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D.加入酚红指示剂作为选择培养基,加入唯一碳源作为鉴别培养基
7.为了保持菌种的纯净,需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是( )
A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法
B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上
C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温﹣4℃保藏的方法
8.在农田土壤的表层自生固氮菌较多.用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养,可将自生固氮菌与其他细菌分开,对培养基的要求是( )
①加抗生素
②不加抗生素
③加氮素
④不加氮素
⑤加葡萄糖
⑥不加葡萄糖
⑦37℃恒温箱中培养
⑧28~30℃恒温箱中培养
A.①③⑤⑦B.②④⑥⑧C.②④⑤⑧D.②④⑥⑦
9.下列哪项操作会引起发酵液污染,使发酵失败()
A.榨汁机用温水进行清洗,并晾干
B.发酵瓶先用温水清洗,再用75%的酒精擦拭后晾干使用
C.葡萄先去除枝梗,再冲洗多次
D.每次排气时,只需拧松瓶盖,不能将盖完全揭开
10.下列有关微生物培养的叙述错误的是()
A.在对微生物进行培养前,需要对微生物和培养基进行灭菌
B.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源
C.测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数
D.酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有一定的抑制作用
11.通过实验测定土壤中的细菌数量,下列与此操作有关的叙述中,不正确的是()
A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温,高压灭菌后倒平板
B取10-4、10-5的土壤稀释液0.1ml,分别涂布于各组平板上
C将培养皿倒置,37℃恒温培养12――24小时
D选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
12.甲、乙、丙是三种微生物,下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基.甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;
甲能在I中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;
乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能.下列说法正确的是()
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲、乙都足自养微生物、丙是异养微生物
C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙足自养微生物
D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物
13.下列关于检验发酵产物的说法中,正确的是
A.果汁发酵是否产生酒精,可用溴麝香草酚蓝溶液检验
B.检验醋酸可以品尝或用pH试纸测定
C.泡菜制作中亚硝酸盐的含量不能确定
D.测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法
14.MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”,对青霉素等多种抗生素有抗性。
为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响,某兴趣小组的实验设计及结果如下表。
下列说法正确的是()
组别
培养基中的添加物
MRSA菌
1
100μg/mL蛋白质H
生长正常
2
20μg/mL青霉素
3
2μg/mL青霉素+100μg/mL蛋白质H
死亡
A.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的
B.第2组和第3组对比表明,使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌
C.实验还需设计用2μg/mL青霉素做处理的对照组
D.蛋白质H有很强的杀菌作用,是一种新型抗生素
15.不同微生物对营养物质的需要各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中不正确的是()
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B.碳源物质也是该微生物的能源物质
C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D.水是该微生物的营养要素之一
16.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37℃恒温培养4小时
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在30--300的实验组平板进行计数
17.果酒变酸、酸奶的制作、腐乳外部致密的一层“皮”,与其相关的微生物分别是()
A.醋酸菌、乳酸菌、毛霉B.乳酸菌、毛霉、醋酸菌
C.醋酸菌、酵母菌、毛霉D.酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
18.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。
据图分析正确的是()
A.土壤的取样、称取和稀释均需要在酒精灯火焰旁进行
B.5号试管的结果表明每克该土壤中的菌株数目为1.7×
108个
C.涂布操作时,用移液管取少量菌液,在培养基上涂布均匀
D.某一稀释度下至少涂3个平板,该方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目高
19.如图是果醋和果酒的发酵装置,相关描述错误的是( )
A.出料口可以用来取样
B.排气口能排出酒精发酵时产生的二氧化碳
C.充气口在醋酸发酵时要连接充气泵进行充气
D.充气口的开关始终要处于打开状态
20.在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;
