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的最佳精制方法。
结论:
所确定的提取工艺及精制方法具有稳定,安全,高效,且不
破坏有效成分及成本低廉等特点。
关键词:
红景天提取工艺分析
0引言
1
高山红景天是一种景天科红景天属多年生草本植物。
高山红景天含有红景天苷、苷
元(对-酪醇p-Tyrosol,C8H10O2)、多糖、脂肪、甾醇、酚类化合物、黄酮、有机
酸、水溶性挥发油、18种氨基酸以及铁、钙、镁、铜、铬、硒等35种无机元素。
现代
药理学结果研究表明,红景天具有抗疲劳、耐缺氧、抗衰老、调节免疫功能及解毒等
作用,对血压及血糖具有双向调节作用,还具有镇静、抗微波辐射、促进蛋白质代
谢、消炎、强心及抗肿瘤等功效。
本研究以精制品中红景天苷的含量为指标,筛选出
高山红景天最佳提取工艺和精制方法,旨在为高山红景天制剂的开发提供理论依据。
1材料
SCL-10AVP型高效液相色谱仪及UV-2201型紫外分光光度计为日本Shimadzu产
品,旋转蒸发器为上海青浦沪西仪器厂产品,循环水式多用真空泵为郑州长城科工贸
有限公司产品;
电子恒温水浴锅为深圳国华仪器厂产品;
高山红景天药材购自于延边土特
产品经销公司,红景天苷对照品由中国药品生物制品检定所提供;
ZTC1+1澄清剂为天
津正天成澄清技术公司产品,大孔吸附树脂为天津市海光华工有限公司产品,其他化
学试剂均为分析纯。
2方法与结果
2
2.1红景天苷含量测定方法的建立与评价
2.1.1色谱条件色谱柱为HypersilODS2C18(5.0mm150mm,5m),流动相为甲醇-水
(20∶80),流速为0.5mL/min,柱温为25℃,检测波长为280nm,进样量为5L。
2.1.2标准曲线的绘制精密称取红景天苷标准品2.2mg,置于10mL容量瓶中,加
入甲醇溶解并定容至刻度,分别精密吸取75,100,125,175,225,250,300,500
L置于5mL容量瓶内,加入甲醇定容至刻度,所得溶液浓度分别为3.3,4.4,5.5,
7.7,9.9,11.0,13.2,22.0mg/L,用0.45m微孔滤膜过滤,分别进样.以峰面积为纵坐
标,红景天苷浓度为横坐标,得回归方程Y=1212.2X-2567(r=0.9996),提示红景天苷溶
液的浓度在3.3~22.0mg/L范围内浓度(Y)与峰面积(X)呈良好的线性关系。
2.1.3精密度试验取红景天苷对照品适量,加入甲醇配制成11mg/L溶液,连续进样
5次,结果示峰面积分别为11025,11108,11358,11267,11149,RSD为1.178%,
提示此方法精密度良好。
2.1.4稳定性试验将供试品制备后分别在0,24,48,72,96h给供试品溶液行进样
测定,结果示溶液峰面积分别为13478,13349,13258,13186,13269,RSD为
0.838%,提示供试品溶液在96h内稳定。
3
2.1.5重复性试验取同一批次红景天药粉5份,分别加入甲醇制备溶液,进样测
定,结果示红景天苷含量的RSD为2.02%.。
2.1.6加样回收试验分别吸取红景天苷对照品溶液,加入已知含量的供试品溶液,
测定峰面积,计算回收率,结果示平均回收率为99.45%,RSD为0.876%(Table1)。
2.2红景天苷提取工艺优化
tips:
感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。
仅供参阅!
