细胞生物学总复习Word文档下载推荐.docx
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分辨力resolution:
又称分辨本领,指将临近两点清晰区分辨认的能力,分辨物体最小间隔的能力。
原代培养primaryculture:
培养直接来自动物机体的细胞群。
细胞株cellstrain:
从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。
细胞系cellline:
从肿瘤细胞培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞,可无限繁殖。
克隆clone:
亦称无性系。
只有同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。
光学显微镜(正置、倒置、荧光)、电子显微镜(扫描、透射)的成像原理
光学显微镜:
利用凸透镜的成像原理,由目镜与物镜共同组成光学成像系统。
倒置inversemicroscope:
物镜(载物台下)与照明系统(载物台上)颠倒。
荧光fluorescencemicroscope:
光源为紫外线,波长较短,分辨力高于普通显微镜。
有两个特殊的滤光片。
照明方式通常为落射式。
电子显微镜:
透射transmissionelectronmicroscope,TEM:
D=0.2mm。
以电子束作光源,电磁场作透镜。
电子束的波长短,并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。
扫描scanningelectronmicroscope,SEM:
D=6-10nm。
极细的电子束扫描样品,在样品表面激发出次级电子,次级电子的多少与样品表面结构有关,次级电子由探测器收集,信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度,显示出与电子束同步的扫描图像。
电镜标本的制备方法
透射电子显微镜TEM:
取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、观察。
扫描电子显微镜SEM:
取材、清洗、固定、脱水、干燥、镀膜、观察。
激光共聚焦显微镜的原理是什么?
激光共聚焦显微镜(laserconfocalscanningmicroscope,LCSM):
以单色激光为光源,使样品被激发出荧光,利用计算机进行图像处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。
由于照明孔与检测孔相对于物镜焦平面是共轭的,焦平面上的点同时聚焦于检测孔和照明孔,焦平面以外得点不会再检测孔处成像,从而得到清晰的象。
流式细胞仪工作原理是什么?
流式细胞仪(flowcytometer):
包在鞘液中的细胞通过高频振荡控制的喷嘴,形成包含单个细胞的液滴,在激光束的照射下,这些细胞发出散射光和荧光,经探测器检测转换为电信号,送入计算机处理,输出统计结果。
并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群,分离纯度可达99%。
免疫组化的原理是什么?
免疫组化(immunocytochemistry)是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。
3细胞膜与细胞外壁
细胞质膜plasmamembrane:
指包围在细胞表面的一层极薄的膜,主要由膜脂和膜蛋白所组成。
生物膜biomembrane:
质膜与内膜在起源、结构和化学组成等方面具有相似性,总称为生物膜。
膜骨架membraneassociatedcytoskeleton:
指质膜下纤维蛋白组成的网架结构(维持质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能)。
脂质体liposome:
根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的现象而制备的人工膜。
细胞外被(糖萼):
动物细胞表面的一层富含糖类物质的结构。
作用为保护,细胞通信,并与细胞表面的抗原性有关。
膜的结构:
流动镶嵌模型的内容
流动镶嵌模型Fluid-mosaicmodel:
1.细胞膜由流动的双脂层和嵌在其中的蛋白质组成;
2.磷脂分子以疏水性尾部相对,机型头部朝向水相组成生物膜骨架;
3.蛋白质或嵌在双脂层表面,或嵌在其内部,或横跨整个双脂层,表现出分布的不对称性;
生物膜的特性有哪些?
1.流动性:
膜脂的流动性(脂分子的多种侧向运动)
膜蛋白的流动性(蛋白质分子的侧向运动:
侧向扩散、旋转扩散)
膜的流动性是保证质膜功能的必要条件。
2.不对称性(内外两层组分和功能的差异):
膜脂分布的不对称性
膜蛋白的不对称性(糖蛋白仅存在于膜外侧)
生物膜的功能:
1.为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境(最基本)。
2.选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排出
3.提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息的跨膜传递
4.为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行
5.介导细胞与细胞、细胞基质之间的连接
6.参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构
红细胞的膜骨架的特点有哪些?
