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(1)蛋白纯化填料:
合计24万元.
利用带有***标签蛋白纯化填料和样品纯化填料***对带***标签的重组表达蛋白进行纯化,同时利用内毒素检测试剂盒去除内毒素,获得不含内毒素的纯化蛋白。
序号
货品名称
单价/万元
数量/年
年数
小计/万元
1
***标签蛋白纯化填料
0.35
8
3
8.4
2
样品纯化填料***-50
0.5
12.0
内毒素检测试剂盒
0.15
3.6
(2)凝血酶:
4.50万元。
用于将已纯化的带***标签的***进行酶解,以除去***标签,获得纯化蛋白。
凝血酶
10
4.50
(3)内切酶和连接酶:
2.16万元。
用于***纯化工艺的优化,对***的关键基因进行修饰,基因克隆及表达。
包括***Ⅰ、***Ⅰ、***Ⅲ、***Ⅰ、***Ⅰ等5种常用内切酶及***连接酶,用于构建重组表达质粒进行双酶切,***公司产品,500U/支,各约需6000U。
***Ⅰ
0.03
4
0.36
H***Ⅲ
***hoⅠ
5
***eⅠ
6
***连接酶
(4)实验动物费:
合计15.85万元
A.清洁级BALB/c小鼠或C57BL/6小鼠:
共5.56万元。
清洁级C57BL/6小鼠90只(9大组,每组10只),用于构建***模型(EAE)实验,观察***蛋白及******对自身免疫***模型(EAE)的治疗效果,小鼠单价25元/只,饲养费1.2元/天,需要饲养30天,共25元/只×
90只+1.2元/天×
30天×
90只=0.55万元。
清洁级BALB/c小鼠1080只(9大组,每小组分12小组,每小组10只),观察***及******给药后在小鼠体内的吸收、分布、代谢和排泄情况,小鼠单价25元/只,饲养费1.2元/天,需要饲养3天,共25元/只×
1080只+1.2元/天×
2天×
1080只=2.96万元。
清洁级******小鼠40只(4大组,每组10只),观察***及******给药后在小鼠体内的急性毒性实验,小鼠单价25元/只,饲养费1.2元/天,需要饲养7天,共25元/只×
40只+1.2元/天×
7天×
40只=0.14万元。
清洁级BALB/c小鼠40只(4大组,每组10只),观察***纯化蛋白及******蛋白刺激对BALB/c小鼠的长期毒性反应,小鼠单价25元/只,饲养费1.2元/天,需要饲养180天(6个月),共25元/只×
180天×
40只=0.86万元。
清洁级BALB/c小鼠290只,观察***纯化蛋白及******蛋白刺激对BALB/c小鼠神经系统的影响,小鼠单价25元/只,饲养费1.2元/天,需要饲养3天,共25元/只×
290只+1.2元/天×
3天×
290只=0.82万元。
清洁级BALB/c小鼠80只,观察***纯化蛋白及******蛋白刺激对BALB/c小鼠免疫原性和免疫毒性实验,小鼠单价25元/只,饲养费1.2元/天,需要饲养3天,共25元/只×
80只+1.2元/天×
80只=0.23万元。
B.清洁级SD大鼠,用于构建******大鼠模型:
共0.58万元
清洁级SD大鼠90只(9大组,每组10只),观察***蛋白及******对自身免疫性关节炎模型大鼠的治疗作用,大鼠单价28元/只,饲养费1.5元/天,需要饲养30天,共28元/只×
90只=0.58万元。
C.Beagle犬24只,用于安全性药理实验,beagle犬单价3000元/条,饲养费30元/天,需要饲养30天,共3000元/条×
24只+30元/天×
24条=9.36万元。
D.中国仓鼠80只(8大组,每组10只),评价重组Sj16及******蛋白在哺乳类体外培养细胞中引起的染色体损伤。
中国仓鼠单价25元/只,饲养费2.0元/天,需要饲养30天,共25元/只×
80只+2.0元/天×
25只=0.35万元
(5)细胞因子检测试剂盒:
合计3.3万元。
主要用于***和S******药效学研究中关于治疗自身免疫性肠炎模型和自身免疫性脑脊髓炎模型实验中血清中相关细胞因子的检测,主要包括IL-1β、TGF-β、IL-6、IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-12和TGF-β检测试剂盒。
单价/元
数量
小计/元
小鼠IL-4ELISA检测试剂盒
3500
小鼠IL-5ELISA检测试剂盒
小鼠IFN-γELISA检测试剂盒
小鼠IL-12ELISA检测试剂盒
小鼠TGF-βELISA检测试剂盒
大鼠IL-1ELISA检测试剂盒
7
大鼠TGF-βELISA检测试剂盒
大鼠IL-6ELISA检测试剂盒
9
大鼠IL-4ELISA检测试剂盒
CCK8检测试剂盒
1500
合计
33000
(6)常用生化试剂:
合计7.09万元.
