园林植物组织培养题库及答案Word下载.docx

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16、培养基的种类按其态相不同分为与，其灭菌方法一般采用。

17、pH的大小会影响琼脂的凝固能力，一般当pH大于6.0时，培养基将会，低于5.0时，琼脂。

18、植物组织培养按培养的方式分为_______培养和_______培养。

19、高压蒸汽灭菌后，培养基pH值一般稍有_________。

20、无菌室内应安有___________，在操作前至少开灯_________分钟。

21、血球计数器主要用于_______________________。

22、糖即可作为_____________，为培养的外植体提供生长发育所需的碳骨架和能源外，还具有维持培养基一定_____________的作用。

23、琼脂主要起___________作用。

24、在组织培养中，接种用具一般用__________法灭菌，而培养基常用__________法灭菌。

25、在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成__________，而与脱毒效果成__________。

26、去除植物病毒的主要方法是_______和_______两种方法，当把二者结合起来脱毒效果最好。

27、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为__________和_____________两种类型。

28、花药培养属_______培养，花粉培养属于_______培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最器官，细胞，单倍体植株

29、分离花粉的方法有______________，____________________，____________________

三、选择题（每题1.5分，共45分）

1、配制铁盐母液时，浓缩了200倍保存在1升容量瓶内，当制作10升培养基时，应取用铁盐母液__________ml：

A50B500C5D0.5

2、植物组织培养的培养基pH值范围应控制在________：

A5.5-6.0；

B4.0-7.0；

C＜4.0；

D＞7.0

3、培养基采用干热灭菌时采用_________。

A高压灭菌锅；

B烘箱；

C恒温箱；

D培养箱

4、下列不属于大量元素的盐是_________。

ANH4NO3；

BKNO3；

CZnSO4.7H2O；

DMgSO4.7H2O

5、根据灭菌物的体积大小、质地确定高压湿热灭菌时间，一般要求121℃,灭菌。

A20-40minB10-15minC50min以上

6、下列不属于细胞分裂素类的植物激素是_________。

A6-BA；

BNAA；

CZt；

DKt

7、目前应用最广泛的培养基是_________：

AMS；

BSH；

CB5；

DWhite

8、植物组培时，培养温度一般控制在________。

A.20-22℃B.25±

2℃C.<

30℃D.>

15℃

9、组织培养常用的生长调节剂主要是_________。

A维生素；

B肌醇和氨基酸；

C生长素和细胞分裂素；

D大量元素和微量元素

10、经高温灭菌后。

培养基的pH会（）

A降低B升高C不变D不能确定

11、接种工具灭菌常采用　（　　）

A灼烧　　　B高压　　　　C过滤　　　D熏蒸

12、下列哪种激素不属于生长素类

AIAA　BIBA　C6-BA　DNAA

13、能打破种子休眠，促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：

AGA；

BIAA；

CNAA；

DZt

14、下列不属于活性炭在组织培养中作用的是_________。

A吸附有毒物质；

B减少褐变，防止玻璃化；

C创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长；

D增加培养基中的养分；

15、高压蒸汽灭菌法一般要求压强为______

A0.5MpaB0.7MpaC1.05MpaD2.5Mpa

16、过滤灭菌时，通过孔径大小为______的生物滤膜可达到灭菌的目的.

A0.25～0.45umB0.5～0.7umC0.7～0.8umD0.8～1.0um

17、手消毒所用酒精浓度为______

A50%B75%C90%D95%

18、培养室的相对湿度应保持在_______

A40%～50%B50%～60%C70%～80%D80%～90%

19、NAA属于_______

A细胞分裂素类B生长素类C赤霉素D脱落酸

20、高压蒸汽灭菌法一般要求温度为________

A121℃B160℃C200℃D80℃

21、酒精灯中的酒精是________

A70%B75%C80%D95%

22、IAA属于_________

23、CM指_______

A椰乳B酵母提取物C番茄汁D香蕉泥

24、下列不属于消毒剂的是_________

A酒精B生汞C次氯酸钠D吐温

25、兰花的组织培养是通过______的增殖与分化来快繁的.

