如果发现ABO正反定型不一致应该办Word文档格式.docx
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ABO正反定型不符结果分析
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2006-3-1810:
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一.实验者操作错误
1.假阴性结果:
1)试管中没有加入抗体试剂或血清。
2)没能认识溶血也是阳性反应。
3)血清或试剂与红细胞比例太小。
4)抗体失效或错误的抗体/红细胞试剂。
5)没能正确记录和解释结果
2.假阳性结果:
1)试剂,红细胞和盐水受到细菌污染。
2)加样时交叉污染。
3)加错样本。
二.红细胞标本本身问题
1)病人近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞,如非O型人接受了O
型红细胞,或骨髓移植,病人血循环中多于一个ABO型别的红细胞。
2)某些ABO亚型红细胞和白血病或其他恶性疾病的病人红细胞ABO抗原太弱。
3)红细胞获得性或遗传性异常,如获得性B抗原红细胞或红细胞Tn/T多凝集红细胞。
4)血清血浆中还有高浓度的A或B血型物质,中和了抗体试剂。
出现假阴性。
5)血清血浆中含有针对抗-A,抗-B试剂中成分的抗体,引起假阳性。
6)严重致敏的红细胞,发生自身凝集。
三.血清标本问题
1)当纤维蛋白去除不完全时,会造成红细胞假性凝集。
2)血清中高分子蛋白增多,引起的非特异凝集。
如骨髓瘤的病人M蛋白增多。
3)血清中含有抗-A,抗-B以外的其他红细胞抗体,如抗-M也可在盐水中反应。
4)血清中含有高效价的冷凝集素抗体,抗-I。
5)4-6月龄的婴儿血清中ABO抗体是阴性或很弱,故一般不对其检测ABO抗体反定型,且婴儿抗体经常是来自母体的抗体。
6)由于血清中异常高效价的补体分子,和红细胞膜上的补体结合位点结合,遮蔽了红细胞A和B抗原位,以致使凝集反应不能发生。
7)病人接受了ABO血型不同但配型相容的骨髓移植,其血清中的ABO抗体与红细胞抗原不一致。
比如,A型人接受了O型人的骨髓后,血循环中有O型红细胞,但血清中只有抗B。
8)病人近期输用了大量异型血浆,可使正反定不符。
文章来自中华检验医学网(),原文地址:
正反定型不符及疑难血型鉴定处理分析
咸阳市红十字中心血站检验科(陕西712046)
范乃权
准确的血型鉴定是临床安全、有效输血的重要基础保证,是使交叉配血实验顺利进行的前提,随着《临床输血技术规范》的实施,标准血型鉴定操作越来越为大家重视,不再以简单的红细胞肉眼玻片法抗原鉴定来确定被检者血型,而是以正定型和反定型双相结果来综合判断。
使输血安全向前迈进了一步。
但也会经常遇到一些正反定型不符的病例,经过一些特殊实验,如抗人球蛋白实验、吸收放散实验血型物质的测定,基因分型等方法,最终确定了血型,现将各种疑难病例分为7类,总结报告如下:
1
对象与方法
1.1检测对象
自2001年5月~2008年5月来我站自愿无偿献血者8000名中,共检出血型正反不符者82例。
1.2试剂、仪器
仪器:
日本以保田普通离心机,达亚美卡式离心机、温浴箱;
试剂:
抗人球蛋白试剂(上海市血液中心),标准谱细胞(上海市血液中心),凝聚胺法试剂(珠海贝索),Coombs卡(达亚美)。
标准血清抗A抗B抗A1血清、A1、A2红细胞(长春博德生物制品公司),抗D(上海血液生物医药有限公司)
1.3实验方法
正反定型及抗体筛查鉴定方法均按照《临床输血与输血技术学实验指导》;
抗人球蛋白实验方法按照《临床输血与输血技术学实验指导》;
血清浓缩法:
即在观察完原来实验结果的基础上再次离心,弃掉上清液,再次加入血清(试剂或标本)离心后再观察结果,还可以反复进行以上操作;
吸收放散实验:
按照《临床输血与输血技术学实验指导》;
亚型血型鉴定实验:
方法同血型鉴定,试剂为抗A1血清、A1、A2红细胞;
唾液血型物质测定:
包括被检者唾液的留取,抗血清标化和血型物质测定均按照《临床输血与输血技术学实验指导》。
2
结果
将正反定型不符结果分类如表
正反定型不符结果分类
编号
抗A
抗B
抗A+B
抗D
RBCA
