希森美康标准操作规程Sysme1000iSOP无乱序Word下载.docx

希森美康标准操作规程Sysme1000iSOP无乱序Word下载.docx

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MONO#

嗜酸性粒细胞数

EO#

嗜碱性粒细胞数

BASO#

红细胞分布宽度－标准差

RDW-SD

根据红细胞直方图算出

红细胞分布宽度－变异系数

RDW-CV

血小板分布宽度

PDW

根据血小板直方图算出

平均血小板体积

MPV

根据血小板直方图和PLT算出

大血小板比率

P-LCR

血小板压积

PCT

2.原理

2.1.鞘流DC检测方法（RBC、PLT、HCT）

在该检测器内，样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。

将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥形室以后，由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。

通过小孔以后，经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。

这样就可以防止该区域的血细胞回流，并防止产生假性血小板脉冲。

鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。

同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔，所以也可防止产生异常血细胞脉冲。

2.2.使用半导体激光器的流式细胞计数方法使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。

使用流式细胞计数法只需很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。

一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。

然后将该样品送入流动池中。

这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。

同时，由于血细胞颗粒成行通过该流动池的中心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。

一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。

前向散射光由光电二极管接收，侧向散射光和侧向荧光则由光电倍增管接收。

光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。

2.2.1.前向散射光和侧向散射光当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。

XS检测前向散射光和侧向散射光，前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。

侧向散射光的强度反映细胞内部（如细胞核的体积大小）的信息。

2.2.2.侧向荧光当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。

随着染色集团浓度的增加，荧光强度也增加。

通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色的信息，XS检测侧向荧光。

2.3.SLS-血红蛋白测定法在稀释的血液中加入溶血素，红细胞中的血红蛋白被释放出来。

血红蛋白在月桂洗硫酸钠的作用下，二价铁转变成三价铁，并与月桂洗硫酸钠结合形成SLS-Hb，SLS-Hb进入血红蛋白检测系统。

测定SLS-Hb在555nm波长下的吸光度值，并通过与加入样品前稀释液的吸光度进行对比进行计算。

2.4.计算（红细胞指数）

红细胞指数（MCV、MCH和MCHC）通过RBC计数（RBC）、Hb浓度（HGB）和红细胞压积（HCT）的值计算出。

计算公式如下：

MCV（fl）＝HCT×

1015RBC/L

MCH（pg）＝HGB（g/L）×

1012RBC/L

MCHC（g/L）＝HGB（g/L）HCT

3.标本准备

用真空采血管（紫色盖头）采集EDTA-K2抗凝的静脉血。

采血后立即与抗凝剂混匀，在试管外壁贴上单据号等病人信息或检验联号后，放置室温立即送检。

穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。

标本在室温下最多保留4小时。

不能在4小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（2℃~8℃）中保存，8小时内有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。

