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A.同种少数细菌,液体培养基
B.许多细菌,液体培养基
C.同种少数细菌,固体培养基
D.许多细菌,固体培养基
3.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是()
A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D.待平板冷却凝固约5min~10min后将平板倒过来放置
4.下列操作与消毒、灭菌无关的是()
A.接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手
B.接种前用火焰灼烧接种环
C.培养基在50℃左右时搁置斜面
D.接种时在酒精灯的火焰旁完成
5.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌消毒方法依次是()
①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌
④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法
A.⑤③②①④⑥B.①②③④⑤⑥
C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤
6.需要在火焰旁操作的有()
①土壤取样②平板划线③稀释土壤溶液
④涂布平板⑤微生物的培养
A.①②③④⑤B.②③④⑤
C.③④⑤D.②③④
7.细菌分离与计数实验操作过程应注意()
①无菌操作②做好标记③规划时间④无菌观察
A.①②③④B.②③④
C.①②③D.①②
8.在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基之前,通常要进行选择培养,其目的是()
A.分离纤维素分解菌
B.加快纤维素分解菌的生长速度
C.使纤维素分解菌均匀地分布在稀释液中
D.增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物
9.发酵工程的第一个重要工作是从混杂的微生物群体中选择优良的单一纯种,获得纯种的方法不包括()
A.根据微生物对碳源需要的差别,使用含不同碳源的培养基
B.根据微生物缺乏特殊营养物质的种类,在培养基中增减不同的特殊营养物质
C.利用高温高压消灭不需要的杂菌
D.根据微生物对抗生素敏感性的差异,在培养基中加入不同的抗生素
10.(2011·
泰安高二检测)下列为某同学在培养金黄色葡萄球菌实验中的部分操作步骤,其中正确的是()
A.培养基中蛋白胨、牛肉膏溶化后,直接补充蒸馏水至100mL
B.用1mol/LNaOH调试pH,使pH为5.0~6.0
C.加压至98kPa之前,要彻底排出锅内的冷空气
D.将接种环放在酒精灯上灼烧,灭菌后立即伸入菌种试管内挑取少量菌种
11.(2011·
西安高二检测)下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况(A、B、C、H、I、J、K、M为培养基的组成成分,“+”表示生长,“-”表示不生长),请分析下列哪种物质细菌不能合成()
A.HB.IC.KD.M
12.加工橘子罐头,采用酸碱处理脱去中果皮(橘络),会产生严重污染。
目前使用酶解法去除橘络,可减少污染。
下列生长在特定环境中的4类微生物,可以大量产生所用酶的有(多选)()
A.生长在葡萄上的酵母菌
B.生长在酸奶中的乳酸菌
C.生长在棉籽壳上的平菇
D.生长在木屑上的木霉
二、非选择题(本大题共包括3小题,共52分)
13.(17分)(2011·
新课标全国卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。
回答问题:
(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以_____________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于_______________培养基。
(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即__________
_______________和_________________。
(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力___________________________。
(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_______________和_______________。
无菌技术要求实验操作应在酒精灯_______________附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
14.(18分)有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究和应用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。
研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。
分析回答问题:
(1)培养基中加入的化合物A是___________,为微生物的生长提供__________,这种培养基从功能上进行分类,应属于________________培养基。
(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,还应向培养基中加入____________。
加入该物质后,培养基应属于____________________培养基。
(3)若用平板划线法获得纯净的菌株,请回答:
①在接种时,为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?
_______________________________________________________________________________________________________________________________________。
②在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?
为什么?
_________________
___________________________________________________________________。
③除此之外,还可用___________________________的方法来获得纯净的菌株。
15.(17分)氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。
某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。
培养基配方如表1。
(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的_______________。
(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是____________________________。
(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于_____________培养基和_______________培养基。