在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;
在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。
利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出()
A.固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B.固氮细菌、大肠杆菌、放线菌
C.乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
D.固氮细菌、霉菌、放线菌
21.室温放置一周的牛奶,包装袋充气膨胀,如下图所示。
以下分析错误的是()
A.巴氏杀菌(60~90℃)不能杀死所有微生物
B.将牛奶放入冰箱能一定程度上抑制该过程
C.打开包装袋若闻到酒味,袋内应含有二氧化碳气体
D.该牛奶可正常饮用,因为无氧条件下牛奶已变成酸奶
22.下对相关叙注正确的是()
A.醋酸菌可在无氧条件下利用乙醇产生醋酸
B.酵母菌在有氧条件下利用葡萄汁产生酒精
C.泡菜制作过程中需要一直保持无氧发酵条件
D.制作腐乳是利用毛霉等微生物直接对蛋白质等进行分解
23.下列各曲线图表示在果酒的制作过程中,各种因素对酵母菌发酵产生酒精速率(V)的影响,其中正确的是
A.AB.BC.CD.D
24.下列操作过程中需要利用水浴加热的一组是( )
①胡萝卜素的萃取
②橘皮芳香油的提取
③亚硝酸盐含量的测定
④DNA的鉴定
A.①②B.②③C.③④D.①④
25.三个培养皿中分别加入10ml不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36小时后,计算菌落数,结果如下表.下列选项正确的是()
A.该实验采用的是液体培养基
B.该实验采用平板划线法接种
C.Ⅰ和Ⅲ对照;
说明大肠杆菌的生长不需要生长因子
D.Ⅱ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长需要糖类
26.下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述,正确的是()
A.分解尿素的细菌能产生脲酶,将尿素分解产生氮气
B.用选择培养基选择出分解尿素的细菌,杀死其他微生物
C.统计尿素分解菌的数目时,以菌落数在300以上的平板进行计数
D.用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌,指示剂变红
27.微生物接种方法很多,平板划线法是最常用的一种。
下图是平板划线示意图,划线的顺序为①②③④。
下列操作方法错误的是()
A.划线操作时,将沾有菌种的接种环插入培养基
B.平板划线后培养微生物时要倒置培养
C.不能将第④区域的划线与第①区域的划线相连
D.在②~④区域中划线前后都要对接种环进行灭菌
28.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。
在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;
在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。
利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()
①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌
A.④②③B.①②③C.①③④D.③④①
第II卷(非选择题44分)
二、非选择题(本题有4小题,第29题10分,第30、31题12分,第32题10分,共44分。
29.常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差。
科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。
请分析回答:
(1)微生物实验用的培养基的灭菌方法是__________;
进行干热灭菌的物品应满足的条件是__________。
(2)自然界中采集葡萄,然后在超净台上将葡萄置于0.1%氯化汞水溶液中进行表面消毒5min,再用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后进行纯化培养。
再经过接种培养,得到的菌落分布如下图所示的平板,推测接种时可能的操作失误是________。
为了确定培养基是否被污染,需要进行的操作是___________。
(3)下表为某学生在筛选培养能利用木糖发酵的酵母菌时所配置的培养基配方,请指出其中的明显不足之处______________。
K2HPO4
FeSO4
MgSO4·
7H2O
NaNO3
KCl
蔗糖
木糖
琼脂
蒸馏水
0.1g
0.001g
0.05g
0.3g
3.0g
2.0g
100ml
30.请回答与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”的有关问题。
(1)培养基的类型很多,但培养基中一般都含有水、________、________和无机盐。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是_____和___________两种。
在接种过程中,接种针或涂布器的灭菌方法是_______。
(3)可以通过____________来判断细菌是否分解尿素。
土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们能合成____。
(4)对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养,则土壤细菌的增长呈现___型曲线增长。
31.牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。
以下是牛奶消毒及消毒后的细菌检测。
(1)图中步骤①称为__________消毒法,步骤②是__________。
(2)检测过程进行步骤③搡作时,应选用下图中的哪种工具_______________。
为了避免杂菌污染,此处应在__________附近进行。
(3)将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入37℃恒温培养箱中,培养36小时。
取出后统计各平板的菌落数,结果如表所示。
牛奶稀释倍数
10-2
10-3
10-4
平板1菌落数
87
10
平板2菌落数
83
12
平板3菌落数
85