现代研究表明:
红花集药用、食用、染料、油料和饲料于一身。
红花油是世
界公认的具有食用、保健、美容功用的功能性食用油。
红花油在国际上被作为绿色食
4
品,其亚油酸含量是所有已知植物中最高的,达80%,号称亚油酸之王。
并且在医
药工业上,红花油常常用作血液胆固醇调整、动脉粥样硬化治疗剂及预防剂的原料。
适用于各种类型动脉粥样硬化、高胆固醇、高血压、心肌梗死、心绞痛等,并可用作
脂肪肝、肝硬化、肝功能障碍的辅助治疗。
红花油还广泛用作抗氧化剂和维生素A、
维生素D的稳定剂。
红花油酸值低、黏底小、脂肪酸凝点低、油色浅、清亮澄明,可
作为药用注射油。
红花花冠不但可作为药用,还可提供天然食用的黄色素、红色素,
是理想的食品添加剂,还是高档化妆品、纺织品的染色剂,且对人体有抗癌、杀菌、
解毒、降压及护肤的功效。
饼粕中制得蛋白质浓缩粉和分离物,可作为食物的强化
剂。
红花药理分析
1化学成分
目前红花中已分离鉴定的化学成分有60多种,其中主要有黄酮类、木脂素类、多炔
类等,有药效的成分主要是:
黄酮类:
包括红花黄色素(saffloryellow,SY,有些文献
亦称之为红花总黄素),羟基红花黄色素A(hydroxysaffloryellowA,HSYA)等;
脂肪酸:
红花中含有棕榈酸、肉豆蔻酸、月桂酸、油酸、亚油酸等不饱和脂肪酸;
红花多糖:
该
成分是由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和中乳糖以键连接的一种多糖体。
1906年日本龟高
德平从我国河南产德红花干花中首先分得红色素,含0.3%~0.6%;
含红花黄色素(SY)查
耳酮类化合物为20%~30%。
为进一步揭示红花药理活性的化学物质基础,开发其活
性成分,尹宏斌和郭美丽等对红花进行乙醚和乙酸乙酯提取,并对所得到的化学成分
5
进行了初步分离和纯化,通过波谱分析鉴定出了18个化合物。
红花中富含大量的蛋白
质、脂肪、膳食纤维、维生素B、维生素E及微量元素铁、锌、铜、磷、硒、钙、
钾、钠、铬、钼等,而且还富含多糖和腺苷等物质。
2药理研究及临床应用
2.1对心功能及血管的影响小剂量红花煎剂对蟾蜍心脏有轻微兴奋作用,使心跳有
力、振幅加大,对心肌缺血有益;
大剂量对蟾蜍反而有抑制作用,而扩张体冠动脉及股
动脉。
此外,还能解除血管平滑肌的痉挛并增强耐缺氧能力,阻止血栓进一步发展并
逐步缓解血栓,降低胆固醇的作用。
能较好地改善心肌及脑组织的微循环障碍,起到
治疗冠心病及脑血栓的效果。
2.2降低血压、血脂的作用红花煎剂对狗、猫均有较持久的降低血压的作用。
口服
红花油可治疗高胆固醇血症、高甘油三酯血症及高非酯化脂肪酸血症。
2.3抗凝血、血栓的作用SY可显著延长凝血酶原时间和凝血时间,能显著提高血浆
纤溶酶原激活剂的活性,使局部血栓溶解,从而起到治疗心脑血管疾病的作用。
2.4抗炎作用Toshihiro等认为红花中的长链6,8双醇化合物是抗炎活性的主要有
效成分。
SY对甲醛性大鼠足肿胀、对组胺引起的大鼠皮肤毛细血管的通透量增加及对
6
大鼠棉球肉芽肿形成均有明显的抑制作用。
其抗炎的机制可能是通过降低毛细血管通
透性,减少炎性渗出,抑制炎症过程及肉芽增生。
红花中的多种有效成分可影响免
疫,拮抗PAF受体,提高体内NO水平,清除氧自由基,还能拮抗多种炎症因子,有
效好的抗炎作用。
2.5镇痛和镇静作用SY红花黄色素对小鼠有较强而持久的镇痛效应,对锐痛(热刺
痛)及钝痛(化学性刺痛)均有效。
2.6兴奋子宫的作用红花煎剂对小白鼠、豚鼠、家兔、狗、猫之离体和在体子宫均
有显著的兴奋作用。
2.7耐缺氧作用SY有显著的耐缺氧、抗疲劳作用,能明显延长动物的存活时间,并
