TCT联合HPV检测筛查产后妇女宫颈病变结果分析Word文档下载推荐.docx
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宫颈癌人乳头瘤病毒液基细胞学
子宫颈癌是妇女最常见的恶性生殖道肿瘤,占所有肿瘤的12%。
近年来,我国大力开展三级预防工作,但宫颈癌的发病率仍维持在一定的水平,因此“早发现,早干预,早治疗,早预防”依然是目前筛查高风险人群的当务之急。
随着对宫颈癌病因学的研究深入,HPVDNA检测受到越来越多的关注,渐渐成为宫颈疾病筛查和诊断中的一项重要辅助手段。
于是笔者对2008年7月~2009年12月绍兴市妇幼保健院产后6个月妇女进行液基细胞学(TCT)联合人乳头瘤病毒(HPV-DNA)检测筛查宫颈疾病的结果进行回顾性分析,并对有关问题进行探讨。
一、资料和方法
(一)研究对象:
选择2008年7月~2009年12月在我院常规进行宫颈液基细胞学(TCT)和人乳头瘤病毒(HPV-DNA)检测的产后6个月妇女1630例,年龄21~42岁。
其中经阴道镜组织学检查确诊CIN8例(CINⅠ-Ⅱ级3例,CINⅡ4例,CINⅢ级1例),宫颈癌2例。
(二)标本采集:
⑴HPV-DNA检测采样:
充分暴露宫颈,将宫颈刷置于宫颈口,轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5圈,慢慢取出宫颈刷,将其放入标有被检测者编码的取样管中,取样管内已有专用细胞保存液,拧紧瓶盖。
4℃冰箱保存待用。
⑵液基细胞学检测采样:
用无菌干棉球轻轻拭去宫颈表面黏液,再用宫颈刷插入宫颈管内约1CM,保持适当压力,使宫颈刷呈扇形顺时针旋转5周,取出宫颈刷的刷头,放入装有细胞保存液的小瓶中送检病理科。
(三)仪器及试剂:
⑴人乳头状瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒,以凯普医用核酸分子快速杂交仪为平台,利用导流杂交的原理,在已经固定好核酸探针的低密度基因芯片膜上,可一次性快速检测占中国人群HPV感染95%的21种HPV亚型的基因分型。
21种亚型包括13种高危亚型,5种低危亚型,和3种中国人群常见亚型。
⑵新柏氏液基薄层细胞学制片法(TCT)标本进行离心后,丢弃标本中上清液(粘液、血液坏死碎片),留取试管底部的上皮细胞团制成细胞悬液,涂片、干燥、固定、染色、封片,并于高倍镜下判读。
(四)诊断标准:
⑴细胞学诊断液基细胞学诊断标准采用2001年修订的TBS诊断标准:
未见上皮内病变或癌变(NILM);
不典型鳞状细胞(ASC)包括未明确意义的不典型鳞状上皮细胞(ASC-US)和未能除外高度上皮内病变的不典型鳞状上皮细胞(ASC-H)两种类型;
低度鳞状上皮内病变(LSIL);
④高度鳞状上皮内病变(HSIL);
⑤鳞状细胞癌(SCC)和腺癌。
⑵病理学诊断根据宫颈有无病变及病变程度分为无上皮内病变或恶性变(NILM),LSIL包括CINⅠ,HSIL包括CINⅡ级和或CINⅢ级。
二、结果
(一)HPV-DNA总感染率:
1630例标本中,HPV阳性119例,阳性率为7.30%,检测到基因芯片内21种亚型中的15个亚型,其中总检出感染亚型次数为127,单亚型感染标本为113例,同时感染2个亚型的标本4例,同时感染3个亚型的标本2例。
⑴单亚型感染共检出113例,其中高危亚型感染94例,占所有感染83.16%,为主要感染亚型。
主要集中在20~25岁,31~35岁和41~45岁人群中,其感染率分别为9.88%、9.27%和33.3%,见表1。
表1:
HPV单亚型感染各年龄层分布
人数
感染率%
感染HPV亚型
合计高危型(例)低危型(例)中国人常见型(例)
20~4053026229.88
26~9075545466.06
31~2592420319.27
36~5632015.36