应该选择其中稀释倍数为__________的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是__________个/mL。
不同种微生物的菌落在_________等方面表现出的特点,可作为分类依据(写出2种。
32.下图表示葡萄酒的酿制过程,请据图回答下列问题:
(1)该过程表明酵母菌异化作用的特点是_____________________________。
(2)葡萄酒的酿制原理是:
先通气使酵母菌进行__________,以增加酵母菌的数量,然后使酵母菌进行____________获得葡萄酒。
果汁发酵后是否有酒精产生,可以用____________溶液来检验。
(3)为防止发酵液被污染,对使用的发酵瓶要________,并用________________消毒。
(4)在甲中进行搅拌的目的是_______________,乙中排出的气体是发酵过程中产生的_________________。
(5)在制作馒头时,可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软。
请问这两种方法中,馒头中的营养和所含有的能量情况相比较最可能的是____
A.后者所含营养丰富、能量少B.后者所含营养单一、能量少
C.前者所含营养丰富、能量多D.两者所含营养和能量相同
参考答案
1.D
【解析】纯化大肠杆菌的平板划线中,接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环可能存在的微生物污染培养物;
冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液,以免温度太高,杀死菌种;
划线时不要将最后一区的划线与第一区的划线相连,这样就不能得到由单个细菌繁殖而来的菌落;
选D。
2.D
【解析】在一定温度、湿度条件下,毛霉与根霉生长繁殖于腐乳表面,形成大量的菌丝,便形成一层柔韧而致密的皮膜,对人体无害,同时可防止腐乳变质,D正确
3.B
【解析】根据题意分析可知:
培养基要保证无菌,所以需要高压蒸汽灭菌;
培养皿是玻璃器皿,需要干热灭菌;
接种环用于接种,需要灼烧灭菌;
实验操作者的双手一般用70%的酒精消毒;
空气通常用紫外线消毒。
所以选B。
4.C
【解析】.将菌液稀释相同的倍数,在完全培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此完全培养基是对照组。
对照组遵循的原则是单一变量,所以需要与选择培养基一样接种、培养,故选C。
5.C
【解析】病毒只有寄生在在活细胞才有生命特征,所以则放射性先在细菌中出现,后在噬菌体中出现,A正确;
曲线a~b段,噬菌斑没有增加,说明细菌内正旺盛地进行噬菌体DNA的复制和有关蛋白质的合成等过程,B正确;
噬菌体应该是指数增长,C错误;
D正确。
6.A
【解析】在分解尿素菌的分离和鉴定中,先加入以尿素为唯一氮源的选择培养基,再加入酚红指示剂作为鉴别培养基,如果培养基变红,说明培养基中已得到能降解尿素的细菌。
本题主要考查微生物的分离与鉴定的相关知识,意在考查考生对所学知识的理解把握知识间内在联系的能力。
7.D
【解析】A、对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法,在固体斜面培养基上菌落长成后,放入冰箱低温保藏,A正确;
B、临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上,等到菌落长成后,放入冰箱低温保藏,B正确;
C、临时保藏的菌种由于频繁转种,容易被污染或产生变异,C正确;
D、对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法,D错误.
故选:
D.
菌种保藏是一切微生物工作的基础,其目的:
是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染,并保持其优良性状,以利于生产和科研应用.菌种保藏的原理:
是为了达到长期保持菌种的优良特性,核心问题是必须降低菌种变异率,而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长、繁殖过程,因此必须创造一种环境,使微生物处于新陈代谢最低水平,生长繁殖不活跃状态.常用的方法主要有:
常规转接斜面低温保藏法,半固体穿刺保藏法,液体石蜡保藏法,含甘油培养物保藏法等,沙土管保藏法.特殊的有:
真空冷冻干燥保藏法和液氮超低温保藏法.
8.C
【解析】自生固氮菌是异养菌,生长繁殖需要有机碳源;
自生固氮菌能利用空气中的氮气,培养基中不加氮源,固氮菌能生长繁殖,不能固氮的菌不能生长繁殖,;
自生固氮菌的生长繁殖的最适宜温度是28~30℃;
自生固氮菌对青霉素敏感,培养基中不能加青霉素.所以如果从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是②不加抗生素、④不加氮素、⑤加葡萄糖、⑧28~30℃恒温箱中培养.故选:
C.
本题是应用选择培养基筛选自生固氮菌,先分析自生固氮菌的代谢特点和对培养基的营养需求,然后从给出的培养基成分中选择所需要的成分,判断选项.
9.C
【解析】榨汁机温水进行清洗,并晾干是防止发酵液被污染的措施之一,A错误。
发酵瓶先用温水清洗,再用75%的酒精擦拭后晾干使用是防止发酵液被污染的措施之一,B错误。
先去除枝梗再冲洗葡萄,会使葡萄破损而增加被杂菌污染的机会,C正确。
每次排气时,只需拧松瓶盖,不能将盖完全揭开是防止发酵液被污染的措施之一,D错误。
10.A
【解析】进行微生物培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等.微生物培养需要用到培养基,根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基.微生物培养成功的关键在于无菌操作,如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的.筛选目的微生物需要使用选择培养基.接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法.
解:
A、在对微生物进行培养前,需要对除微生物外的培养基和所有用具进行灭菌或消毒,A错误;
B、筛选尿素分解菌需要使用以尿素作为培养基中唯一的氮源的选择培养基,B正确;
C、测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数,C正确;
D、酒精具有杀菌和抑菌作用,酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有一定的抑制作用,D正确.
A.
