果蝇伴性遗传实验报告Word文件下载.docx
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1隐性;
性别的分离呈1雌:
1雄。
其中隐性个体的性别与祖代隐性体一样,即1/2的外孙与其外祖父具有相同的表型特征。
2.当同配性别的性染色体传递纯合体隐性基因时,F1表现为交叉遗传,即母亲的性状传递给儿子,父亲的性状传递给女儿,F2中,性状与性别的比例均表现为1:
1。
3.存在于Y染色体差别区段上的基因
在进行伴性遗传实验时,也会出现例外个体,即在B杂交组合,
F1代中出现不应该出现的雌性白眼,这是由于两条x染色体不分离造成的,不过这种情况极为罕见,约几千个个体中才有一个。
三、仪器、设备、试剂及材料
1、器材
恒温培养箱,双筒解剖镜,架盘天平,高压灭菌锅,培养瓶,麻醉瓶,白瓷板,毛笔,镊子,棉花塞。
2、试剂
乙醚,丙酸,酵母粉,玉米面,琼脂条,葡萄糖,蒸馏水。
3、材料
黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)品系,野生型红眼(+)和突变型白眼(whiteeye,w).决定黑腹果蝇红眼和白眼的基因位于X染色体上,是一对等位基因.
四、步骤
1、配制培养基
果蝇培养基配方:
A:
糖6.2克,加琼脂0.62克,再加水38mm煮沸溶解;
B:
玉米粉8.25克,加水38mm,加热搅拌均匀,再加0.7克酵母粉;
A和B混合加热成糊状后,加0.5mm丙酸,即可分装到培养瓶中。
倒入培养基的厚度约2厘米,在培养基中插入一张消过毒的干燥硬纸片,以扩大果蝇的活动场所。
将培养瓶置入高温高压灭菌锅内,以121℃,1.5大气压消毒30分钟。
消毒完成后,待灭菌锅内压力降至常压后开启锅盖使其半开,再以灭
菌锅干燥培养瓶之棉塞30分钟,完成后取出使其冷却备用。
待培养基冷却后,用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。
因为瓶里有了积水,移入的果蝇容易淹死或粘住。
2、收集处女蝇
雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力。
选择处女蝇时,先把培养瓶中的老果蝇全部除去,收集10小时之内羽化出来的新果蝇,麻醉后用放大镜在百瓷板上将果蝇雌雄分开,这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。
如果要验证选取的处女蝇是否准确,先不要放入雄蝇,3天后看雌蝇是否产卵,如果产卵就不是处女蝇了。
3、接种
按照无菌操作技术,一手持培养瓶,一手持广口瓶,轻轻地旋转广口瓶棉塞,使果蝇掉离棉塞,迅速取下两瓶的棉塞,瓶口相对,培养瓶在上,果蝇触角根部的感觉神经能和人类的耳朵一样感知声音和重力,受惊吓后会向上逃走,轻轻敲击广口瓶,果蝇会陆续飞入培养瓶,塞好瓶口,进行伴性遗传杂交时,应该同时配置正交和反交试验组合.因为决定性状的基因在性染色体上,正,反交的结果会出现性状和性别的差异.在果蝇培养前,要在杂交培养瓶上贴上标签,标明实验题目,杂交组合,杂交日期,实验者姓名.最后,把培养瓶放在20~25℃恒温培养箱内饲养果蝇.
标签如下:
4、去亲本:
果蝇饲养几天以后,肉眼可见培养瓶中出现了幼虫和蛹,这时可以将亲本移出,以防亲本与F1果蝇混杂,影响实验结果。
5、F1代性状观察和统计:
再经过几天饲养之后,培养瓶中会陆续羽化出F1代果蝇,仔细观察F1代果蝇性状,统计正,反交F1代表型性状的观察结果,并将结果填入表
6、F1代自交:
把正交试验得到的F1代果蝇转入一个新培养瓶中进行相互交配,把反交试验得到的F1代果蝇也转入一个新培养瓶中进行互交(不需挑选处女蝇),以期获得F2代.
7、去亲本:
经过7~8天的培养,当培养瓶里出现了F2代幼虫和蛹时,把培养瓶里的成蝇转移出去,防止与F2代果蝇混杂.