易纯化分离;
除去内容物后,仍保持原来的大小与形状的结构为血影,主要成分有:
血影蛋白、锚蛋白、带三蛋白、血型糖蛋白;
这一骨架系统赋与了红细胞质膜的刚性与韧性,得以几百万次地通过比它直径还小的微血管、动脉、静脉。
4物质跨膜运输
简单扩散(自由扩散)freediffusion:
小分子物质顺浓度梯度,不需耗能也不需膜蛋白的协助进入细胞的方式。
协助扩散(促进扩散)facilitateddiffusion:
小分子物质顺浓度梯度,在膜转运蛋白协助下的跨膜转运方式。
主动运输activetransport:
有载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度进行跨膜转运的方式。
协同运输contransport:
靠间接提供能量完成的主动运输方式。
举例说明细胞运输的类型及其特点
被动运输:
①简单扩散:
特点:
a沿浓度梯度(或电化学梯度)扩散;
b不需要提供能量;
c没有膜蛋白的协助;
eg:
N2、O2
②协助扩散:
a比自由扩散速率高;
b运输速率同物质浓度成非线性关系;
c特异性;
饱和性
氨基酸
主动运输:
a逆浓度梯度(逆化学梯度)运输;
b需要能量;
c都有载体蛋白;
①钠钾泵[动物细胞质膜]
原理:
通过磷酸化和去磷酸化发生构象的变化。
作用:
a维持细胞的渗透性,保持细胞的体积;
c维持低Na+高K+的细胞内环境;
c维持细胞的静息电位;
每一循环消耗一个ATP,转运出三个Na+,转进两个K+;
②钙离子泵[质膜和内质网膜]
维持细胞内较低的钙离子浓度;
每循环消耗一个ATP,将两个Ca2+从细胞质转运至胞外或内质网腔;
③质子泵:
P-type:
利用ATP自磷酸化发生构象的改变来转移离子,如植物细胞膜上的H+泵、动物胃表皮细胞的H+-K+泵(分泌胃酸);
V-type:
存在于各类小泡膜上,由许多亚基构成,水解ATP产生能量,但不发生自磷酸化,位于溶酶体膜、内体、植物液泡膜上;
F-type:
是由许多亚基构成的管状结构,利用质子动力势合成ATP,也叫ATP合酶,位于细菌质膜,线粒体内膜和叶绿体的类囊体膜上;
④协同运输:
同向协同(symport)小肠细胞对葡萄糖的吸收伴随着Na+的进入。
反向协同(antiport)动物细胞反向运输H+,调节ph
胞吞、胞吐:
①胞饮作用:
细胞吞入液体或极小的颗粒物质;
②受体介导的胞吞作用:
通过受体-配体结合而引发的吞饮作用eg.病毒侵染细胞
a是细胞性摄取细胞外蛋白质或化合物的过程;
b所摄入的大分子在质膜上有特异受体;
c内吞过程由大分子配体与其受体的识别、结合而激发;
d受体配体复合物聚集于质膜有衣小凹内,由有衣小泡送至内体;
③胞吐作用:
包含大分子物质的小囊泡,从细胞内部移至细胞表面,与质膜融,将物质排出胞外;
eg.消化残渣、代谢物;
5细胞信号转导
细胞通讯cellcommunication:
细胞间或细胞内通过高度精确和高效地发送与接收信息的通讯机制,对环境做出综合反映的细胞行为。
信号转导signaltransduction:
指外界信号(如光、电、化学分子)与细胞表面受体作用,通过影响胞内信使的水平变化,进而引起细胞应答反应的一系列过程。
受体receptor:
受体指任何能够同激素、神经递质、药物或细胞内的信号分子结合并能引起细胞功能变化的生物大分子。
在细胞通讯中,受体通常是指位于细胞膜表面或细胞内信号分子结合的蛋白质。
配体ligand:
在细胞通讯中,信号分子被称为配体。
酶耦联型受体enzymelinkedreceptor:
分为两类,其一是本身具有激酶活性,如肽类生长因子(EGF,PDGF,CSF等)受体;
其二是本身没有酶活性,但可以连接非受体酪氨酸激酶,如细胞因子受体超家族。
受体及其类型
受体:
指任何能够同激素、神经递质、药物或细胞内的信号分子结合并能引起细胞功能变化的生物大分子。
在细胞通讯中,受体通常是指位于细胞膜表面或细胞内与信号分子结合的蛋白质。
受体的的基本类型有两类:
A.表面受体surfacereceptor:
细胞质膜上
表面受体主要是同大的信号分子或小的亲水性的信号分子作用,传递信息。
表面受体主要有离子通道型受体、G蛋白耦联型受体和酶耦联受体三类;
