生物制药学复习题Word文档下载推荐.docx
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7、过饱和溶液的形成方法有蒸发法、温度诱导法、盐析结晶法、有机溶剂结晶
法、
等电点法、微量扩散法、化学反应结晶、共沸蒸馏结晶(八选七)。
8、根据色谱机理,色谱柱分为:
反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过
滤色
谱(或亲和色谱)。
10、透析的方法有:
旋转透析器,平面透析器,连续透析器,浅流透析器。
11、常用的制备型离心机转子有角度转子,水平转子,区带
转
子,垂直转子。
12、克服浓差极化现象的措施有搅拌,震动,错流,切流。
13、供体,受体和载体是重组DNA技术的三大基
本元件
14、写出下列英文缩写的中文名称:
IFN干扰素;
IL-2白介素-2;
TNF肿瘤坏死因子。
15、青霉素属于β-内酰胺类抗生素,它的性质很不稳定,用溶剂萃取法分
离时整个提炼过程应在低温,快速,准确调节pH值下进行。
16、四环类抗生素是一类以四并苯(萘并萘)为母核的一族抗生素;
链霉素是
氨基糖苷类抗生素;
红霉素是分子内含有14元环大环内酯类抗生素。
二、名词解释(每小题3分,共24分)
1、基因药物:
核酸类药物,以遗传物质DNA、RNA为治疗物质基础的药
物(1分),如核酸疫苗、反义药物。
(1分)与基因工程类药物不同,基因工
程药物化学组成上主要是蛋白质或多肽,但基因药物组成上主要为核酸(1分)。
2、尼柯尔斯基方程式:
式中m1、m2、C1、C2分别为树脂上和平衡溶液中A1、A2两种离子的浓度。
Z1、Z2
分别为两种离子的价电数。
K值为“交换常数”。
该方程式表达了离子交换平
衡时,
两种离子与交换剂吸附强弱的数量关系。
当K>
1时表示树脂对A1离子的吸
附力大于
A2离子,反之亦然。
(1分)
3、分级分离:
将分子量相差不大的大分子物质加以分离,如分离血清球蛋白与
白蛋白(2.5分),分级分离应尽量使待分离各物质的K值相差大些,并使分
子量分布不在凝胶分离范围的一侧(0.5分)。
4、干涉RNA(RNAi)RNAinterference,是指在生物体细胞内,dsRNA(1
分)引起同源mRNA的特异性降解(1分),因而抑制相应基因表达的过程。
是一种在生物体内普遍存在的转录后水平的基因沉默,也是抵御外在感染的重
要保护机制。
5、速度区带离心法:
又叫速率区带离心法或分级区带离心法。
离心操作时将样品液置于连接或不连
接线性或非线性密度梯度液上(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等)(1分),控制
离心时间,使具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内分成一系列区
带,达到彼此分离的目的。
(2分)本法适用于分离颗粒大小不同而密度相近或
相同的组分,如DNA与RNA混合物,核蛋白体亚单位及线粒体、溶酶体及
过氧化酶体等。
6、渗透压冲击法:
细胞破碎的一种方法(1分)。
先把细胞放在高渗溶液中,由于渗透压的作用,
细胞内的水分便向外渗出,细胞发生收缩,当达到平衡后,将介质快速稀释或
将细胞转入水或缓冲液中,由于渗透压发生突然变化,胞外的水分迅速渗入胞
内,使细胞快速膨胀而破裂,使产物释放到溶液中(2分)。
7、气泡压力法:
是测定滤膜最大孔径的简易方法(1分)。
气体排除微孔滤膜孔隙中的液体并在
膜表面形成气泡时,须克服液体的表面张力,孔径与气体压力有一定的关系,
采用此原理测定滤膜孔径的方法称气泡压力法。
(2分)
8、DNA疫苗:
属于基因药物中的一种,指使用能够表达抗原的基因本身即核酸制成的疫苗(2
分)。
基因疫苗进入人体后,在人体细胞环境中表达出蛋白质抗原,持续刺激人
体免疫系统产生免疫反应,达到预防疾病的目的(1分)
三、单项选择题(每小题1分,共20分)
1.利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸,第一步是用诱变育种的方法筛选缺
乏哪种酶的腺嘌呤缺陷型菌株,并在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤。
()
A.SAMP合成酶B.SAMP裂解酶C.PRPP转酰胺酶D.IMP
脱氢酶
2、蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的,其前期处理手段多采用下列哪
类的方法。
A.分辨率高B.负载量大C.操作简便D.价廉
3、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质,一般用下列哪种溶液洗脱
A.水B.高盐C.低pHD.高pH
4、凝胶层析中,有时溶质的Kd>
1,其原因是()
A.凝胶排斥B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低
5、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量
()A.羟型阴B.氯型阴C.氢型阳D.钠型阳
6、亲和层析的洗脱过程中,在流动相中加入配基的洗脱方法称作()A.阴
性洗脱B.剧烈洗脱C.竞争洗脱D.非竞争洗脱
7、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()
A.增大B.减小C.先增大,后减小D.先减小,后增大
8、盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是()
A.分辨率高B.变性作用小C.杂质易除D.沉淀易分离
9、“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸
附极性物质()A.极性溶剂B.非极性溶剂C.水D.溶剂
10、能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是()
A.过滤B.萃取C.离子交换D.蒸馏
11、下列哪种方法是由于细胞内冰晶的形成导致细胞破碎的(
)A.真空干燥B.酶解法C.冻融法D.渗透压法
12、红霉素在pH9.8时的分配系数(醋酸丁酯/水)为44.5,若用等体积的
醋酸酯进行单级萃取,则理论收率为()
A.97.8%B.99.32%C.96.5%D.95.9%
13、在高效液相色谱中,下列哪种检测器不适合于在梯度洗脱时使用.()
A.紫外检测器B.荧光检测器C.蒸发光散射检测器示差折光检测器D.