A叶片B茎段C芽D原球茎

26、马铃薯在有昼夜温差的培养条件下能在试管内形成______

A微型薯B气生根C根D花

27、毛白杨一般采用_________作为外植体。

A叶片B休眠芽C茎段D花

28、对于花药培养和花粉培养，下列说法正确的是（）

A花药培养属器官培养，花粉培养属细胞培养

B花药培养属细胞培养，花粉培养属器官培养

C两者都属于器官培养D两者都属于细胞培养

29、下列实验中可能获得单倍体植株的是_________。

A小麦的茎尖培养；

B番茄花药培养；

C玉米胚乳培养；

D玉米花粉培养

30、下列实验中可能获得三倍体植株的是_________。

四、判断题（对的画"

√"

；

错题画"

×

"

。

每题1分，共40分）

1、培养基进行湿热灭菌时可以不必排放冷空气。

2、蔗糖是植物组织培养常用的糖类。

3、一般来说，光照强度较强，幼苗容易徒长，而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。

4、在配制NAA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。

5、环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分，湿度过高时，易引起棉塞长霉，造成污染。

6、一般的说，PH值高于6.5时，培养基全变硬；

低于5时，琼脂不能很好地凝固。

7、在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol的HCl溶解，再加蒸馏水定容。

8、用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大，消毒效果越好。

9、在MS的培养基成分中，MgSO4.7H2O属于微量元素。

10、酒精棉球所用酒精的浓度为95%。

11、试管苗的驯化时不能打开封口材料。

12、幼嫩叶与成熟叶片消毒时间不同　　

13、一般培养基经过高压灭菌后，pH会向碱性方向移动。

14、选取外植体时，最好在阴雨天到田间取材，因为雨水将植株上的尘土已经冲掉。

15、琼脂浓度高时，易引起玻璃化现象。

16、对易褐变的材料可以通过添加抗氧化剂或活性炭等方法减轻醌类物质对培养物的毒害作用

17、培养架每层的光照条件都是一样的。

18、如果做到接种室空间无菌，也可以不按接种操作规程操作。

19、一般将微量元素母液均配制成10倍，在配制培养基时，使用量为10ml/L。

20、培养基中的铁盐，常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物，以防在pH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。

21、新购置的玻璃器皿或多或少都含有游离的碱性物质，使用前要先用1%稀HCL浸泡一夜，再用肥皂水洗净。

22、有机添加物是培养基必需的。

23、当母液中出现沉淀或霉菌时，还可继续使用。

24、外植体常用消毒剂有酒精和氯化汞。

25、分装培养基时，培养基沾到瓶口也没什么影响。

26、已污染的玻璃器皿，可直接用清水冲洗。

27、肌醇能帮助活性物质发挥作用。

28、褐变只包括酶促褐变。

29、高压灭菌结束后，压力还很大时就可打开锅盖。

30、配好的母液最好放在2～4℃冰箱中。

31、植物生长调节物质是培养基中不可缺少的关键物质。

32、茎尖培养时接种成活率与茎尖大小成反比，脱毒效果与茎尖大小成反比　　

33、热处理脱毒的基本原理是利用病毒对热不稳定，在高于常温下，即钝化失活。

34、热处理脱毒是高温将病毒杀死。

35、胚培养可用来快速测定种子生活力。

36、每个原生质体都含有该个体的全部遗传信息。

37、胚培养不能用来打破种子休眠。

38、试管苗移栽时，为了提高成活率，可以将栽培基质进行灭菌处理。

39、组织培养为园艺植物育种提供了一个很好的途径。

40、自发融合是人们所期望的。

五、简答题（每题5分，共100分）

1、NAA的中文名称是什么？

有何作用和特点？

2、培养基一般包括哪些基本成分?

其作用是什么？

3、简述外植体消毒的一般步骤。

4、如何进行无菌接种操作?

5、MS培养基的配制过程?

6、高压蒸汽灭菌的方法?

7、进行植物组织培养一般包括哪些流程？

8、简述组织培养实验室的应具备哪些分室？

9、选择外植体时，应注意哪些方面？

10、植物生长物质如何调控外植体形态发生？

11、说明母液配制的一般流程？

12、说明培养基配制的一般流程？

13、茎尖培养脱毒的原理?

14、热处理脱毒的原理?

15、植物病毒的鉴定方法?

16、胚培养在科学研究及生产实践中有哪些应用？

17、结合花粉培养，简述看护培养法。

18、试比较花药培养与花粉培养的异同。

19、怎样进行花药培养?

20、条件培养法的具体做法?

六、论述题（每题15分，共120分）

1、组织培养在农业中的应用?

2、请你设计一个组培实验室，都需要哪些仪器设备，说明你设计组培实验室的各分室及其所需仪器设备的作用。

3、如何减轻植物组织培养中试管苗玻璃化现象？

4、试管苗有何特点？

如何提高试管苗的移栽成活率？

5、为什么在植物组织培养中要应用植物生长物质？

常用的植物生长物质有哪几类？

在各类中，常用的主要有哪些？

如何利用激素相对浓度（比例高低）控制培养材料的形态建成？

6、褐变产生的原因及防止措施?

（要点）

7、怎样进行试管苗的驯化.移栽?