RBCB
RBCO
自身对照
结果
例数
原因
1
4+
ARh+
21
小儿、老人抗体弱
2
+
8
大量输液
3
混合视野
2+
BRh+
B型人误输O型血
4
AB
亚型
5
1+
9
癌症病人抗原减弱
6
A
28
非特异性抗体
7
12
特异性抗体
3
讨论
血型不符的输血一旦发生,会导致严重的并发症[1],Linden等[2]报道在美国每年因溶血反应死亡的病例中,约10例是输血失误引起的。
SaZamn[3]报道,在输血相关死亡病例报告中,51%是由于输入了ABO不相溶的血液制品导致急性溶血反应致死的。
因此,正确的血型鉴定,尤其是ABO血型是正确配血,安全输血的基础。
若血型鉴定准确无误,大部分配血是安全顺利的。
过去,由于条件和观念所限,许多地方医院仅凭简单的玻片法的的红细胞抗原测定(正定型)就确定患者血型,进而给患者输注同型血液,使输血中的人为错误率很高。
2001年后卫生部《临床输血技术规范》实施后,人们安全输血的意识不断提高,血型鉴定技术也规范为正反定型技术,有些医院还在正定型中添加被检者RBC与抗A+B(O型血清)的反应结果的观察,以对与抗A抗B反应进行质量控制,在反定型中添加被检者血清与O型红细胞的反定结果,以排除ABO以外的抗体影响定型实验结果,从多方面控制实验结果的准确性。
在我们日常工作中遇到的各种情况的处理中发现,添加这些检查很有必要。
反定型时增加O管检查是检出ABO以外抗体的有效方法之一,因为正常情况下O型红细胞上不存在ABO抗原的,若O管发生凝集,很可能存在ABO以外抗体。
提示我们进行抗体筛查和鉴定来进一步确定抗体的性质。
在我们实验中40例O管凝集标本中,通过抗体筛查抗体鉴定,发现28例为非特异性抗体(大多为RBC直接Coombs试验阴性的病人和冷凝集病人),12例为特异性抗体,包括抗M、抗E、抗D等盐水抗体,因此O管反定型十分必要。
通常情况下,红细胞上的抗原是不变的,而且用来检测抗原的标准血清效价较高。
因此正定型的错误率很低。
反定型则是检测被检者的血清中抗体,由于人血清中抗体强弱差异较大,尤其是老人小孩或免疫功能低下者及大量输液病人,血清中抗体较弱使得反定型检出率降低。
在这种情况下,通常用血清浓缩的方法来使实验更加清晰,即通过增加血清抗体的浓度和比例,使抗原完全结合,使弱凝集转强供肉眼观察,我们用这种方法对29例弱抗体患者进行实验,效果很明显,只有3例患者反复浓缩无效,后用家系调查确证了血型,此类病人体内确无抗体,属免疫缺陷病。
在正反定型不符问题的解决中,家系调查也是可以帮助我们确定疑难血型的有效方法之一,在一些疾病如癌症肿瘤或亚型血型中,抗原减弱或消失时有发生,往往会影响被检血型的准确判断。
我们有5例血液病及肿瘤患者,红细胞上抗原已经完全消失用浓缩法无法确定,3例血清抗体缺失病人,将其父母、兄弟、配偶及子女的血型鉴定出来和被检者的实验结果综合起来加以分析判断,也可以得出正确的血型,此外,基因分型也是取得正确血型的方法之一。
在血型鉴定中尤其是亚型的鉴定时,唾液的血型物质鉴定和血液的吸收放散实验也是一种必不可少的检测手段,因为红细胞抗原还少量存在于唾液等体液中,检测到唾液中的血型抗原,亦可以帮助确定血型。
因为微量抗原可以通过吸收放散实验才能检出,血液中抗原减弱无法检出时,可以借助吸收放散实验来检测以帮助抗原确定。
3例亚型和2例肿瘤病人的血型用此方法得以确定。
只是此方法操作有些繁琐,需要较长时间,不适合急诊情况下的处理。
此外,人源性血清在弱抗原检出方面优势相当明显,因为多个人份新鲜抗血清混合应用效价很高,确实可以使不易观察的弱凝集变得清晰可见。
另外,我们在工作中发现:
在ABO血型一时还不能确定的情况下,病人急需输血,输注O型洗涤红细胞确实为一种可行有效的方法,因为有些血型鉴定需要花费很多时间进行很多实验来综合分析判定结果,为了不因此而延误病情,先给病人输注O型洗涤红细胞应急,待血型确定后再输入同型血液是较好的解决方法。
参考文献
[1]魏小斌,输血人为误差和输血安全,中国输血杂志2005.6.18(3).
[2]LindenJV,TouraultMA,ScribnerCL.(letter)Decreaseinfre-quencyoftransfusionfatalities.Transfusion,1997,37
(2):
243.