41~3110033.3
合计1630113949107.31
(2)21种HPV基因亚型多重感染情况在119例阳性样本中,单一HPV感染病例为113例,占总感染病例94.96%,为主要感染类型;
多重感染例数为6例,占5.04%,分别是双重感染4例与三重感染2例,年龄分布均在30岁以下,见表2。
表2:
HPV多重感染各年龄层分布情况
年龄(岁)
HPV-DNA单一及多重感染
合计单一双重三重
<
26405333021
26~907585521
31~259242400
36~563300
41~31100
合计163011911342
(二)液基细胞学检查结果:
在对1630例产后6个月妇女的细胞学检查中,发现有21例为宫颈细胞学异常,进一步做阴道镜检查及宫颈活检,其中10例病理学检查确诊异常,符合率达47.62%,其中CINⅠ-Ⅱ级3例,CINⅡ级4例,CINⅢ级1例,鳞状细胞癌1例,中分化腺癌1例;
年龄主要集中在26~30岁中;
但2例宫颈癌均在31~35岁中,见表3。
表3液基细胞学与病理检查异常各年龄层分布情况
年龄(岁)人数
TCT异常病检异常
2640571
26~907107
31~25942
36~5600
41~300
合计16302110
(三)液基细胞学异常结合HPV异常:
10例病理学检查确诊异常患者,均有HPV感染,HPV感染率达100%,感染亚型主要分布在16、18、33、58这四类高危亚型中;
年龄分布在25~33岁;
而11例阴道镜检查结果阴性患者,有3例患者有HPV感染,1例为HPV高危亚型感染,1例为HPV低危亚型感染,1例为三重感染;
这3例年龄分别为28岁,25岁和21岁。
三、讨论
人类乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌的主要危险因素。
经过病毒学家,流行病学家及临床研究者的一致努力,阐明了特定类型HPV感染是发生宫颈侵润癌的必要条件,99.7%宫颈癌中发现有HPV-DNA存在。
其中以HPV16,18,45,31等亚型最常见。
[1]根据HPV致病力的大小及不同CIN和宫颈癌组织中HPV感染的分布情况,HPV分为高危型、低危型和中国人常见型。
目前的低危型多导致低度宫颈上皮内瘤变(CINⅠ)及扁平疣类病变,主要有HPV6,11,42,43,44,高危型共13种,包括HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,68,主要导致CINⅡ-Ⅲ及宫颈癌的发生。
中国人群常见亚型包括53,66,CP8304。
本研究通过对1630例产后6个月妇女HPV-DNA检测,发现HPV感染主要以高危亚型居多,感染亚型主要集中在16,18,31,33,52,58,CP8304,感染人群主要集中在20~25岁,31~35岁和41~45岁中,其感染率分别为9.88%、9.27%和33.3%。
在41~45岁年龄段中,感染率高达33.3%,分析其原因主要与该年龄层已不属于主要分娩人群,参与研究人数只有3人,而其中1人感染HPV,高感染率实属偶然情况。
既往已有研究证实,在普通人群中HPV感染非常普遍,在性行为活跃的年轻女性中尤为常见,感染高峰年龄范围为18~30岁。
在本次研究中,20~25岁人群中HPV感染率达9.88%,高于其他年龄层感染率,该年龄层性行为相对活跃,与理论相符。
大多数研究报道HPV感染多为短暂性,一过性,宫颈HPV感染的自然清除时间在7~12个月左右,只有少部分为持续感染。
所以本研究中,25~30岁年龄层HPV感染率又有所降低。
但当感染细胞继续存活并增生,可发展为癌前病变或宫颈癌。
有文献[2]报道,高危型HPV的持续性或反复感染已被确定为宫颈癌发生的最主要原因。