8、F2代性状观察和统计:
再经过几天饲养之后,F2代果蝇会陆续羽化来,仔细观察F2代果蝇的性状,统计正,反交F2代表型性状的观察结果,并将结果填入表格。
篇二:
果蝇杂交实验报告
果蝇杂交实验报告
实验日期:
XX年9月28日
-XX年10月20日小组编号:
周五5组
小组成员:
白坦蹊陈朱媛呼波王启明
【摘要】
实验利用果蝇,这一常用的遗传学模式生物,进行杂交实验,验证了基因的分离定律、自由组合定律、伴性遗传、基因连锁交换等遗传学规律。
报告对实验数据进行了卡方检验,对三隐性状中的基因遗传距离进行了计算,证明实验数据基本符合假设的。
【实验原理】
一、遗传定律
1.基因分离定律
一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性,在配子形成时,按原样分离到不同的配子中去,理论上配子分离比是1∶1,F2代基因型分离比是1∶2∶1,若显性完全,F2代表型分离比是3∶1。
控制体色性状的突变基因位于2号常染色体,正常体色对黑体完全显性,用正常体色果蝇与黑体果蝇交配,得到F1代都是正常体色,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离,出现两种表现型。
2.基因自由组合定律
不同相对性状的等位基因在配子形成过程中,等位基因间的分离和组合是互不干扰,各自独立分配到配子中去,它们所决定的两对相对性状在F2代是自由组合的,在杂种第二代表型分离比就呈9∶3∶3∶1。
控制体色性状的突变基因位于2号常染色体,正常体色对黑体完全显性,控制眼色性状的突变基因位于性染色体。
红眼对白眼完全显性,用黑体红眼果蝇(♀)与正常体色
白眼果蝇(♂)交配,得到F1代都是正常体色,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离,出现四种表现型。
3.伴性遗传
位于性染色体上的基因,其传递方式与位于常染色体上的基因不同,它的传递方式与雌雄性别有关,因此称为伴性遗传。
果蝇的性染色体有X和Y两种,雌蝇为XX,雄蝇为XY。
红眼与白眼是一对相对性状,控制该对性状的基因(W)位于X染色体上,且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。
当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时,F1代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼,F2代雌性果蝇都是红眼,雄性果蝇红眼和白眼的比例为1∶1;
当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时,F1代雌性果蝇为红眼,而雄性果蝇为白眼,此现象又称为绞花式遗传,F2代雌性果蝇的红眼与白眼比例为1∶1,雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1∶1。
4.连锁与交换定律
连锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起而遗传的现象;
互换是指同源染色体的非姊妹染色单体之间的对应片段的交换,从而引起相应基因间的交换与重组。
同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体基因之间可以发生一定频度的交换,因此在子代中将发现一定频度的重组型,但一般比亲组型少得多。
5.基因定位
基因定位就是确定基因在染色体上的位置,确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序,而它们之间的距离是用交换值来表示的。
只要准确地估算出交换值,并确定基因在染色体上的相对位置就可以把它们标志在染色体上,绘制成图。
6.三点测交
三点测交是基因定位最常用的方法,它是通过一次杂交和一次用隐性亲本测交,同时确定三对基因在染色体上的位置。
二、果蝇的生活史与雌雄辨认
1.
果蝇的生活史
果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段(图1)。
卵:
卵白色,长椭圆形,长约0.5mm,在背面的前端伸出一对触丝,它能使卵附着在柔软的食物上,不至于深陷到食物中去。
幼虫:
幼虫从卵中孵化出来后,经过两次蜕皮到第三龄期,体长可达4~5mm。
在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部,并且有一黑点即口器;
稍后有一对半透明的唾腺,每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸,然后会合成一条导管通向消化道。
神经节位于消化道前端的上方。
蛹:
幼虫生活七天左右即化蛹,化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上,渐次形成一个棱形的蛹。
起初颜色淡黄、柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,这就显示即将羽化了。
成虫:
刚羽化出的果蝇,身体狭长,翅还没有展开,身体较白嫩,此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的,没有多大区别。
不久,蝇体变为粗短椭圆形,双翅展开,体色加深,如野生型果蝇的体色成为灰褐色。
图1果蝇的生活史
2.果蝇雌雄的辨认
1)体型雌果蝇体型较大,雄果蝇较小;
2)腹部末端雌性腹部椭圆,末端稍尖,雄性末端钝圆;
3)腹部背面雌性有明显5条黑色条纹,雄性有三条,前两条细,后一条宽,延至腹
面,肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。
4)腹部腹面雌性有较明显的6个腹片,雄性有4个腹片。
5)性梳雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳(图3-3),雌性则无。
6)性梳的有无,是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一【实验材料与方法】一、实验材料1.2.3.