第一类存在于可兴奋细胞。
后两类存在于大多数细胞,在信号转导的早期表现为激酶级联事件,即为一系列蛋白质的逐级磷酸化,籍此使信号逐级传送和放大。
B.细胞内受体intracellularreceptor:
胞质、核基质中
细胞内受体主要是同脂溶性的小信号分子作用。
细胞表面受体介导的信号转导
离子通道受体:
受体本身为离子通道,即配体门通道(ligand-gatedchannel)。
主要存在于神经、肌肉等可兴奋细胞,其信号分子为神经递质。
分为:
阳离子通道,如乙酰胆碱、谷氨酸和五羟色胺的受体;
阴离子通道,如甘氨酸和γ-氨基丁酸的受体。
神经递质通过与受体的结合而改变通道蛋白的构象,导致离子通道的开启或关闭,改变质膜的离子通透性,在瞬间将胞外化学信号转换为电信号,继而改变突触后细胞的兴奋性。
G蛋白耦联型受体:
1.某些G蛋白可直接控制离子通道的通透性;
2.将受体接受的信号传递给效应物,产生第二信使,进行信号转导
cAMP途径
激素→结合G蛋白耦联受体→激活G蛋白→激活腺苷酸环化酶→生成cAMP(第二信使)→激活依赖cAMP的蛋白激酶A→基因调控蛋白CREB→基因转录
IP3途径
信号分子→激活Gp蛋白→激活PLC→水解PIP2,产生第二信使DAG、IP3→激活PKC→级联反应→细胞应答
酶耦联受体:
接受配体后发生二聚化,启动下游信号转导。
Ras途径
配体→RPTK→Ras→Raf(MAPKKK)→MAPKK促分裂原活化蛋白激酶激酶→MAPK→进入细胞核→转录因子→基因表达
细胞内受体介导的信号转导:
甾类激素,NO
甾类激素分子相对质量为300Da左右,这类激素通常表现为影响细胞分化等长期的生物学效应。
甾类激素诱导的基因活化分为两个阶段:
①转录直接活化少数基因的初级反应阶段,发生迅速。
②初级反应的基因产物再活化其他基因,产生延迟的次级反应,对初级反应起放大作用。
NO是可溶性的有毒气体,研究表明,NO分子具有多种生物学功能,并且是一种能够进入细胞直接作用于酶并引起快速反应的气体信号分子。
在一些组织中作为局部介质引起信号转导,使血管壁的平滑肌细胞松弛,血液流通顺畅。
NO能够跨过细胞质膜扩散到邻近的平滑肌细胞,并将鸟苷酸环化酶激活,该酶催化GTP生成cGMP。
cGMP是非常重要的第二信使,可引起肌细胞松弛和血管舒张反应。
蛋白激酶的作用
蛋白激酶是一类磷酸转移酶,其作用是将ATP的γ磷酸基转移到底物特定的氨基酸残基上,使蛋白质磷酸化。
蛋白质通过磷酸化-去磷酸化调节功能/活性并进而影响细胞的很多生命过程。
蛋白质调节其功能/活性的方式有很多种,包括:
磷酸化-去磷酸化、乙酰化、蛋白质切割,如酶原激活和caspases激活等。
蛋白质的磷酸化和去磷酸化是蛋白质调节其功能/活性的一种重要方式,有些蛋白质在磷酸化状态时具有活性,而在非磷酸化状态时没有活性,如激酶MAPK和转录因子CREB,Jun等,而有些蛋白质相反,如转录因子IκBα的抑制活性。
6细胞内膜系统
内膜系统endomembranesystem,internalmembranesystem:
相对于细胞质膜而言,将细胞内除了叶绿体、线粒体以外的所有膜结构的细胞器统称为内膜系统。
信号识别颗粒signalrecognitionparticle,SRP:
信号识别颗粒是一种核糖核蛋白复合体,由6种不同的蛋白质和一个由300个核苷酸组成的7SRNA组合而成,SPR通常存在于细胞质基质中。
溶酶体
初级溶酶体primarylysosome:
直径约0.2-0.5μm,有多种酸性水解酶,但没有活性,包括蛋白酶、核酸酶、酯酶、磷脂酶等60余种,反应的最适ph值为5左右。
次级溶酶体secondarylysosome:
是正在进行或完成消化作用的溶酶体,内含水解酶和相应的底物,可分为自噬溶酶体和异噬溶酶体;
残体residualbody:
又称后溶酶体,已失去酶活性,仅留未消化的残渣,故名。
残体可通过外排作用排出细胞,也可能留在细胞内逐年增多,如表皮细胞的老年斑,肝细胞的脂褐质。
溶酶体贮积症lysosomalstoragediseases:
由于遗传缺陷致使溶酶体内缺乏某种水解酶,导致相应底物不能被降解而被积蓄在溶酶体内,由于溶酶体过载、代谢紊乱,引起溶酶体贮积症。