在本研究中,10例病理学检查确诊异常患者,均有HPV感染,HPV感染率达100%,感染亚型主要分布在16,18,33,58这四类高危亚型中,进一步证实了HPV高危亚型的感染是宫颈癌发生的必要条件。
由于不同亚型HPV之间基本上没有交叉保护抗体,容易造成不同高危型HPV感染或多次感染。
有研究[3]显示单一HPV感染使宫颈癌的患病风险增加19.9倍,而多重HPV感染使该风险增加31.8倍。
在本研究中,多重感染例数仅为6例,占5.04%,其中双重感染4例,三重感染2例。
年龄分布均在30岁以下。
此6例病患中,只有1例为液基细胞学阳性,经过进一步阴道镜检查,为宫颈炎症,未发生宫颈上皮内瘤样病变。
说明本地区HPV感染仍以单纯型为主,且多重感染多发生在性活动活跃人群中,感染多为一过性,并未导致宫颈上皮内瘤样病变。
所以针对HPV阳性,而液基细胞学正常人群,我们通常建议其6~9个月复查HPV-DNA,如发现HPV仍有感染,归为高危人群管理,酌情药物处理,定期复查。
薄层液基细胞学检查技术(TCT)克服了传统巴氏涂片法制片技术的一些缺陷,经系统程序化处理,使黏液、血液、炎性细胞与上皮细胞分离,不仅提供足够量的标本,使不正常的上皮细胞容易被辨认,尤其是对于细胞量少、体积小的鳞状上皮高度病变,提高了其阳性诊断率。
本文资料显示,TCT检测宫颈病变阳性者其阴道镜活检为阳性的符合率为10/21(47.62%)。
表明TCT是门诊筛查子宫颈癌的有效方法。
本文经病理组织学活检确定为阳性的10例患者中,20~25岁1例(10%),26~30岁7例(70%),31~35岁2例(20%),呈现宫颈癌的年轻化倾向。
高危型人乳头瘤病毒感染是宫颈癌和癌变病变宫颈上皮内瘤变(CIN)的主要致病因子,高危型HPV感染若持续存在并增生,最终导致宫颈癌,但该过程较为漫长,约需10~20年时间,因此,通过有效筛查手段,宫颈癌完全可防可控。
据WHO统计,40%的发达国家妇女接受过防癌筛查,他们通过筛查,使宫颈癌得到了有效的控制。
而发展中国家仅为5%,这也是为何发达国家和发展中国家宫颈侵润癌的发病率相差如此悬殊的原因。
在本研究中,针对1630例产后6个月妇女进行宫颈癌的健康筛查,通过HPV-DNA联合液基细胞学检查,HPV-DNA总感染率为7.30%,且感染以高危型居多,多发生在性活跃人群中。
共发现21例细胞学异常患者,其中10例宫颈活检检查异常,且均有HPV感染,HPV感染率达100%,其中2例为宫颈癌患者。
而另外11例阴道镜检查结果阴性患者,只有3例患者有HPV感染,1例为HPV高危亚型感染,1例为HPV低危亚型感染,1例为三重感染,且年龄均在30岁以下,与“HPV多发生在性活跃人群中,且多为短暂性感染,当HPV持续感染,可发展成宫颈癌”这一理论相符合。
因此,HPV-DNA联合液基细胞学检查可成为筛查宫颈癌的有效手段,发现异常病例,可进一步结合阴道镜检查,阻断病程,达到早期诊断,早期治疗的目的。
虽然宫颈癌仍是威胁妇女健康的主要疾病,但这是感染性疾病,是可以预防可以治愈的[4]。
所以,我们要加强女性HPV-DNA检测和液基细胞学检查,不仅了解宫颈细胞变异情况,也了解HPV感染的情况,尤其是感染亚型分布,对于发现HPV高危亚型感染或多重感染患者,不管其细胞学检查是否异常,都应划入高危人群管理,积极控制感染及有效治疗CIN,降低宫颈癌的发生率。
笔者认为此方法具有灵敏度高,特异性好,费用适中,检查痛苦少,有利于防治宫颈癌的发生并了解HPV感染的转归,便于管理随访,不仅适用于产后妇女,也应逐步向大规模的临床筛查推广应用,争取使本地区宫颈癌的发展得到有效的控制。
【参考文献】
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[4]郎景和.中华妇产科杂志,2002,37
(1):
129-131.
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