用具:
显微镜,麻醉瓶,培养瓶,滤纸,毛笔,标签,恒温培养箱
材料:
檀黑体突变型果蝇原种(e)、三隐(白眼、小翅、卷刚毛)突变型果蝇原种(m)药品:
乙醚,乙醇,培养基
二、实验步骤
1.设计杂交组合
亲本:
正交(m雌×
e雄),反交(e雌×
m雄)正交产生的F1代继续杂交,产生F2代。
2.第二步:
(9.28-9.30)收集处女蝇收集方法:
1)放飞成蝇(生长好、接近羽化蛹多者)
2)清除成蝇后的10小时内收集处女蝇
3.杂交接种(次日就要检查,如有死亡及时补救)。
杂交瓶上注明:
杂交组合、实验日期、
实验者姓名。
4.部分蛹变黑,F1即将孵出前,移出亲本蝇。
亲本蝇冻存(为防止失败,可留存活蝇适当时
间),配制新培养基,用于F1同胞交配。
5.F1代果蝇的观察和交配。
F1代果蝇孵出7-9d观察统计F1,并选10-20对再杂交于6.一个或多个新瓶。
7.F1杂交一周后,移出F1代果蝇。
亲本蝇冻存。
8.第一只F2代果蝇出现后10天内,观察、统计F2代的结果,进行分析
【实验结果及分析】一、杂交结果
杂交获得的果蝇形状数据见表1、表2。
1.伴性遗传与自由组合定律的检验1)图谱分析
正交反交
P:
EEXwXw(正常体色、白眼、雌)×
eeXWY(黑檀体、红眼、雄)eeXWXW(黑檀体、红眼、雌)×
XWY
(正常体色、白眼、雄)
F1:
EeXWXw(正常体色、红眼、雌)EeXwYEeXWXw(正常体色、红眼、雌)EeXWY(正常体色、红眼、雌)
理论:
1:
11:
1实际:
23:
2715:
14
F2:
实际:
2)适合度测验
单从上面的分析中我们很难得出结论,所以我们再利用适合度测验来进一步分析。
首先分析眼色的伴性遗传:
通过适合度测验,可以发现,针对正反交F1代,正交F2代所做的3次适合度测验所得P值均大于0.05,且F1代的P值很高,说明我们得到的实验的数据与理论比率之间差异不显著,假设成立,实验数据可以反应出眼色的伴性遗传规律。
接着对控制眼色的基因与控制体色的基因间的自由组合定律做适合度检验:
通过适合度检验,可以发现P值大于0.05,说明实验值与理论值差异不显著,假设成立,即试验中控制眼色和体色的基因服从自由组合定律。
2.基因的连锁与交换
篇三:
摘要经典遗传学的三大遗传定律分别是:
分离定律,自由组合定律和连锁与交换规律。
果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点,是研究遗传学的好材料,尤其在基因分离、连锁、交换等方面,对果蝇的研究更是广泛而充分。
本次通过实施已有实验方案,观察后代中果蝇的各种性状,结合各种统计处理方法,从而证明这三大定律。
1.原理
分离定律一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性,在配子形成时,按原样分离到不同的配子中去,理论上配子分离比是1∶1,F2代基因型分离比是1∶2∶1,若显性完全,F2代表型分离比是3∶1。
控制体色性状的突变基因位于2号常染色体,灰体对黑体完全显性,用灰体果蝇与黑体果蝇交配,得到F1代都是灰体,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离,出现两种表现型。
(图1)
图1图2
自由组合定律不同相对性状的等位基因在配子形成过程中,等位基因间的分离和组合是互不干扰,各自独立分配到配子中去,它们所决定的两对相对性状在F2代是自由组合的,在杂种第二代表型分离比就呈9∶3∶3∶1。
控制体色性状的突变基因位于2号常染色体,灰体对黑体完全显性,控制眼色性状的突变基因位于性染色体。