如台-萨氏综合征、II型糖原累积病(Pompe病)、Gaucher病、细胞内含物病等。
内质网的形态,组成和功能
形态与组成:
约占细胞总膜体积的一半,是封闭的网络系统。
分为粗面型内质网rER和光面型内质网sER;
rER呈扁平囊状,排列整齐,有核糖体附着。
sER是分支管状或小泡状,无核糖体附着。
细胞不含纯粹的rER或sER,它们分别是ER连续结构的一部分。
功能:
①蛋白质合成:
蛋白质都是在核糖体上合成的,并且起始于细胞质基质,但是有些蛋白质在合成开始不久后便转在内质网上合成,这些蛋白主要有:
A向细胞外分泌的蛋白、如抗体,激素;
B膜的整合蛋白;
C需要与其它细胞组合严格分开的酶,如溶酶体的各种水解酶;
D需要修饰的蛋白,如糖蛋白;
②蛋白质的修饰与加工:
包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等,其中最主要的是糖基化,几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。
糖基化的作用:
A使蛋白质能够抵抗消化酶的作用;
B赋予蛋白质传导信号的功能;
C某些蛋白只有在糖基化之后才能正确折叠;
③新生肽链的折叠、组装和运输:
由内质网输出的膜泡运输,这种膜泡由内质网的排出位点以出芽的方式排出;
④其它作用:
合成磷脂、胆固醇等膜脂,合成后以出芽的方式转运至高尔基体,溶酶体和质膜上,或借磷脂转移蛋白(PTP)形成水溶性复合物,转至其他膜上。
解毒,副肝细胞色素P450酶系;
参与甾体类激素的合成;
使葡糖6-磷酸水解,释放糖至血液中;
储存钙离子,作为细胞内信号物质,如肌质网;
提供酶附着的位点和机械支撑作用;
高尔基体的形态,组成和功能
是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。
常分布于内质网与细胞膜之间,呈弓形或半球形。
凸出的一面对着内质网称为形成面或顺面(cisface)。
凹进的一面对着质膜称为成熟面或反面(transface)。
顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡。
扁平囊直径约1um,单层膜构成,中间为囊腔,周缘多呈泡状,4~8个扁平囊在一起(某些藻类可达一二十个),构成高尔基体的主体(Golgistack)。
①参与细胞分泌活动:
RER上合成蛋白质→进入ER腔→COPII运输泡→进入CGN→在medialGdgi中加工→在TGN形成运输泡→运输与质膜融合、排出。
高尔基体对蛋白质的分类,依据的是蛋白质上的信号肽或信号斑。
②蛋白质的糖基化:
O-连接的糖基化在高尔基体中进行,糖的供体为核苷糖。
③进行膜的转化功能:
内质网上合成的新膜脂转移至高尔基体后,经过修饰和加工,形成运输泡与质膜融合。
④将蛋白水解为活性物质:
如将蛋白质N端和C端切除,成为有活性的物质,如胰岛素(C端);
或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽,如神经肽;
⑤参与形成溶酶体;
⑥参与植物细胞壁的合成,合成纤维素和果胶质;
溶酶体与过氧化物酶体的功能
溶酶体:
1.细胞内消化:
如高等动物内吞低密脂蛋白获得胆固醇,单细胞真核生物利用溶酶体消化食物;
2.自体吞噬:
清除无用的生物大分子,衰老细胞、细胞器、个体发育中多余的细胞。
许多生物大分子的半衰期只有几小时至几天,肝细胞中线粒体的平均寿命约10天左右;
3.防御作用:
如巨噬细胞杀死病原体;
4.参与分泌过程的调节:
如将甲状腺球蛋白降解成有活性的甲状腺素;
5.形成精子的顶体;
过氧化物酶体:
1.在动物中:
①参与脂肪酸的β-氧化;
②具有解毒作用,过氧化氢酶利用H2O2将酚、甲醛、甲酸和醇等有害物质氧化,饮入的酒精1/4是在微体中氧化为甲醛;
2.在植物中:
①参与光呼吸,将光合作用的副产物乙醇酸氧化为乙醛酸和过氧化氢;
②在萌发的种子中,进行脂肪的β-氧化,产生乙酰辅酶A,经乙醛酸循环,由异柠檬酸裂解为乙醛酸和琥珀酸,加入三羧酸循环,因涉及乙醛酸循环,又称乙醛酸循环体;
什么是信号假说?