11.D
【解析】培养基的灭菌方法是高温、高压灭菌,A正确;
取10-4、10-5的土壤稀释液0.1mL,分别涂布于各组平板上,是设置了一系列对照实验,B正确;
细菌培养时,要将培养皿倒置培养,并在370C恒温培养12~24小时,C正确;
选择菌落数在30-300个的一组平板为代表进行计数,而不是选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数,D错误。
12.D
【解析】Ⅰ培养基中N源,而甲能在此培养基中生长,说明甲能固氮,属于固氮微生物;
Ⅱ培养基中缺少C源,而乙能在此培养基中生长,说明乙能合成有机物,属于自养微生物;
Ⅲ是完全培养基,但丙在此培养基上不能生存,说明丙是异养微生物.
13.B
【解析】13.
试题分析:
果汁发酵是否产生酒精,可用重铬酸钾来检验,A错误;
检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定,B正确;
泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量可以用比色法进行测定,C错误;
亚硝酸盐无味且有毒,不能用品尝法检测其含量,D错误。
14.C
【解析】细菌是原核细胞,无细胞核,故A选项错误;
第2组和第3组对比说明使用低浓度青霉素和高浓度蛋白H可杀死MRSA菌,故B选项错误;
第3组缺少2ug/mL的对照组,故C选项正确;
抗生素是由微生物产生的具有抗菌作用的物质,而蛋白H是乳腺细胞产生,不属于抗生素,故D选项错误.
15.B
【解析】微生物需要的营养物质有碳源、氮源、生长因子、水和无机盐,氮源物质为该微生物提供必要的氮素,ACD正确;
因为该生物以CO2为唯一碳源,而该碳源不能提供能量,B错误。
16.C
【解析】配制培养基时要用蒸馏水,而不能用自来水,防止杂菌污染,用蒸馏水配置牛肉膏蛋白胨培养基时,需要先灭菌再倒平板,A正确;
需要用不同倍数的土壤稀释液和蒸馏水做对照实验,B正确;
实验组和对照组需要在37度恒温箱培养24-48h,再观察计数,C错误;
土壤中微生物的量相对稳定,由于实验原因,很容易引起数量的剧烈变化,所以要选择30~300左右进行计数,D正确。
17.A
【解析】
(1)使暴露在空气中的果酒变酸的微生物是醋酸菌,醋酸菌发酵产生了醋酸,使得果酒出现特殊酸味,因此果酒变酸与醋酸菌有关;
(2)制作酸奶和泡菜要用到乳酸菌,乳酸菌发酵产生乳酸,使得奶和菜有一种特殊的酸味,因此酸奶的制作与乳酸菌有关;
(3)腐乳的制作利用的主要是真菌中的毛霉,毛霉中的蛋白酶和脂肪酶能够将豆腐中的蛋白质和脂肪分解成小分子物质,因此其表层致密的一层“皮”与毛霉有关。
18.C
【解析】土壤的称取和稀释均需要在酒精灯火焰旁进行,以防止杂菌污染,而取样不需要,A错误;
5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168+175+167)÷
3×
105×
10÷
10≈1.7×
107个,B错误;
涂布操作时,用移液管取少量菌液,在培养基上涂布均匀,C正确;
稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落,使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低,D错误。
19.D
【解析】制果酒和果醋的过程需控制好以下发酵的条件:
果汁装入发酵瓶时,要留有大约1/3的空间;
在制果酒的过程中,要将温度严格控制在18~25℃,时间控制在10~12d左右,可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测,并通过排气孔将酵母菌发酵产生酒精的同时产生的二氧化碳排出;
在制果醋的过程中,要将温度严格控制在30~35℃,时间控制在7~8d左右,并注意适时通过充气孔充气。
由于果酒的制作需要酵母菌进行厌氧发酵,所以充气孔不能始终保持打开状态,故本题正确答案为D。
20.D
【解析】本题考查微生物分离技术,要求考生理解选择培养基的作用,能利用合适的选择培养基分离所需的微生物。
在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长,但固氮细菌可以利用空气中的氮气提供氮源而生长,因此利用无氮培养基可以从混杂的微生物群体中分离出固氮细菌;
在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌,而不影响真菌的生长,因此利用含青霉素的培养基可以从混杂的微生物群体中分离出霉菌(属于真菌);
在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌,但不影响放线菌的生长,因此利用含10%酚的培养基可以从混杂的微生物群体中分离出放线菌;
综上分析,D正确,ABC错误。
21.D
【解析】巴氏杀菌(60~90℃)不能杀死所有微生物,A正确;
冰箱中温度太低,不能满足巴氏杀菌的温度要求,所以将牛奶放入冰箱能一定程度上抑
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