[3]SazamaK.Reportsof355transfusion-associateddeaths:
1976through1985.Transfusion,1990,30(7).
四、血型知识(39-57)
39、是谁第一个发现了血型?
40、目前发现人类有哪些血型系统?
41、与输血关系最大的是哪一个血型系统?
42、哪一年世界卫生组织把ABO血型系统的血型正式向全世界统一命名为A、B、O、AB四种血型?
43、ABO血型系统是如何定型的?
44、ABO血型与红细胞上的抗原有什么关系?
45、血型是由什么决定的?
46、ABO血型与输血有什么关系?
47、ABO血型鉴定的原理是什么?
48、检测ABO血型所用试剂和材料有哪些?
49、检测ABO血型的方法有哪些?
50、如何判断ABO血型试验结果?
51、正反定型不一致的原因有哪些?
52、如果发现ABO正反定型不一致应该怎么办?
53、做交叉配血试验时应注意什么?
54、O型全血是万能的吗?
55、还有什么血型系统与输血关系很大?
56、为什么要检查Rh血型?
57、Rh血型的分布情况如何?
世界上第一个发现红细胞血型的人是奥地利维也纳大学助教Landsteiner,那是在1900年。
这一划时代的发现,为以后安全输血提供了重要保证,为此,他获得了1930年的诺贝尔奖,并赢得了“血型之父”的美誉。
开始时,他只发现了人类红细胞血型A、B、C三型。
1902年他的学生Decastello和Sturli又发现了A、B、C之外的第4型。
后来国际联盟卫生保健委员会将这4型正式命名为A、B、O、AB型,这就是现在人们熟知的红细胞ABO血型系统。
在以后的数十年里,科学家又相继发现了几种血型。
1940年Landsteiner和Wiener发现了Rh血型,到1995年,共发现23个红细胞血型系统,外加一个低频率抗原组、高频率抗原组和尚未形成体系的血型集合(collection),抗原总数193个。
1958年法国的Dausset首先发现人类白细胞抗原(humanleucocyteanti-gen,HLA),到1995年已公布HLA表型特异性112种,HLA等位基因已达503个。
血小板血型抗原是在1957年后陆续被发现的。
返回
有ABO血型系统、MN血型系统、P血型系统、Rh血型系统、HLA血型系统等二十多个血型系统。
返回
是ABO血型系统。
42、哪一年世界卫生组织把ABO血型系统的血型正式向全世界统一命名为A、B、O、AB四种血型?
1921年。
ABO血型系统是以人体红细胞上的抗原与血清中抗体而定型的。
凡红细胞上含有A抗原,而血清中含有抗B抗体的称为A型;
红细胞上含有B抗原,而血清中含有抗A抗体的称为B型;
红细胞上含有A和B抗原,而血清中无抗A、抗B抗体的称为AB型;
红细胞上不含有A、B抗原,而血清中含有抗A和抗B抗体称为O型。
凡红细胞上有A抗原的为A型;
有B抗原的为B型;
有A、B抗原的为AB型;
无A、B抗原的为O型。
人类的血型是由遗传决定的,子女的血型是由父母双亲的染色体遗传而来,人血中的红细胞、白细胞、血小板以及血浆蛋白等都分成不同的型。
除单卵双生外,可以说世界上很难找到二位血型完全相同的人。
输血时一般情况下要同型相输,否则体内存在的抗体与输入的红细胞抗原相结合会引起严重的输血反应。
例如:
如果A型血输入B型人体内,A型血红细胞上的A抗原就会和B型血清中的抗A抗体发生凝集反应(抗原-抗体反应),使红细胞大量破坏,产生一系列综合症状,并危及生命。
所以正确的鉴定血型是安全输血必不可少的前提。
ABO血型鉴定的原理是根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。
可利用红细胞凝集试验,通过正(血清试验)反(细胞试验)定型准确鉴定ABO血型。
所谓正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原,所谓反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或抗B。
(1)抗A(B型)、抗B(A型)及抗A、B(O型)分型血清,效价1:
128。
(2)3%~5%A、B及O型试剂红细胞及抗A、B(O型)分型血清,效价1:
(3)受检者血清。
(4)受检者3%~5%红细胞盐水悬液。
有试管法和玻片法。
(1)试管法:
①取洁净小试管3支,分别标明抗A、抗B和抗A、B,用滴管分别加抗A、抗B和抗A、B分型血清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者3%~5%红细胞盐水悬液1滴,混合。