8、请论述驱蚊草的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程。

植物组织培养试题参考答案：

植物的体细胞，在适当的条件下，具有不断分裂和繁殖，发育成完整植株的潜在能力。

由活植物体上切取下来的以进行培养的那部分组织或器官。

是指在无菌条件下，将离体的植物器官（根、茎、叶、花、果实等）、组织（形成层、花药组织、皮层、胚乳等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体（即外植体explant），培养在人工配制的培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其长成完整的植株。

成熟细胞或分化细胞转变为分生状态的过程。

由形成的愈伤组织再形成完整的植株过程叫再分化。

在植物组织培养中，指在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。

7、玻璃化”现象:

即试管苗生长异常，叶，嫩梢呈透明或半透明的水浸状，整株矮小肿胀，失绿，叶片皱缩脆弱易碎，是一种生理失调或生理病变现象。

是指用来第一次接种外植体的培养基。

继初代培养以后的培养过程。

指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。

欲配制液的浓缩液

包括温汤浸渍处理和热空气处理两种方法，对病毒种类进行钝化或抑制的方法。

是利用病毒在其它植物上产生的枯斑鉴别病毒种类的方法。

植物的根、茎、叶、花器官和幼小的果实无菌培养。

指植物细胞中除去细胞壁的裸露部分。

1、根、NAA、芽、6-BA

2、3，5

3、琼脂

4、70%酒精，氯化汞，次氯酸钠

5、玻璃化，褐化，污染

6、8，0.8

7、IAA，IBA，NAA

8、干热灭菌高压蒸汽灭菌灼烧灭菌

9、高温高压灭菌过滤灭菌

10、细菌、真菌

11、器官、组织、细胞、去除细胞壁的原生质体

12、吸收能力

13、初代培养、继代培养

14、NaOH、HCL、5.6~6.0

15、活性炭、无选择性

16、液体培养基，固体培养基，高压湿热灭菌

17、变硬，不能很好地凝固

18、固体，液体

19、降低

20、紫外灯20

21、植物细胞计数

22、碳源渗透压

23、固化

24、灼烧，高压蒸汽灭菌

25、正比，反比

26、高温钝化，组织培养

27、普通茎尖，微茎尖培养

28、器官，细胞，单倍体植株

29、自然释放法研磨过滤收集法剖裂释放法

1、A2、A3、B4、C5、A6、B7、A8、B9、C10、A

11、A12、C13、A14、D15、C16、A17、B18、C19、B

20、A21、D22、B23、A24、D25、D26、A27、B28、A29、D

30、C

1、X2、√3、X4、X5、√6、√7、√8、X9、X10、×

　11、×

12、√　13、×

14、×

15、×

16、√17、×

　18、×

　19、×

20、√

21、√22、×

23、×

24、√25、×

26、×

27、√28、×

29、×

30、√

31、√32、×

　33、√34、×

　35、√36、√37、×

38、√39、√40、×

萘乙酸，促进细胞和器官的伸长，与细胞分裂素配合调节组织培养的发展方向，促进生根。

（1）水，水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。

它是生命活动过程中不可缺少的物质。

（2）无机元素，植物必需营养元素可组成结构物质，也可是具有生理活性的物质，如酶、辅酶以及作为酶的活化剂，参与活跃的新陈代谢。

（3）有机化合物，能源和活性物质

（4）植物激素，调节植物各阶段的生长

（5）培养材料的支持物，固化剂

外植体取材（1分）→自来水冲洗（1分）→70％酒精表面消毒20～60s（1分）→无菌水冲洗→消毒剂（0.1％升汞或2～3％次氯酸钠）消毒处理8～10min或25～35min（1分）→无菌水充分洗净（1分）→备用

①接种前，应打开紫外灯照射20分钟

②接种时，用酒精棉认真擦洗台面和手指及培养瓶，接种用具要经常用酒精灯火焰灼烧

③接种前后要灼烧瓶口，夹取培养物时力度要适宜，培养物不能碰到瓶口

④接种后在酒精灯上灼烧瓶口和封口膜，迅速封口.

（1）在容器中加入一定量的水，加入母液

（2）加入蔗糖

（3）蔗糖溶解后，加水定容

（4）调节pH值

（5）加入琼脂，并加热溶解

（6）培养基分装

（7）封口

（8）灭菌

（1）灭菌前检查一下锅底的水

（2）排气

（3）灭菌时压力为1.05，温度为121℃

（4）灭菌后，切断电源，压力接近0时，打开放气阀，排出空气后，即可打开锅盖，取出培养基

外植体的采集与处理；

培养基的配制；

无菌培养物的建立；

诱导培养；

继代增殖培养；

生根培养；

驯化移栽等。

洗涤室、准备室、接种室、培养室等

答题要点：

选择良好的种质；

选择健壮的植株；

选择最适的时期；

选择适宜的大小。

答案要点：

在植物组织培养过程中，常用的植物激素有生长素类和细胞分裂素类，在高生长素（如使用高浓度2，4—D）时能促进外植体的脱分化，在生长素/细胞分裂素比值较高时，促进不定根的发生，比值较低时促进不定芽的发生。