14、某抗生素以醋酸丁酯为流动相进行pH纸层析,酸性条件下比移值大,
碱性条下比移值小,则该抗生素为()
A.弱碱性B.弱酸性C.强碱性D.强酸性
15、环孢菌素A是微生物产生的()
A.HMG-CoA还原酶抑制剂B.β-内酰胺酶抑制剂C.氨基糖苷类抗生
D.免疫抑制剂
16、选用110树脂分离纯化链霉素,交换时pH应为()
A.2~4B.4~6C.6~8D.12~14
17、红霉素以游离分子形式存在时,可用吸附法分离,吸附时发酵液的pH应调
节()A.大于7B.小于7C.等于7D.2~12
18、从四环素发酵液中去除铁离子,可用()
A.草酸酸化B.加黄血盐C.加硫酸锌D.氨水碱化
19、用大肠杆菌作宿主表达重组DNA药物,缺点是()
A.蛋白质表达量低B.生长慢C.产物无糖基修饰D.难以获得工程菌
20、下列药物哪些是重组DNA药物()
A.蛋白质工程药物B.基因药物C.天然生物药物D.半合成生物药物
四、论述题(共26分)
答案:
A:
去血红蛋白(1分)B:
乙醇(1分)C:
氯仿(1分)
D:
丙酮(1分E:
热变性(1分)F:
60-70°
C(1分)G洗脱(1
分)
3、试述双水相萃取及其影响因素。
(6分)
双水相萃取技术(two-aqueousphaseextraction),又称水溶液两相分配技术,它
利用不同的高分子溶液相互混合可产生两相或多相系统,静置平衡后,分成互不相
溶的两个水相,利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法,
称为双水相萃取法。
(3分)影响因素:
成相高聚物浓度-界面张力、成相高聚物的相对分子质量、电
化学分配、疏水反应、pH值、温度。
(3分)
4、基因治疗中常用的病毒与非病毒载体各有哪些?
(7分)
病毒载体是指用具有感染性的病毒作为哺乳动物核苷酸的传递系统。
基因治疗中常用的病毒载体包括:
逆转录病毒(retrovirus,RV),腺病毒(adenovirus,
AV),腺相关病毒(adenoassociatedvirus,AAV),单纯疱疹病毒(herpessimplexvirus,
HSV),痘苗病毒(vacciniavirus,VV)等载体。
(4分)
非病毒载体包括裸露DNA、基因缝合线、脂质体、哺乳动物人工染色体等载体。
(3
中国药科大学生物制药工艺学期末试卷(卷)B
一、填空题(每空分,共分)300.5
、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸,第一步是用诱变育种的方法筛选2
缺乏酶的缺陷型菌株,在发酵培养基中提供亚适量
的;
另外,改变细胞膜对′的透性,选育不敏感5-IMP
的变异株。
、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括,,,3
。
、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中,当4
柱中某位之值下降到蛋白质组分值以下时,它因带pH
者会超过另一组电荷而如果柱中有两种蛋白组分,值较pI
的位点进行。
分,移动至柱下部较
、亲和层析洗脱方法有,,5
、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度,其中影响晶体大小的6
主要因素有,,,。
等。
,和、常用的吸附剂有7
、在萃取过程中被提取的溶液称为,其中欲提取的物质称8
,而用以进行萃取的溶剂称为。
达到萃取平衡后,大部分溶质转移
,而被萃取出溶到萃取剂中,这种含有溶质的萃取剂溶液称为
质以后的料液称为。
、从细胞培养液中提取有效组分时往往需要除去细胞及蛋白质常用的除,,9
去细胞及蛋白质的方法有,,,等。
,,、影响絮凝效果的主要因素有,10
、色谱介质按分离机理分为,,,,11
、基因治疗中常用的非病毒载体有,,和。
12
、四环类抗生素是一类以为母核的一族抗生素;
链霉素是13
元环大环内酯类抗生素类抗生素;
红霉素是分子内含有;
写出青霉素的化学结构通式。
、请列举应用基因药物来治疗肿瘤的几种方案:
,14
,,。
,,
二、名词解释
、酶促半合成人胰岛素:
、亲和膜:
、全排阻:
213
、类分离:
、基因药物:
、容量因子:
、等密度离心法5764
、超滤技术:
、超临界流体萃、生物制品1089
三、单项选择题(每小题分,共分)201
、下面表达系统为原核表达系统的是1
毕赤酵母昆虫细胞动物细胞A.C.E.coliD.B.