4.试验器材

乳胶手套、试管架

5.仪器

SysmexXS全自动血液分析仪

6.试剂

6.1.稀释液（CELLPACK）

6.1.1.试剂品牌：

Sysmex代码：

PK-30L包装规格：

20L

6.1.2.试剂成份：

氯化钠6.38g/L

硼酸1.00g/L

四硼酸纳0.20g/L

EDTA-K20.20g/L

6.1.3.储存条件：

须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为15~30℃。

6.1.4.使用期限：

在失效期前使用；

开封后的使用期限为60天。

6.1.5.安全事项：

在使用前确认是否有污染或颜色变化，一经发现，请速更换。

如出现冻结现象，将其解冻，混匀后使用。

6.1.6.注意事项：

注意防尘。

6.2.白细胞分类溶血素（STROMATOLYSER-4DL）

6.2.1.试剂品牌：

FFD-200A包装规格：

5L

6.2.2.试剂成份：

非离子表面活性剂0.18%

有机季铵盐0.08%

6.2.3.储存条件：

须存储于干净的环境中，适宜温度为5~30℃。

6.2.4.使用期限：

6.2.5.安全事项：

避免和眼睛、皮肤接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。

6.2.6.注意事项：

在试剂使用前须确认是否有污染或颜色的变化，一经发现，须速更换。

若试剂出现冻结现象，用前将其解冻充分混匀后使用。

6.3.白细胞分类染液（STROMATOLYSER-4DS）

6.3.1.试剂品牌：

FFS-800A包装规格：

42ml×

3袋

6.3.2.试剂成份：

聚次甲基染料0.002%

甲醇3.0%

1，2-亚乙基二醇96.9%

6.3.3.储存条件：

须存储于干净的环境中，避光，适宜温度为2~35℃。

6.3.4.使用期限：

6.3.5.安全事项：

6.3.6.注意事项：

若试剂有任何污损、浑浊、不稳定或颜色变化的迹象，须更换。

但避免冻结。

6.4.血红蛋白溶血素（SULFOLYSER）

6.4.1.试剂品牌：

SLS-220A包装规格：

6.4.2.试剂成份：

月桂洗硫酸钠1.7g/L

6.4.3.储存条件：

须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为5~30℃。

6.4.4.使用期限：

6.4.5.安全事项：

6.4.6.注意事项：

若试剂有污染或颜色的变化，更换试剂。

如出现冻结现象，将其解冻、混匀后使用。

6.5.清洁剂（CELLCLEAN）

6.5.1.试剂品牌：

CL-50包装规格：

50ml

6.5.2.试剂成份：

次氯酸钠（有效氯浓度为5%）

6.5.3.储存条件：

须存储于干净的环境中，防止阳光直射，适宜温度为1~30℃。

6.5.4.使用期限：

在失效期前使用。

6.5.5.安全事项：

本品为强碱性洗涤剂，避免和眼睛、皮肤、衣物接触，一旦接触，用大量清水冲洗，并适当考虑必要的医疗措施。

6.5.6.注意事项：

若试剂发生凝固，须替换。

6．6．试剂的使用：

以上所有试剂每瓶试剂开封后应注明启用日期、失效期（开瓶后2个月，或有效期内）并附签名。

7.校准

7.1.校准品商品名称：

SCS-1000

7.1.1.产品概要：

SCS-1000校准品用于WBC、RBC、HGB、HCT/MCV及PLT等参数校准。

（SCS-1000产品可溯源到ICSH的国际参考方法）

7.1.2.配方：

SCS-1000校准品由人体红细胞、人体白细胞、血小板成份和抗菌剂及类血浆水基缓冲液组成。

7.1.3.警告：

本产品的人体来源材料均经美国食品药品管理局（FDA）指定的技术检测，肝炎表面抗原、丙肝病毒（HCV）及HIV1、HIV2抗体结果均为阴性。

但是，目前没有任何检测能够保证不存在这些血液感染性病原体。

操作时的预防措施必须与人血操作相同。

7.1.4.存储：

SCS-1000瓶应垂直保存在2~8℃，避免冰冻。

为开封的产品在标签所注明的有效期内稳定。

开封后必须4小时内使用。

如未用完，应废弃剩余部分。

7.1.5.产品变质迹象：

上清液内有轻微溶血是正常现象。

温度超出范围可导致严重溶血，校准品平均值超出测试极限，并且实验室内质控历史数据和室间质控数据表示良好的结果时，可视为产品损坏迹象。

应更换校准品，重新校准。

7.1.6.局限性：

7.1.6.1.SCS-1000校准品用于开放、全血分析模式。

封闭模式或预稀释模式的校准至少需要10个正常新鲜血样品进行，并对每个血样品分析2次。

7.1.6.2.如果室温超过30℃，请不要进行校准。

7.1.6.3.在校准前至少提前30分钟打开仪器电源。

7.2.校准前检查：

7.2.1.确认SCS-1000校准品瓶上批号和有效期于靶值表一致，没有过期。

7.2.2.确认是否按厂家建议进行仪器保养。

尽可能不要再进行保养或试剂更换的当天进行校准或校准校验。

7.2.3.浏览最近的质控数据，确保分析仪性能稳定。

7.2.4.在仪器上登记试剂的批号和有效期。

7.2.5.进行自动清洗，确认空白表示没有超出规定范围。

7.3.校准准备：

请严格遵守以下步骤，这对于保证SCS-1000校准品的性能正确非常重要。

从冰箱或包装取出1瓶SCS-1000，放置30分钟使其温度升至室温（18-25℃）。

保持瓶子直立的状态将其放在双手掌中轻轻滚动20秒，然后将其颠倒后再滚动20秒以上。

轻轻来回倒转12次使其混合均匀，确保所有细胞都已经悬浮起来。

进行分析前在平面上静置瓶子15秒，使泡沫散去。

7.4.校准步骤：

注意：