母液配制流程图

确定培养基配方——称量——溶解——定容——母液分装——贴标签——冰箱保存。

固体培养基制备流程图

确定培养基配方——称取蔗糖和琼脂——移母液——定容——培养基熬制——调PH——定容——分装——扎　口——灭菌。

由于病毒在感染植株上分布不一致，即老叶片及成熟的组织和器官病毒含量较高，而幼嫩的及未成熟的组织和器官病毒含量较低，生长点（0.1-1.0mm区域）则几乎不含或含病毒很少.这是因为病毒增殖运输速度与茎尖细胞分裂生长速度不同，病毒向上运输速度慢，而分生组织细胞繁殖快，这样结果就使茎尖区域部分的细胞没有病毒.

答:

热处理之所以能去除病毒，主要是利用某些病毒受热以后的不稳定性，而使病毒钝化，失去活性.这是因为病毒和植物细胞对高温的忍耐性不同，高温可延缓病毒扩散速度和抑制其增殖，不能生成或生成很少，而破坏却日趋严重，以致病毒浓度不断降低，这样持续一段时间，病毒既自行消失而达到脱毒的目的.

（1）指示植物法

（2）抗血清鉴定法（3）电子显微镜鉴定法（4）酶联免疫测定法

（1）用于胚的挽救远缘杂交是植物育种工作的重要途径之一，单远缘杂交难以成功的一个主要原因就是杂交后的合子胚发育不良，常常表现中途败育。

通过人工胚培养可使之成苗，用于育种。

（2）打破种子休眠胚培养可使休眠的种子提高萌发成苗、缩短育种周期或加速良种繁育。

（3）克服珠心胚的干扰利用幼胚离体培养技术可以排除多胚性植物珠心胚对合子胚的干扰，获得杂种胚，大大提高杂交育种的效率。

（4）诱导胚状体及胚性愈伤组织利用植物的幼胚或其他胚胎组织，在离体培养条下可以产生大量次生胚状体，从而用于快速繁殖。

（5）种子生活力的快速测定木本植物经层积和未层积处理的种胚离体培养条件的萌发速率一致。

Sharp等（1972）建立一种看护培养法，从培养的番茄形成了细胞无性繁殖系。

做法是：

将滤纸片放置在完整花药的上面，将花粉放置在滤纸片上。

花药培养是器官培养，花粉培养属细胞培养，但二者培养目的是一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成单倍体植株。

答:

在合适的植株上选定花蕾后，用一种适当的灭菌剂进行表面消毒，用无菌水冲洗三.四次，然后在无菌条件下，将花药连同花丝一起取出，置于1个无菌的培养皿中，取其中1个花药在醋酸洋红中镜检，确定花粉的发育时期，若发现符合要求，把其余雄蕊上的花药轻轻地从花丝上摘下，水平地放在培养基上进行培养.

在合成培养基中加入失活的花药提取物，然后接入花粉进行培养.首先将花粉接种在合适的培养

基上培养一定时间（如1周），然后将这些花药取出浸泡在沸水中杀死细胞，用研钵研碎，倒入离心管离心，上清液即为花药提取物.提取液过滤灭菌后，加入培养基中，在接种花粉进行培养.由于失活花药的提取物中含有促进花粉发育的物质，有利于花粉培养成功.

⑴在植物育种上的应用

⑵在植物脱毒和离体快繁上的应用

⑶在次生代谢产物生产上的应用

⑷在植物种质资源保存和交换上的应用

⑸在遗传，生理，生化，病理等研究上的应用

要点：

一个标准的组织培养实验室应当包括：

洗涤室、准备室、无菌室（接种）、培养室等。

玻璃器皿，

器械用具

超静工作台，

解剖镜，镊子类，

剪刀类，

解剖刀，

大型工作台，

药品柜

普通冰箱

电子分析天平和托盘天平

电炉或电饭锅

酸度计或pH试纸，

高压灭菌锅

光照培养箱或人工气候箱

带光照调节的培养架，

摇床，液体培养（可选）

在组织培养过程中，经常会发现不定芽丛或者试管苗畸形生长，茎叶呈半透明水渍状，叶片失绿、皱缩，并沿纵向卷曲，脆弱易碎，叶表面完全无蜡质，称之为“玻璃化现象”。

这种“玻璃苗”细胞丧失持水能力，细胞内水分大量外渗，增