红眼对白眼完全显性,用黑体红眼果蝇(♀)与灰体白眼果蝇(♂)交配,得到F1代都是灰体,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离,出现四种表现型。
(图2)
伴性遗传位于性染色体上的基因,其传递方式与位于常染色体上的基因不同,它的传递方式与雌雄性别有关,因此称为伴性遗传。
(图3)
图3图4
连锁与交换定律连锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起而遗传的现象;
野生型果蝇翅形为长翅,复眼为红眼。
突变型果蝇翅形为残翅,翅顶端与身体末端约等长,控制该性状的突变基因位于X性染色体上,长翅对残翅完全显性;
眼色为白眼,复眼呈白色,控制该性状的突变基因位于X性染色体上,红眼对白眼完全显性。
长翅红眼果蝇(♀)与残翅白眼果蝇(♂)交配时,得到F1代都是长翅红眼,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离;
当残翅白眼果蝇(♀)与长翅红眼果蝇(♂)交配时,得到F1代雌性果蝇都是长翅红眼,雄性果蝇都是残翅白眼,F1代雌雄个体之间相互交配,F2代产生性状分离。
通过后代中各种表型比例的分析,就可计算出重组率。
(图4)
基因定位基因定位就是确定基因在染色体上的位置,确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序,而它们之间的距离是用交换值来表示的。
2.实验材料
2.1实验材料
2.1.1用具
显微镜,麻醉瓶,培养瓶,滤纸,毛笔,标签,恒温培养箱2.1.2材料
黑腹果蝇的几个品系:
野生型18#(Wildtype,+)、残翅22#(Vestigial,Vg)、
白眼2#(White,w)、黑檀体e(ebony,e)
野生型果蝇的双翅是长翅(翅长过尾部),红眼(复眼红色),灰体(身体灰褐色)。
所有野生性状对隐性性状显性完全。
2.1.3药品
乙醚,乙醇,丙酸,培养基2.2实验方法
乙醚麻醉→观察→果蝇交配→选用处女蝇→分出雌雄蝇→单独饲养→杂交→贴好标签→培养→7~8天后倒掉亲本→F1成蝇羽化→开始计算→观察性状。
可靠的计数及观察是培养开始的20天以内(再晚F2也可能有了)。
若须继续实验,观察F2,可在F1内挑出雌雄数对,另外培养,因为这次是用F1作亲本,进行个体间互交,所以这时不是处女蝇也可以。
但如要把F1雌蝇与另一品系雄蝇杂交时,还要严格地选取处女蝇,方法同上。
在作新的留种培养时,应事先检查一下果蝇有没有混杂,以防原种丢失。
亲本的数目一般每瓶5~10对,移入新瓶时,须将培养瓶横卧,然后用毛笔将麻醉的果蝇从白瓷板上轻轻扫入,待果蝇醒过来后再把培养瓶竖起,以防果蝇粘在饲料上。
原种每2~4周换一次培养基。
每一原种培养至少保留两套,培养瓶的标签上要写明突变名称,培养日期等。
作原种培养温度可控制在10~15℃,培养时避免日光直射。
果蝇在适宜条件下会产子代,在肉眼能看到幼虫时就可把亲本倒掉,几天以后,新的成蝇便产生。
待成蝇有了足够保种的数量后,要调换培养瓶,作为下一代的亲本,继续培养。
原种果蝇培养遇到的麻烦是饲料发霉。
发霉的原因很多,如用具没有灭菌,空气污染,亲本不及时倒掉,都会引起饲料发霉。
严重的霉菌污染会影响果蝇的生长。
饲料中加丙酸可以抑制霉菌,但并不能完全制止。
发现培养瓶中有少量霉点时可用烧过的解剖针挑出。
若大量霉菌污染,可把果蝇全部倒在一个消毒过的空指管中,让它活动2~3小时,换一支指管,再活动1~2小时,而后倒入一支新的培养瓶中继续培养,这样可以防止霉菌污染。