主要用于配置培养基、琼脂糖凝胶电泳缓冲液、SDS-PAGE蛋白电泳液以及其他常规生化试剂等。
胰蛋白胨
350
10500
酵母提取物
150
4500
蛋白Marker
300
9000
琼脂糖
Tris
无水乙醇
15
50
2250
PBS
100
3000
工业酒精
900
DNAmarker
250
7500
蛋白marker
400
12000
11
其他
5000
15000
70965
(7)常规耗材:
合计11.71万元.
主要用于常规分子克隆、表达纯化以及动物实验中使用的耗材。
0.2ml进口PCR反应管/箱
2600
7800
国产吸头10ul/箱
18000
国产吸头200ul/箱
4000
24000
国产吸头1000ul/箱
国产50ml/15ml/10ml/1.5ml/1ml离心管/箱
1200
1*5
一次性PE手套/箱
600
3600
乳胶手套/箱
800
4800
口罩/箱
帽子/箱
1800
75cm细胞培养瓶/箱
25cm细胞培养瓶/箱
2400
12
10ml移液管/箱
13
巴氏吸管/箱
14
酶标板
450
1350
其它
2000
6000
117150
3、测试化验加工费:
19.5万元
(1)HPLC检测费用:
4.0万元
用于***及******药代动力学研究过程中利用HPLC观察***及******给药后在小鼠体内的吸收和分布状况。
在******学院进行,200元/h,大约需要使用200h,合计4.0万元。
(2)免疫病理切片制作:
3.0万元。
主要用于观察***及******对于治疗******肠炎模型和自身******模型实验中,通过免疫病理切片观察实验动物心、脑、肝、肾等主要脏器的病理变化。
其中自身免疫性肠炎模型共9组,每组取5只小鼠,脊髓颈、胸、腰骶段HE染色和******髓鞘染色,每只小鼠每个部分切5张片子,共675片;
自身免疫性肠炎大鼠模型共9组,每组取5只小鼠,HE染色镜下观察结肠粘膜损害程度,每只小鼠切5张片子,共225片;
急性毒性实验和长期毒性实验中HE染色观察***及******处理后对小鼠主要脏器的影响,每个实验共4组,每组取5只小鼠,每只小鼠每个部分(心、脑、肝、肾、脾等)切5张片子,共200片;
免疫毒性实验及免疫原性实验中,HE染色观察***及******处理后对小鼠胸腺和脾脏的影响。
共8组,每组取5只小鼠,每只小鼠切5张片子,共200片。
共1200片。
委托中山大学******教研室完成,25元/片,合计25元/片×
1200片=3.0万元。
(3)测序及引物设计费:
2.05万元。
用于在***蛋白纯化技术优化过程中对***关键氨基酸进行优化设计引物,进行PCR测序,主要委托英潍捷基(上海)贸易有限公司完成.
普通引物约50对,主要委托******贸易有限公司完成,1.2元/碱基,每对引物平均38-45碱基,约50元每对/OD,大约每对引物需要5OD,大约需要合成50对,总共50元/对/OD×
50对×
5OD=1.25万元。
平均40元/样本(含PCR产物测序前纯化),大约需检测200个样本,40元/样本×
200样本=0.8万元。
(4)多肽合成费用:
用于合成标准化的******,委托上海******公
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