增加离体家兔心脏和心肌缺氧的冠脉流量,改善心脏的缺氧、缺血病理状态。
2.8保肝作用红花注射液能明显抑制离体灌流、肝灌流液中的GPT的升高,使流量
增加并接近正常,有利于改善肝功能。
2.9免疫抑制作用陆正武等研究结果显示:
SY可降低血清溶菌酶含量、抑制迟发型
超敏反应和血清溶血素产生、抑制腹腔巨噬细胞和全血白细胞吞噬功能、减少脾特异
性玫瑰花形成细胞。
体外应用SY,可抑制3HTdR掺入的T/B淋巴细胞增殖反应,抑
7
制混合淋巴细胞反应,降低白细胞介素2水平及其活性,抑制T细胞的产生及其活
性,表明SY以剂量依赖方式降低非特异性细胞免疫和体液免疫的效能。
3小结
红花及其成分的药理作用十分广泛、毒性小,其防治心脑血管系统疾病的成果已经
得到广泛确认。
另外还具有抗炎,耐缺氧,免疫抑制,镇痛、镇静等作用。
心脑血管
疾病已成为我国普遍而严重的疾病,且发病年龄越来越提前。
因此,开发红花系列制
剂及产品,对提高人民的健康水平具有重大而深远的意义。
参考文献:
2.2.1提取方法的考察因素
与水平根据红景天所含成分的物理化学性质及预实验结果采用回流提取法进行提取,
确定3个因素,即乙醇浓度(A)、加入溶剂量(B)及提取时间(C).提取效率的影响因素与
水平安排见Table2,以提取液中红景天苷的含量作为考察指标。
2.2.2样品测定粉碎红景天,精密称取10.0g,浸泡12h,分别按Table3条件进行提
8
取,回收乙醇浓缩至浸膏,用甲醇溶解并定容至25mL.精密吸取0.25mL置于5mL容
量瓶中,加甲醇至刻度,用0.45m微孔滤膜过滤,按上述2.1.1项下色谱条件进行测
定,计算出红景天苷含量,结果见Table3,Table4。
实验结果表明,因素A对红景天
苷的提取有显著影响,因素B和C对红景天苷的提取无影响。
按A2B1C1方案进行提
取,即10倍量700mL/L乙醇,回流提取2次,每次1h,所测得样品中红景天苷含量
为4.862g/kg。
2.3红景天苷的精制
;
2.3.1醇沉法取6份红景天粉,每份为10g,按A2B1C1提取工艺进行提取,制成
浸膏,加入10mL蒸馏水溶解,加入无水乙醇,使乙醇浓度达到700mL/L,放置24h,
过滤,回收乙醇制成干浸膏,称其质量,加入甲醇溶解并定容至25mL,精密吸取
0.25mL置于5mL容量瓶中,加甲醇至刻度,进样测定红景天苷含量。
2.3.2大孔吸附树脂法取6份红景天粉,每份为10g,按A2B1C1提取工艺进行
提取,制成浸膏,加入25mL蒸馏水溶解,过滤,通过D101大孔树脂柱(14mm
200mm,树脂高度为80mm),流速控制在0.5mL/min,先用蒸馏水洗脱至流出液无
色,再用700mL/L乙醇洗脱至洗脱液无色为止,回收乙醇;
制成干浸膏,称其质量,加
入甲醇溶解,并定容至25mL,称取0.25mL,加入甲醇定容至5mL,进样测定红景天
苷含量。
9
3讨论
正交分析结果示,乙醇浓度对高山红景天中红景天苷的提取影响较大,而溶剂用量
和提取时间无明显影响。
从节约成本等因素考虑,本实验最终确定高山红景天苷的最
佳提取工艺为A2B1C1,即10倍量700mL/L乙醇,回流提取2次,每次1h.验证性试
验结果示,按此工艺进行提取,所测得高山红景天中红景天苷的含量为4.862g/kg,高
于其他工艺提取的测定值。
本实验结果表明,将ZTC1+1吸附法用于提取高山红景天
中红景天苷可得到满意效果,且得率与醇沉法及大孔吸附树脂法相比有显著性差异。
综上所述,A2B1C1可作为高山红景天苷的最佳提取工艺,以ZTC1+1吸附法进一步
精制,具有稳定、安全、高效、不破坏有效成分、使用方便且成本低廉等优点。
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