原种保存遇到的另一个问题是混杂,几个不同品系的果蝇在一起培养,一定要防止混杂。
培养瓶的塞子要做得紧些,不使果蝇逃出。
调换培养瓶时,要防止果蝇飞散。
外逃的果蝇要打死。
发现了混杂的原种,要根据原种果蝇的全部特征,挑出数对雌雄蝇饲养,进行筛选直到完全没有分离为止。
一般混杂时,只要方便,可以重新引种,将混杂种弃去。
2.2.1实验设计第一周:
1.我们实验的目的是分别验证三种不同的遗传方式(自由组合,伴性遗传和基因的连锁交换),所以我们要选取合适的果蝇组合进行杂交。
具体组合方式如下表所示:
表一:
亲本果蝇组合类型
2.间、实验者的姓名等内容。
3.相同操作进行反交实验。
将培养瓶置于25℃下培养一周。
第二周:
4.将培养瓶中所有亲本果蝇清除,继续培养一周,并配置新的培养基,以备第三周用。
第三周:
5.观察并记录正反交组合中F1的性状。
6.从正反交组合中的F1中各挑选出两对果蝇,放入一个新的培养瓶,贴上标签,在25℃下继续培养。
第四周:
7.将培养瓶中所有亲本果蝇清除后,继续培养一周。
第五周
8.当F2代果蝇数目足够时,将成蝇全数麻醉至死,倾倒在滤纸上,用显微镜观察果蝇的不同性状,分别统计并记录数据。
3.结果
3.1数据记录
表二:
果蝇A与果蝇B的杂交结果1
表三:
果蝇A与果蝇B的杂交结果2
3.2结果分析
图谱分析
A灰身长翅(AABB)B黑体残翅(aabb)
AABB(灰身长翅)×
aabb(黑体残翅)
F1:
AaBb(灰身长翅)
自交
F2:
灰身长翅黑体长翅灰身残翅黑体残翅
理论比值:
9:
3:
3:
1实际正交数量:
4517145比值:
3.75:
0.75反交数量:
29161714比值:
5:
5.3:
4.7
由上面我们的分析可以看出,最后我们的出来的比例与理论的比例有一定的偏差,那么实得比数与理论比数是否适合呢?
我们需要进行适合度测验。
表四:
果蝇A与果蝇B杂交的单因子适合度测验
表五:
果蝇A与果蝇B杂交的双因子适合度测验
分析
对于以上的结果,我们首先进行了图谱分析。
在我们的分析中,体色和翅型是两对独立的基因,他们能够进行自由组合定律。
对于每对基因来说,自身遵守分离定律。
但是针对比例来看,相差比较大,所以我们进一步进行适合度测验。
以上我们进行了两侧适合度测验。
单因子适合度测验主要是来验证分离定律,双因子适合度测验主要是来验证自由组合定律。
针对以上的两次适合度测验,我们发现,正交的结果P值>
0.05,说明实验得到的数据与理论的数据相差不大,支持最初的假设。
但是对于反交来说,得到的P值 1)选取的实验方案本身存在问题,这两对基因并不是完全独立,由反交型的单因子适合度测验可以看出,体色和翅型的分离比都不符合3:
1,可能两个基因存在于某些有关于性别方面的连锁。
2)数目少。
因为我们整个实验果蝇总数都没有超过100只,所以对于这种适合度测验,数目越少误差越大,所以可能是反交过程中有混入其他果蝇或者由于没有数清楚等人为地因素使实验出现了严重的误差。
3.2.2伴性遗传图谱分析
A红眼(X)B白眼(X)
WWwwwW
P:
XX(雌红眼)×
XY(雄白眼)XX(雌白眼)×
XY(雄红眼)
XX(雌红眼)XY(雄红眼)XX(雌红眼)XY(雄白眼)理论:
38(20):
32(17)56(15):
44(10)
XXXXYXYXXXXYXY
雌红眼雄红眼雄白眼雌红眼雌白眼雄白眼雄红眼
理论2:
1:
11:
1实际45:
20:
2126:
17:
21:
19适合度测验
WW
Ww
W
w
ww
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