②另取洁净小试管3支分别标明A,B和O型细胞,用滴管分别加入受检者血清1~2滴于底部,再分别以滴管加入A、B和O型3%试剂红细胞悬液1滴混匀。
③120g离心1分钟或1300g离心15秒。
④将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(溶血)现象,如肉眼不见凝集,应将反应物倒在玻片上,再以低倍镜检查。
⑤观察结果时,既要看有无凝集,更要注意凝集强度,此有助于A,B亚型、类B或cisAB的发现。
(2)玻片法:
①清洁玻片一张(或白瓷版一块)。
标明抗A、抗B和抗A、B,分别用滴管滴加抗A、抗B和抗A、B分型血清1滴,再加受检者3%~5%红细胞悬液1滴,混合。
②另取洁净玻片一张(或白瓷板一块)。
标明A细胞、B细胞和O型试剂,分别加红细胞悬液1滴。
③将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动(在室温18~22℃),使血清与细胞充分混匀连续约15分钟,以肉眼观察有无凝集(溶血)反应。
如以玻片试验时,也可用低倍镜观察结果。
ABO血型正反定型结果
分型血清+受检者红细胞
受检者血型
受检者血清+试剂红细胞
抗A、B
抗A
抗B
O细胞
A细胞
B细胞
-
A
B
O
AB
一般有技术问题或红细胞和血清本身问题,常见以下几种原因。
(1)离心速度及时间不合适。
(2)红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例不适当,使反应不明显误判为阴性反应。
(3)受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(如白血病或恶性肿瘤)等。
(4)受检者血清蛋白紊乱(高球蛋白血病)或试验时温度过高,常引起细胞呈缗钱状排列。
(5)受检者血清中缺乏应有的抗A或抗B抗体,如丙种球蛋白缺乏症,
(6)各种原因引起的红细胞溶解,误判为不凝集,部分溶血时,可溶性血型物质中和了相应的抗体。
(7)有细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集。
(8)血清中有意外抗体,如自身抗I,常干扰定型。
(9)老年人血清中抗体水平大幅度下降。
①能被人和家兔的许多血清凝集。
②能与大多数成年人血清凝集,不管有无相应的同种抗体。
③不被脐带血清凝集。
⑤如有条件可用外源凝集素加以鉴别。
做交叉配血试验中发现不配合时,首先应考虑受血者和献血者的ABO定型是否错误,必要时进行Rh血型鉴定及抗体筛检。
其次应注意有无特异性同种抗体,或者病人的血清在室温、37℃或抗球蛋白血清中凝集所有的其他红细胞,造成交叉配血的困难,应进一步做有关试验进行鉴定。
受血者和献血者的样本,在每次输血之后,在2~6℃保存3~7天,如果病人在输血后数天内发生迟发性、溶血性输血反应时,保存的病人和献血者的血样就可能要重做或追加试验,必要时从发生溶血性输血反应的病人重新采取血样与输血前病人血样同时检查以资比较。
人类的ABO血型系统是最先发现的血型系统,因为具有规律的血型抗体,因此是最重要的血型系统,分为A、B、O及AB4型。
其中,只有O型人的红细胞上缺乏A、B抗原,故这种细胞可以输给A型、B型和AB型人。
所以当受血者ABO血型鉴定困难时,可输配血相合的O型洗涤红细胞;
再就是在抢救生命的紧急关头,同型血不足或缺乏时,亦可输少量O型血以解燃眉之急。
但是O型血浆中含有抗A、抗B抗体,它能致敏或凝集A、B、AB型红细胞,使之寿命缩短或立即破坏,属于输血禁忌。
所以,曾把O型全血称为“危险的万能血”。
有人把“危险”二字忽略了,把O型血称为“万能血”这是错误的。
在小量异型输血时,如给A型人输入1单位O型全血,其O型血浆中的抗A、抗B,因被受血者的血浆稀释,使受血者红细胞致敏较轻,引起的受血者红细胞缩短现象,不为人们所发觉。
随着异型输血量的增加,这种输血禁忌现象逐渐加重,严重时由于受血者的红细胞遭到破坏而导致溶血性输血反应。
因此,在医疗条件较好的地方,应大力推广成分输血,不应再采用异型输血。
当然把O型全血看作万能血的观点更应该纠正。
Rh血型系统与人的输血关系也很大。
一个Rh阴性者,输入Rh阳性血之后,可以刺激机体产生抗体。
当再次输入Rh阳性血之后,可产生严重的溶血性输血反应。
虽然ABO血型系统相合,但是Rh系统血型不合的反复输血也可以引起溶血性输血反应。
尤其是欧洲人,Rh阴性者占人群15%,这种人在输血时一定要输用Rh阴性血,否则就会产生输血反应。
Rh血型检查在临床上的重要性,仅次于
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