SCS-1000的分析必须在开放模式进行，此时仪器设定为维修程序“特殊模式”菜单的“质控血模式”。

使用质控血模式可防止出现WBC通道错误。

关于进入维修程序的方法，请咨询技术服务代表。

7.4.1.在开放模式下连续进行6次分析。

在分析当中不要混匀校准品。

7.4.2.次分析结束后，使用洁净无屑的纸巾或纱布拭净瓶子及瓶盖螺纹，之后盖上瓶盖。

7.5.平均值的计算及校核数据

7.5.1.排除第1次分析结果。

7.5.2.计算其余5次分析结果的平均值，确认各参数的平均值都在可接受极限范围内。

7.5.3.如果某个参数的平均值超出了可接受极限范围，并内部质控和/或室间质控的结果也显示出类似偏差，表示需要重新校准分析仪。

7.6.计算新的校准设定值

校准设定值的修改是非常关键的操作，只能由Sysmex现场技术服务代表进行。

通常，只有在更换了可能影响仪器计数校准的特定部件（旋转阀、吸样管、泵、定量器模块等）时才进行计数校准。

7.7.校准频率：

每年校准2次，上半年一次下半年一次（用SCS-1000进行校准，由工程师进行操作）。

7.8.验证：

校准后及时进行验证，内容包括：

精密度、线性、校准前后病人标本结果比对、新鲜血close和open进样模式结果比对、质控、白细胞分类手工和仪器分类方式的比对，由实验室操作人员完成。

7.8.1.精密度：

取两个不同值标本，每份连续测11次结果，去除每份第一次结果进行统计。

要求符合表2的精密度要求。

7.8.2.线性：

由医院收集一份接近预期上限的高值全血样本（H），分别按100%、80%、60%、

40%、20%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值。

将实测值与理论值作比较（偏离应小于10%），计算y=ax+b，验证线性范围。

7.8.3.每次校准完后，即取5份样本做OPEN和CLOSE两种进样方式的比对，比对各指标的CV%应符合下列表2的CV%值，为合格。

表2.精密度和比对要求

项目

比对要求CV%

精密度要求CV%

RBC、HB、浮动均值

B±

5%

2%

7%

10%

分类

查血常规分类Rü

mke表

7.8.4.每次校准完后立即做质控比对，质控应在控。

7.8.5.每次校准后及时做白细胞分类手工和仪器分类方式的比对，选取高、中、低值各两份样本，制备血片染色镜检并进行手工分类比对结果查Rü

mke表（最后页）。

7.9.校准不能通过时需重新校准直至通过，记录，并由厂家出校准报告。

8.操作步骤

8.1.开机后先做质控，质控通过后进行样本检测。

8.2.标本验收合格,经接收标号打印XS样本分配单,待检。

8.3.标本检测：

点击“手动”按钮，出现“手工样本号”对话框，在“手工样本号”对话框输入样本号，选择分析模式“CBC”或“CBC+DIFF”，样本预稀释模式“是”或“否”。

点击确认，混匀样本，按“开始”键开始分析样本。

分析结束后在“浏览器”下的“主屏”界面，观看结果、直方图和散点图，判断是否需要复片。

8.4.操作中注意个人安全，如标本需打开盖子，应戴好防护镜口罩或在有机玻璃挡板后打开。

8.5.每日保养：

每日关机。

8.5.1.正常开机、压缩机防逆流瓶液体检查、背景检测通过、温度报警、工作时间（h）、使用情况、关机正常记录在XS使用维护记录。

8.5.2.关机程序：

分析完毕，屏幕显示“Ready”字样，READYLED绿灯亮时，按[关机]键。

将CELLCLEAN放入手动移液针上，按OK开关。

在READYLED灯灭，清洗结束后关闭主机电源和IPU软件。

8.6.月保养或需要时进行的维护（由工程师进行）

8.6.1.清洗冲洗块。

8.6.2.清洗穿刺取样器托盘。

8.6.3.去除光检测器盒中流动池内的空泡。

8.6.4.清洗光检测器盒中的流动池。

8.6.5.激光单元外观检查。

9.质控

9.1.质控品（4个）：

9.1.1.质控品品牌：

XX市临检中心（1个）、Sysmex（高、中、低值3个水平e-CHECK）

9.1.2.储存条件：

2℃～8℃（每日须复核一次冰箱温度）。

9.1.3.使用期限：

临检中心质控开瓶后XX天；

Sysmexe-CHECK质控开瓶后14天。

9.1.4.质控品开启后应注明开启日期，失效期并签名。

9.2.质控频率：

每天开机后在标本检测前进行一次质控品的分析（4个质控品均做）。

9.2.1.质控频度验证每年一次，由岗位操作员完成。

9.2.2.质控操作：

从冰箱中取出e-CHECK，使用前检查有效期及状况（如极度溶血或失效，应及时更换）,在室温环境下（18～30℃）静置15分钟。

保持瓶子直立状态在双掌中轻轻滚动20次，将其颠倒再滚动20次，再将质控品上下颠倒20次混匀至红细胞完全混合，在质控模式下进行检测。

9.3.质控期望值：

至少满足2个e-CHECK在靶值±

极限值内，记录质控结果后开始做标本。

9.4.失控时应采取的措施：

质控结果超出期望值时，需查找原因，检查质控品是否在有效期内，过期或近过期需更换新的质控品,检查试剂情况，是否需更换。

再检查仪器的各项参数是否在控，如各项检查操作后质控仍失控则联系工程师，责任人需通知组长。

与此同时联系急症病人相关医生，如为急诊标本及时送往门急诊化验室检测。

直至质控通过，开始做标本。

9.5.每次失控必须分析原因，记录处理过程并签名。

失控记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。

9.6.更换批号后靶值设定：

取开始10次QC结果，计算均值，为靶值，靶值应落在厂商提供的范围内，以累计6个月CV%均值（或近两个月CV%较大值），通过均值乘以CV%=1SD,质控范围设定为2.7SD。