在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是_______________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为______________________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养基中培养,得到生长曲线(如图2)。
从图2可知,SP1菌在________________________培养条件下最早停止生长,其原因是___________________________________________________________。
答案解析
1.【解析】选A。
分离能分解尿素的细菌,培养基中一定有尿素。
另外,水、无机盐和碳源、能源也是细菌生长所必不可少的。
有机碳在这里既是碳源又是能源,因为分解尿素的细菌是异养微生物,不能利用无机碳化物。
在这里尿素提供氮源。
一定没有有机氮化物,因为其他异养型微生物可利用有机氮化物作氮源而能和分解尿素的细菌共同生长,起不到选择培养的作用。
2.【解析】选C。
在液体培养基中生活的细菌,无论是一个还是许多,肉眼都是不可见的。
在固体培养基上的细菌,当数目较少时也是不可见的,当有许多细菌并且集中在较小范围时,肉眼可见。
而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体,形成于固体培养基上,有一定的形态结构,所以肉眼可见。
同种细菌形成的菌落,形态结构是相同的。
如果有许多细菌形成的菌落,就不可能有比较标准的形态,因为这许多细菌首先不可能是同一种细菌,其次不可能在培养基的同一个点上。
3.【解析】选A。
制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,不能颠倒。
牛肉膏容易吸潮,所以等牛肉膏溶化并与称量纸分离后,再用玻璃棒取出称量纸。
待培养基冷却至50℃,用手触摸锥形瓶刚好不烫手,并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。
平板冷却几分钟后还需倒置。
4.【解析】选C。
在培养微生物时,一定要建立无菌概念,因此在各步接种操作时都必须注意灭菌,这是获得微生物纯培养的关键。
常用的方法有化学消毒和物理灭菌两大类,题中肥皂洗手、酒精擦拭属消毒,火焰灼烧属灭菌;
而培养基在50℃左右时搁置斜面,是因为培养基在50℃时呈液态,温度降低时,培养基凝固,可形成固体斜面培养基。
5.【解析】选A。
本题综合考查灭菌、消毒方法。
培养基一般用高压蒸汽灭菌法;
玻璃器具一般用干热灭菌;
接种环等金属用具用酒精灯灼烧灭菌;
手一般用酒精消毒;
空气用紫外线灭菌;
牛奶用巴氏消毒法。
6.【解析】选D。
火焰提供了一个小范围的无菌空间,为了防止杂菌污染,平板划线、稀释土壤溶液和涂布平板都应在火焰旁进行。
土壤取样不用在火焰旁进行,但所用器具必须先灭菌。
微生物的培养在恒温箱中进行,无需灭菌。
7.【解析】选C。
由于本实验操作复杂,目的是对细菌进行分离和计数,整个过程需要无菌操作,如取土样时用到的小铁铲和盛土样的信封及容器等均需灭菌,土样称量、样品稀释及涂布平板等操作均在火焰旁进行;
本实验用到的平板和试管比较多,为避免混淆,最好在使用前就做好标记;
本实验耗时较长,需事先规划好时间,以便提高工作效率,在操作时更加有条不紊。
8.【解析】选D。
选择培养基中富含纤维素粉,主要适合于能产生纤维素酶的纤维素分解菌的生长,所以选择培养的目的主要是增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。
9.【解析】选C。
A、B、D三种方法都属于选择培养基的使用,都可选择出目的菌株,而C项高温处理的时候灭菌是没有选择性的。
10.【解析】选C。
A选项应先加入琼脂,加热使其熔化后,再补加蒸馏水至
100mL;
B选项用1mol/LNaOH调试pH是正确的,但金黄色葡萄球菌是细菌,本实验应把pH调至7.4~7.6;
C选项加压至98kPa之前,要彻底排出锅内的冷空气,是为了使高压锅能够在很短的时间内达到较高的温度,使锅内充满水蒸气,并使水蒸气分子运动达到尽可能快的速度,穿透各微生物菌体及芽孢等;
D选项接种环放在酒精灯上灼烧灭菌是应该的,但不能立即伸入菌种试管内挑取菌种,这样会烫死菌种。
11.【解析】选C。
从表中可以看出,凡是细菌能生长的培养基中都有K,而细菌不能生长的培养基中均无K,说明K是该细菌不能合成的物质。
12.【解析】选C、D。
橘络的主要成分是纤维素,要将其分解需用纤维素酶,棉籽壳、木屑的主要成分也是纤维素,所以生长在上述两种成分上的平菇、木霉肯定能产生纤维素酶,所以可以利用。
而乳酸菌的培养基为酸奶,其主要成分是蛋白质,不含纤维素,所以乳酸菌不能产生纤维素酶。
酵母菌能利用葡萄糖,但不能产生纤维素酶。
13.【解析】
(1)实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株,因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。
(2)纯化分离微生物的方法有2种:
平板划线法和稀释涂布平板法;
灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
答案:
(1)原油选择
(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强
(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰
14.【解析】若筛选到能利用纤维素(可产生纤维素酶)的微生物,培养基中加入的化合物A,应为纤维素。
制备只以纤维素作碳源的选择培养基,能在该培养基中生长的微生物应为可产生纤维素酶的微生物,即目标微生物。
(1)纤维素碳源选择
(2)刚果红鉴别
(3)①第一步灼烧接种环是为了防止接种环上有其他微生物而污染培养基;
每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来自于上次划线的末端,以便通过多次划线后,得到单个的菌落
②划线结束后仍要灼烧接种环,以免菌种对环境造成污染
③稀释涂布平板
独具【方法技巧】选择培养基的使用
(1)从使用目的上看:
选择培养基是在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。
(2)从使用过程上看:
利用选择培养基分离微生物时,应先判断分离微生物的特有性质,再根据此性质进行分离。
如固氮菌能自行固氮,可用不加氮源的培养基进行分离。
15.【解析】配制固体培养基时应在液体培养基的成分中再加入琼脂作为凝固剂。
在配制培养基时应先调节pH,后进行灭菌,防止灭菌后在调节pH的过程中污染培养基。
据表可知,培养基Ⅰ为牛肉膏蛋白胨培养基,包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子,适用于多种微生物的培养。
培养基Ⅱ不加牛肉膏和蛋白胨,以硝酸铵为氮源,可以选择出以硝酸铵为氮源的微生物,是选择培养基。
在营养缺乏、环境恶劣时,微生物可以形成休眠体——芽孢,来度过不良环境。
据图2可知,SP1菌在20mg/L氯苯培养条件下菌体数最早达到最大值,即最早停止生长,原因是在培养基Ⅲ中,氯苯是惟一碳源,由于20mg/L氯苯培养条件下氮源最少,因此也最早被耗尽,使SP1菌停止生长。
(1)琼脂
(2)先调pH,后灭菌
(3)通用选择硝酸铵
(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗尽
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