大鼠取血方法Word文档下载推荐.docx
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大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3.眼眶静脉丛采血:
体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;
体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
4.断头取血:
采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
小鼠可采用约0.8~1.2ml;
大鼠约5-10ml。
5.心脏采血:
鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。
若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。
小鼠约0.5-0.6ml;
大鼠约0.8-1.2ml。
1.浅麻醉大鼠
2.四肢展开固定在平板上
3.按常规碘酒、酒精消毒后
4.用食指感觉心博最动处
5.大约在胸骨下缘1/3处、稍偏左0.2-0.5左右的地方垂直进针(1/4号)
6.针头抵心脏有明显的搏动感,再稍进针,有空虚感,血液跳跃而上针腔
7.从血液的颜色很容易判断在心室还是心房,一般都在心室
8.多次同一大鼠的心脏采血,切记初次进针的位置及深度,不要随意更换固定姿势!
9.我每次取1ml血液,大约可操作4-5次(200g大鼠)
6.颈动静脉采血:
先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。
在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。
离心取上清后,余下的红细胞加适量生理盐水从尾静脉中回输给大鼠,这样可能对大鼠的血量、体内药物的浓度等影响均小些。
颈动静脉插管:
1.麻醉后手术,大鼠固定后头朝自己,颈部中线附近开1-2厘米口,用弯止血钳钝性分离,动脉在中间,静脉比较靠边,而且分支较多,找到较粗的部分,小心,耐心分离,用线结扎远心端,在近心端预置一结扎用线,用止血钳牵拉远心端线,使血管充盈,显微剪剪开小口,插管,结扎.插管封口.(打结即可)
2.动脉方法相似.
3.将动静脉插管引至背后,分清动静脉,一般手术后17小时或更长时间开始给药,取血,通常动脉取血,静脉给药,期间要用肝素冲管道.
颈静脉采血:
采血者可以站在动物头端,不需要麻醉动物,用个硬纸筒稍固定头部防止动物咬,左手固定将头部稍向左扭一下,会看见出现一个三角区,右手持注射器平行于三角区正中进针就可以了。
左右两边颈静脉均可以采,采左边时上面的操作反方向。
从锁骨上方,紧贴锁骨中间的地方进针,这个位置很重要!
!
进针后,稍稍抽下针管,如果没有血,则往前或向后走下针头,其实我的经验是大都是向前扎的太多了,应往后抽下针头。
如果有血,哈哈,固定住注射器抽血吧。
抽完2ml,大鼠100%存活的
7.腹主动脉采血:
最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。
用注射器吸出血液,防止溶血。
或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。
8.股动(静)脉采血:
①先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。
或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。
体重15-20g小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。
②在大鼠麻醉状态下,固定,仰卧位固定,在大鼠的左侧腹股沟处切口,暴露股动静脉,分离并分别插管(插管中要求有肝素盐水并在插管的一头接上三通方便取血使用),取血。
注意:
药动学实验一般不主张麻醉,因此动脉插管不应使用,而且大鼠血量有限,不适合短时间内多次取血,取血量过大会直接影响大鼠生理状态,即使得到一些数据,意义也不大。
目前比较可行的办法是在每个时间点各取一组大鼠的血,再进行求算。
尾静脉取血不行,血量有限,而且采集时间太慢,根本来不及。
眼底静脉取血倒是可行的,血量最多的一回,我曾经取到过接近4ml,一般可以在1ml以上,但取血有一定难度,时间长了,手就受不了了,我的经验是可以浅麻一下,用乙醚短时间麻醉,让鼠没有太大力气就可以,而且对实验结果没有明显影响,但要几个人合作,准确掌握好取血的时间。
一个老鼠仅仅作为一个时间点的话,就从眼眶取血,大概200克大鼠可以取6ml左右,最好不要进行麻醉,只要毛细管在眼眶后扎对位置,血会象自来水一样流的,一开始的劲过了就不太挣扎了。
如果是单个大鼠连续取血,也可用本法,就是最多一次不可超出1ml,最好是0.5-0.6ml,并且适当在消除期补充生理盐水腹腔注射。
尾静脉的血没有眼眶出得快,很慢的,取用量少还可以,在取前用甲苯擦一下,使静脉扩张,然后用注射针头(经肝素润湿过)扎进去,直接就会慢慢滴出来的。
刚开始抓它时温柔点,然后使其眼充分突起,迅速扎入并旋转,一般很快就出血。
但此时它们可能会比较凶,你手卡着它脖子并牢牢地把它按在笼盖上,只要手别软,别心疼它,应该没问题的。
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