实验五发芽测定Word文件下载.docx

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5.3.1测定样品的提取

发芽测定所需样品应从净度测定后的纯净种子中提取，即使送检单位不要求测定净度，发芽测定样品也应从纯净种子中提取。

首先用四分法将种子分成四份，从每份中随机提取25粒组成100粒。

共取四个100粒，即为四个重复。

种粒大的可以50粒或25粒为一次重复。

样品数量有限或设备条件不足时，也可以采用三次重复，但应在检验证中注明，特小粒种子用重复发芽法。

0.1~0.25克为一次重复。

5.3.2测定样品的预处理

发芽测定前种子是否需要预处理，用什么方法处理，这取决于被测定种子的基本特性，同时也受种子质量情况的制约。

具有休眠习性的种子，发芽测定之前根据休眠的原因，采取适当的催芽处理，解除休眠，一般树种可以采取浸种处理加速发芽。

例如：

杉木、马尾松、黑松、赤松、云南松、油松、水杉、落叶松、云杉、黄连木、胡枝子等，用始温为45℃水浸种24小时，皂角用100℃浸种所用的水最好更换几次。

刺槐种子用80℃始温浸种24小时，中间换水2~3次。

浸种要注意水温与浸种时间。

种子在水中浸泡太久，反而对芽不利。

5.3.3置床

置床就是将经过预处理的种子安放于发芽基质上。

视树种而不同，常用的发芽基质有滤纸和细沙。

目前除常用的培养皿，尚有培养盒，平板发芽器等。

每个培养皿整齐地安放100粒（种粒大时可为50粒乃至25粒）种子。

种粒之间保持的距离大约相当于种粒本身的1~4倍，以减少霉菌蔓延感染，避免发芽的幼根相互缠绕。

发芽种粒的排放应有一定规律，如下图，以便计算并减少错误，将样品登记表的号数，重复号、姓名和日期用铅笔，简地填写一张小标签，分别贴在培养皿不易磨损的地方，例如底盘的外缘，以免引起差错。

