电泳相关溶液配制Word格式文档下载.docx
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N-N亚甲基双丙烯酰胺
8
纯水
ml
定容至1000
1.将丙烯酰胺和N-N亚甲基双丙烯酰胺置于1L烧杯中。
2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,于40℃左右水浴加热,并用玻璃棒搅拌至完全溶解。
3.加水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。
4.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:
下层有无沉淀,有□、无□;
(Istherefloatingsubstance?
onthesurfaceofthesolution,yes□no□;
onthebottom,yes□no□)
5.于棕色瓶中4℃保存。
备注(Remark):
丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。
10%十二烷基硫酸钠(SDS)
十二烷基硫酸钠(SDS)
20
定容至200
1.将SDS置于烧杯中,加入一定量的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,用水定容至200ml。
2.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:
(Istherefloatingsubstance?
onthebottom,yes□no□)
10%过硫酸铵(APS)
过硫酸铵(APS)
0.1
定容至1
1.将过硫酸铵倒入2ml的离心管中,加1mL去离子水,用漩涡振荡器震荡溶解,贮存于4℃。
10%过硫酸铵溶液在4℃保存可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。
4%分离胶
11.9
5.4
1.5MTris-HCl(pH8.8)
10
10%SDS
μl
200
10%过硫酸铵
TEMED
12
1.按照配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。
TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。
20%分离胶
1.3
13.3
5
1.按照上述配方依次将纯水、30%丙烯酰胺、1.5MTris-HCl(pH8.8)、10%SDS、10%过硫酸铵、TEMED加入100ml的烧杯中,加入搅拌子,用磁力搅拌器搅拌均匀。
5%积层胶
10.2
2.55
1.875
150
15
备注(Remark)TEMED为交联剂,应最后加入,以防胶凝固。
10*电泳液
Trisbase
30
甘氨酸
144
SDS
1.在烧杯中加入一定量的去离子水,依次加入Trisbase、甘氨酸、SDS,加完后用磁力搅拌器搅拌至完全溶解,补加纯水定容至1000ml。
用时用纯水稀释成1*的电泳液。
10*电转液
5.8
29
0.37
甲醇
1.在烧杯中加入一定量的去离子水,依次加入Trisbase、甘氨酸、SDS,加完后用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.加入200ml的甲醇,补加纯水定容至1000ml。
3.观察溶液上层有无漂浮物,有□、无□:
用时用纯水稀释成1*的电转液
封闭液
脱脂奶粉
定容至100
1.将脱脂奶粉加入烧杯中,加入100ml的1*PBS,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
10*TBST
1MTris-HCl(pH7.4)
40
NaCl
17.532
Tween20
1
1.将Tris-HCl、NaCl加入烧杯中,加入一定量水,置于磁力搅拌器上搅拌,再用移液枪(剪枪头)加入Tween20,继续搅拌至完全溶解,用纯水定容至200ml。
1.5MTris-HCl(pH8.8)
36.33
1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.用盐酸调节pH至8.8,定容至200ml。
1MTris-HCl(pH6.8)
24.22
1.将Trisbase加入烧杯中,加入约150ml的水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。
2.用盐酸调节pH至6.8,定容至200ml。
1MTris-HCl(pH7.5)
2.用盐酸调节pH至7.4,定容至200ml。
5*上样缓冲液
1MTris-HCl(pH6.8)
0.6
甘油
2
巯基乙醇
0.5
溴酚蓝
4.4
1.先用少量的水将溴酚蓝溶解后,将1MTris-HCl(pH6.8)、甘油、10%SDS、巯基乙醇、溴酚蓝、纯水依次加入烧杯中,用磁力搅拌器搅拌混匀。
置于-20℃保存。
PBS
KH2PO4
0.27
Na2HPO4
1.42
KCl
0.2
800
1.按配方将KH2PO4、Na2HPO4、NaCl、KCl依次加入烧杯中,用磁力搅拌器搅拌混匀。
用纯水定容至800ml。
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- 电泳 相关 溶液 配制