由组长或组长指定人员负责计算。

9.7.定期打印质控曲线，曲线上注明使用质控品的批号和效期，并签上责任人姓名。

9.8.所有室内质控打印及记录夹入指定的文件夹内保存，保存期为二年。

9.9.每日由操作员记录质控状况与X-barm记录于记录本。

10.方法学特征

10.1.全血模式线性：

WBC：

0.41〜94.29×

109/L

RBC：

0.23〜7.66×

1012/L

HGB：

6.93〜231.91g/L

PLT：

9.28〜534×

109/L

WBC、PLT大于或小于上述范围时，可用手工法验证，以手工计数的结果报告。

RBC、HGB大于或小于上述范围时，以>

或<

限性值报告，如HGB<

6.93g/L。

10.2.干扰：

下列列出的异常样品条件会影响检测结果。

10.2.1.WBC：

标本存在溶血抵抗红细胞、冷凝集、血小板聚集、有核红细胞和冷球蛋白时，白细胞计数可能会假性增加。

10.2.2.RBC：

标本存在冷凝集、小细胞、红细胞碎片时，红细胞计数可能会假性减少；

当标本的白细胞计数增加（>

100.000/µ

l），红细胞计数可能假性增加。

10.2.3.HGB：

标本的白细胞计数增加（>

l）、脂血症、存在异常蛋白，血红蛋白可能假性增加。

10.2.4.HCT：

标本存在冷凝集、白细胞碎片、球形红细胞增多症，红细胞压积分析可能假性减少；

l），红细胞压积分析可能假性增加。

10.2.5.PLT：

标本存在血小板聚集、巨幼细胞，红细胞计数可能假性减少；

标本存在小红细胞，血小板计数可能假性增加。

10.2.6.处理：

注意仪器提示及白细胞计数增加（>

l）的标本.当标本存在小红细胞、红细胞碎片、有核红细胞时，可通过镜检血片确定红细胞及血小板形态,手工计数有核红细胞、血小板、白细胞，报告手工血小板、白细胞结果等并提示临床注意信息。

10.2.7.通过复做、核对、肉眼观察、与临床医生联系，排除各方面可能的影响干扰,来纠正每个试验项目的明显分析错误和干扰。

11.结果的报告

SysmexXS检测的24项参数的结果自动传入计算机中，在血液常规报告单（红色）上以下列方式报告（表6）。

表6.SysmexXS各项参数的报告方式

缩写

参考范围

×

.×

g/L

红细胞压积

%

红细胞平均体积

fl

红细胞平均血红蛋白量

pg

红细胞平均血红蛋白浓度

中性粒细胞%

NEU%

淋巴细胞%

LYM%

单核细胞%

MON%

嗜酸性细胞%

EOS%

嗜碱性细胞%

中性粒细胞#

淋巴细胞#

LYM#

单核细胞#

MON#

嗜酸性细胞#

EOS#

嗜碱性细胞#

12.计算

XS所检测的参数不须计算。

每月需验证一次RBC浮动均值并记录计算结果。

13.参考范围

SysmexXS各检测参数的参考范围见表3。

表3.XS全自动血液分析仪各检验参数参考范围（成人）

单位

（4.5~11）

（4.0~5.9）

（120~160）

36~53

80~100

26~34

320~360

100~300

45.0~70.0

20.0~45.0

3.0~8.0

0.5~5.0

0.0~1.0

红细胞分布宽度

10.0~15.0

9.0~18.1

9.4~13.5

14.临床危急值：

如遇危急值，应上报临床科室，并记录在危急值报告记录表（电话上报时接听者需复述）。

具体的危急值指标如下：

WBC<

1.0×

109/L或WBC>

40.0×

109/L。

PLT<

20×

109/L或PLT>

600×

Hb<

50g/L或Hb>

180g/L

15.临床意义

15.1.白细胞

增多：

15.1.1.中性粒细胞：

见于急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。

15.1.2.嗜酸性粒细胞：

见于变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、手术后、烧伤等。

15.1.3.嗜碱性粒细胞：

慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。

15.1.4.淋巴细胞：

见于百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。

15.1.5.单核细胞：

见于结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病恢复期等。

减少：

15.1.6.中性粒细胞：

见于伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再生障碍性贫血、粒细胞