5.4发芽测定的管理和观察载

5.4.1管理

a．经常检查发芽环境的温度，仪器的温度同预定的温度相差不能超过±

1℃。

b．保持发芽床的水分。

水分不足时应及时加水，但水分也不能过多，用指尖轻压发芽床（指纸床），如指尖周围出现水膜，或者种粒四周出现水膜。

都表示水分过多。

c．通气种子发芽需要足够的氧气，并会释放出大量的二氧化碳。

有盖的培养皿的缺点之一就是通气不良，应当经常揭开盖子充分换气。

d．将感染了霉菌的种子取出（不要使它们触及健康的种粒），用清水冲洗数次，直到水无混浊再放回原发芽床。

发霉严重时整个滤纸和座垫，甚至整个培养皿都要更换。

这些情况在发芽记录表（附表5.1）中应有所记述。

图5.1100粒种子在发芽床上的排放图例

5.4.2观察记载

发芽测定情况要定期观察记载（见附表5.1）。

为了更好地掌握发芽测定的全过程，最好每天作一次观察记载。

至少在规定的统计发芽势和发芽率的那一天，必须有记载。

5.4.3发芽测定的持续时间

发芽测定的持续天数见天5.1。

表中所列天数以置床之日起零起算。

且不包括种子预处理的时间，如果确认某样品已达到最高发芽率，也可在规定的时间以前结束测定。

如到规定的结束时间仍有较多的种粒萌发，也可酌情延长测定时间。

发芽测定所用实际天数应在检验报告中填明。

记载项目：

按发芽床的编号依次记载以下各点（见附表5.1）。

表5.1常用树种发芽测定的主要技术规定（摘要）

树种温度

（℃）发芽势

终止天数发芽率

终止天数备注

柏木25235昼夜光照8小时

福建柏251228

侧柏25920

湿地松20~301128

思茅松、黑松、云南松251021

马尾松、杉木251020

金钱松251625

柳杉251425

水杉25916

木麻黄30815重量法芽法，每昼夜光照8小时

乌柏20~301030除去蜡层，每昼夜光照8小时

杜仲23712在胚根一端将外皮轻划一刀，室温水浸24小时

香椿25812室温水浸种24小时

阳思树25721100℃水浸种2分种

桑树30815重量发芽法，每昼夜光照8小时

柠檬桉25511重量发芽法

隆缘桉2559重量发芽法

兰桉20~30514重量发芽法：

每昼夜光照8小时

刺槐20~30510始温80℃水浸24小时剩余硬粒再用始温80℃浸24小时每昼夜光照8小时

杨属20~3036重量发芽法

木荷25730

正常发芽粒：

生出正常胚根，且其长度大于该种粒一半的称为正常发芽粒，对、柳、桉等细粒种子，胚根的长度应不少于该种粒的长度。

竹类种子正常发芽粒的幼根应至少同该种粒等长且幼芽的长度超过该种粒长度的二分之一。

苦楝、柚木等复粒种子，其中只要有一粒种子正常发芽即可作为正常发芽数。

符合定义的正常发芽粒用小镊子取出。

异状发芽粒：

指胚根短而生长迟滞；

胚根呈负向地性；

胚根萌发异常纤弱；

胚根腐坏；

胚根发自珠孔以外的部位；

种壳曝裂或脱落；

胚根拳曲；

子叶先出；

竹类种子有根无芽、有芽无根或根短而生长迟滞。

有时需将难于判断的发芽粒特别提出另外培养，以便确定是否为异状发芽。

腐烂粒：

内含物腐败成胶状的无生命种子称腐烂粒，应及时提出并在表格中记述，但不能把感染霉菌的种子混同为腐烂粒。

未发芽粒：

每次剔除发芽粒，异状发芽粒和腐烂粒之后将余下的未发芽粒重新排放整齐，并点数，以便及时核查，避免差错。

5.4.4到达发芽试验终止日期后，分组用切开法对尚未发芽的种粒进行补充鉴定，分别归成以下几类记入附表。

a．新鲜健康粒；

b．腐烂粒；

c．空粒；

d．涩粒（多见天杉木、柳杉）。

5.5计算发芽结果

发芽测定结束，并对尚未发芽的种子用切开法作了鉴定以后，进行以下各项计算记入附表。

5.5.1发芽率（实验室发芽率、技术发芽率）

式中：

n——在规定条件下，规定期内的正常发芽粒数；

N——供试种子数。

发芽率计算到小数点后一位，以下四舍五入。

表5-2发芽百分率的最大容许差距，用以决定是否要重做测定，只考虑随机取样的变异

平均发芽百分率最大容许差距

9925

9836

9748

9659

95610

93-947-810

91-929-1011

89-9011-1212

87-8813-1413

84-8615-1714

81-8318-2015

78-8021-2316

73-7724-2817

67-7229-3418

56-6635-4519

51-5546-5020

发芽率按组计算，然后计算四组的算术平均值。

平均值不带小数，组间的允许误差表5.2如果没有超过容许误差，测定结果可以认为是正确的，即以各组的平均百分数作为本次测定结果。

如果超过容许的误差范围，则认为测定结果不正确，需进行第二次测定。

第二次测定（也以与上次同时做）的结果和第一次测定结果之差附合规定时，则用两次测定的平均数作为发芽率，填入检验证。

检查的方法是规定计算两次的平均数，并在表5.3中查出最大容许差距，如？

次的结果相差不超过表5.3所规定的容许差距，则测定是符合的。

如超过容许误差，则应再测定。

表5.3判断两次测定是否符合的容许差距只考虑随机取样的变异

98-992-32

95-974-63

91-947-104

85-9011-165

77-8417-246

60-7625-417

51-5942-508

5.5.2发芽势

在规定时间（见表5.1，一般是发芽达到高峰以前）内正常发芽的种子的种子数占供试种子数百分比，称为发芽势。

发芽势也是分组计算，然后求四组之间的平均值。

发芽势计算到小数点后一位，计算时容许的误差为计算发芽率时所容许的1.5倍。

5.5.3绝对发芽率

供试种子中饮满种子的发芽率称为绝对发芽率。

n——正常发芽粒数；

N——供试种子数

a——供试种子的空粒种子数和涩粒数。

5.5.4平均发芽时间

平均发芽时间是指供试种子发芽所需的平均天数。

平均发芽时间的计算如下：

D——种子置床以后的天数，以置床之日为O;

M——相应各日的正常发芽粒数；

n——终止天数，i=0，1，2……n。

平均发芽时间计算到小数点第二位，以下四舍五入。

思考题：

1．简述正常发芽粒的特征

未发芽粒分析

组编

类型1234

新鲜

硬实

异状发芽粒

空粒

腐烂

总计

%

测定结果

各组发芽值

项目1234平均值

发芽率

发芽势

绝对发芽率

平均发芽速

发芽率组间最大差距测定结果合格（）

测定不合格（）

允许误差

测定人年月日。