、下列药物哪些是基因药物()2
基因工程药物遗传物质为物质基础制造的药物DNAA.B.
天然生物药物半合成生物药物D.C.
、肽合成中,由于顺序合成的需要,必须对暂不参加反应的基团加以保3
护。
在多肽的固相合成中,常用的氨基保护基是()
甲醇D.B.BzA.FmocC.Tos
、蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的,其前期处理手段多采用下4.
列哪类的方法。
负载量大操作简便价廉分辨率高A.C.D.B.
、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度()5
.增大减小先增大,后减小先减小,后增大C.AB.D.
、盐析常数是生物大分子的特征常数,它与下列哪种因素关系密切。
6Ks
.盐浓度盐种类溶质浓度介质pHB.DC.A
、网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质,一般用下列哪种溶液洗脱。
7
水高盐低高D.C.pHA.B.pH
、用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时,吸附量很低,这是因为8
.选错树脂离子竞争偶极排斥解离低D.C.AB.
、凝胶层析中,有时小分子溶质的,其原因是Kd<
19
水合作用凝胶吸附柱床过长流速过低D.B.C.A.
、“类似物容易吸附类似物”的原则一般非极性吸附剂适宜于从下列何10,
种溶剂中吸附非极性物质。
溶剂极性溶剂非极性溶剂三氯甲烷C.D.B.A.
、亲和层析的洗脱过程中,在流动相中减去配基的洗脱方法称作11
阴性洗脱剧烈洗脱正洗脱负洗脱C.A.B.D.
、在萃取液用量相同的条件下,下列哪种萃取方式的理论收率最高12
单级萃取三级错流萃取三级逆流萃取二级逆流萃取D.B.A.C.
、超声波法破碎细胞的主要原理是13
研磨作用空穴的形成脱水机械碰撞A.B.C.D.
、在离心分离过程中若离心机的转速为转分种离心半径为,14/,104000
厘米则相对离心力为(,)
C.8000(g)D.2000(g)A.1789(g)B.4000(g)
、在超滤过程中,主要的推动力是)(15
浓度差电势差压力重力B.D.C.A.
)、环孢菌素是微生物产生的(16A
还原酶抑制剂免疫抑制剂氨基糖苷类抗生素B.C.A.HMG-CoA
大环内酯类抗生素D.
、用大肠杆菌作宿主表达重组药物,缺点是()18DNA
蛋白质表达量低生长慢产物无糖基修饰难以获得工程菌D.B.C.A.
、克拉维酸是微生物产生的()19
还原酶抑制剂β内酰氨酶抑制剂氨基糖苷类抗C.-A.HMG-CoAB.
生素大环内酯类抗生素D.
、如果用大肠杆菌作为宿主细胞,蛋白表达部位为周质,下面哪种细胞20
破碎的方法最佳?
渗透压休克法冻融法匀浆法超声波法B.D.C.A.
四、论述题(共分)20
、由下图,利用给出的两种离子交换剂(,)分离种蛋白质E1E231
(、、),用箭头流程图表示并指出,的类型。
(分)6)E2E1(P3P2P1.
、青霉素为弱酸性抗生素,在水溶液中稳定性较差,且其稳定性随温度3
上升而下降,请写出将该抗生素从发酵液中分离制备的方法,写出选择依
据、主要工艺及操作要点:
(分)7
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