新城疫疫苗后,应在10天、20天进行免疫后的抗体效价监测;如禽痘检查除血清学监测方法之外,可在刺种后3~4天,抽查10%左右的禽只做样本检查刺种部位,如果样本中有80%的禽只在刺种部位出现红肿痂块,说明刺种成功,否则应查原因,重新刺种。
⑻免疫接种前后,加强饲养管理。
接种前后,通过加强饲养管理,添加抗应激添加剂、减少应激因素、改善营养条件等措施配合增强其免疫效果。
同时,还必须加强卫生保健管理,如消毒、清洁、隔离等措施。
第3节免疫失败的主要原因
正确使用疫苗是保证免疫效果的关键。
在实际生产过程中,经常有畜禽免疫接种后,仍有特定的疫病发生和流行。
究其原因主要是畜禽没有获得足够的免疫力,抗体没有达到应有的保护水平,以致机体抗御病原体的侵袭能力大大降低。
造成免疫失败的因素主要表现在以下几个方面。
3.1疫苗质量
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