分泌蛋白在N端含有一信号序列,称信号肽,由它指导在细胞质基质开始合成的多肽和核糖体转移到ER膜;
多肽边合成边通过ER膜上的水通道进入ER腔,在蛋白合成结束前信号肽被切除。
指导分泌性蛋白到糙面内质网上合成的决定因素是N端的信号肽,信号识别颗粒(SRP)和内质网膜上的信号识别颗粒受体(又称停泊蛋白dockingprotein,DP)等因子协助完成这一过程。
分泌蛋白合成、转运、加工、分选的途径及机理。
7细胞连接细胞外基质
紧密连接tightjunction:
是封闭连接的主要类型,相邻的细胞质膜紧紧靠在一起,没有间隙。
紧密连接的分子结构有多种蛋白质分子参与机紧密连接复合物的构成,最重要的是跨膜蛋白-闭锁蛋白。
锚定连接anchoringjunction:
是一类由细胞骨架参与,存在于相互接触的细胞与细胞之间或细胞与细胞外基质之间的细胞连接。
黏着带:
是上皮细胞之间连接的带状黏附连接,常位于上皮细胞靠顶部的侧面,紧密连接的下方。
存在于紧密连接与桥粒之间,又称中间连接。
黏着斑:
位于上皮细胞基底膜,是分散而独立的细胞与细胞外基质之间形成的黏着连接。
桥粒spotdesmosome:
由中间纤维(角蛋白纤维等)参与形成的锚定连接。
存在于上皮细胞粘合带下方和基侧面。
半桥粒hemidesmosome:
上皮基底层细胞与基底膜之间的连接装置。
细胞外基质:
细胞外基质是由细胞分泌到细胞外空间的分泌蛋白和多糖构成的精密有序的网络结构。
它不仅对组织细胞起支持、保护、营养作用,而且还与细胞的增值、分化、代谢、识别、黏着、迁移等基本生命活动密切相关。
细胞连接的方式有哪些?
1.封闭连接occludingjunction:
将相邻上皮细胞的质膜紧密地连接在一起,阻止溶液中的小分子沿细胞间隙从细胞一侧渗透到另一侧。
紧密连接是这种连接的典型代表。
紧密连接有两个主要功能:
①形成渗透屏障,阻止可溶性物质从上皮细胞层一侧通过细胞间隙扩散到另一侧,起封闭作用;
②形成上皮细胞膜蛋白与膜脂分子侧向扩散的屏障,从而维持上皮细胞的极性;
2.锚定连接anchoringjunction:
连接处质膜间隙的宽度近20nm。
主要作用是形成能够抵抗机械张力的牢固粘合。
锚定连接主要由两类蛋白--细胞内锚定蛋白和跨膜黏着蛋白构成。
锚定连接的类型有中间连接intermendiatejunction与桥粒连接spotdesmosomejunction:
①中间连接:
细胞与细胞之间形成黏着带-带状桥粒;
细胞与细胞外基质形成黏着斑;
②桥粒连接:
细胞与细胞之间形成桥粒;
细胞与基底膜之间形成半桥粒;
通讯连接communicationjunction:
介导细胞间通讯;
间隙连接(心肌cell)、胞间连丝(植物cell)、化学突触;
细胞外基质的主要成分有哪些?
细胞外基质Extracellularmatrix,ECM:
氨基聚糖、蛋白聚糖、结构蛋白(胶原、弹性蛋白)、黏着蛋白(纤连蛋白、层粘连蛋白);
多糖类:
①氨基聚糖(粘多糖):
有透明质酸、肝素、硫酸软骨素、角质素等种类。
②蛋白聚糖:
氨基聚糖+核心蛋白;
氨基聚糖与蛋白聚糖的功能:
①使组织具有弹性和抗压性;
②对物质转运有选择渗透性;
③角膜中的蛋白聚糖具有透光性;
④氨基聚糖具有抗凝血作用;
⑤细胞表面的蛋白聚糖具有传递信息的作用;
⑥与组织老化有关;
纤维蛋白类:
·
结构蛋白:
胶原、弹性蛋白
胶原:
①胶原在不同组织中行使不同的功能,构成细胞外基质的骨架结构,赋予组织刚性及抗张力作用;
②影响细胞的形态和运动;
③具有刺
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