微生物培养基种类大全.docx
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微生物培养基种类大全
摘要:
1、营养琼脂(普通琼脂)成份:
牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:
将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:
作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)制法:
取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养
1、营养琼脂(普通琼脂)
成份:
牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升
琼脂(视天气,琼脂质量而定)
制法:
将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。
用途:
作普通琼脂平皿。
2、血琼脂平板(BA)
制法:
取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。
用途:
1.一般棉拭子均接种此培养基。
2.尿液,脓液
3.分离细菌标本用。
3、基础培养基(肉膏汤BB)
成份:
蛋白胨10克牛肉膏5克
氯化钠5克水1000毫升
制法:
将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NNOH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。
用途:
1作耐药试验,增菌用分装小管。
2作普通琼脂斜面。
4、血液培养基(大管肉汤培养基)
成份:
1新鲜牛肉浸液1000毫升
2PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)1g%1毫升
3MgSO
4[相当于0.493/100毫升]49.3%1毫升
4枸椽酸钠0.3g
制法:
1将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。
2取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。
用途:
作血,骨髓培养用。
5、肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)
成份:
蛋白胨10克乳糖10克
氯化钠5克琼脂25(22)克
水1000毫升2%伊红溶液20毫升
0.5%美兰溶液20毫升
制法:
将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。
(高压以后方可再加乳糖)用途:
用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。
1
6、罗文斯坦培养基
成份:
磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克
枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克
纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升
马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)
2%孔雀绿水溶液20毫升
制法:
1除鸡蛋外(还有孔雀绿)。
可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。
2鸡蛋用75%酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。
3将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。
4间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。
质控标准:
1灭菌试验合格。
2接种结核杆菌要求两星期生长良好。
用途:
作结核分枝杆菌培养用。
7、结核半固体培养基
成份:
磷酸氢二钠19克硫酸镁0.6克
磷酸二氢钾2.5克天门冬素5克
1%孔雀绿1.5克甘油20毫升
吐温80(10%)5毫升水1000毫升
枸椽酸钠2.5克动物血清100毫升
琼脂1.5克(80小时用甲醇去脂)
1%孔雀绿0.78毫升吐温80(10%)5毫升
加动物血清100毫升
制法:
1除血清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。
2
2分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。
3待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。
4去除琼脂方法:
取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。
质控标准:
1无菌实验合格。
2琼脂硬度合适而清亮。
3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。
用途:
培养结核杆菌用。
8、亚碲酸钾血琼脂平板
成份:
琼脂基础100毫升10%葡萄糖2毫升
1%亚碲酸钾4.5毫升绵羊血10毫升
制法:
1将琼脂基础溶解好,加入羊血。
2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,凝固后存冰箱备用。
质控标准:
接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。
用途:
供培养及鉴别白喉杆菌用。
9、米培养基
成份:
白米20克水1000毫升
琼脂20克吐温8010毫升
制法:
1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。
2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。
3加琼脂20克,吐温-8010毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。
质控标准:
1灭菌。
2要求清亮。
3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。
用途:
培养白色念珠菌用。
10、蛋白胨水培养基
成份:
蛋白胨1克氯化钠0.5克
水加至100毫升PH调至7.8
制法:
把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。
质控标准:
1放置37℃无菌生长。
2接种大肠杆菌24小时生长良好。
3可作中国兰平板基础液。
可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。
11、血培养基
成份:
蛋白胨10克牛肉膏5克
氯化钠5克葡萄糖3克
枸椽酸钠3克MgSO4。
7H2O20毫升
0.5%PABA10毫升酵母浸液10毫升0.2克(2%过滤)
*酚红0.4%6毫升水1000毫升
琼脂0.5克
*:
作大BB,小BB时,不要加酚红和琼脂。
制法:
1、除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7.4
2、调好PH后再加酚红。
3、硫酸镁、PABA另外无菌再加入(亚细,小BB)
12、沙氏培养基
成份:
蛋白胨1克水100毫升琼脂1.5克(琼脂粉1克%)葡萄糖或麦芽糖4克
制法:
1将上述物质称好,放入水中煮沸溶解(不必调PH即有5左右)分中号试管(约4毫升)包扎,高压115℃20分钟。
2趁热斜好,凝固备用。
质控标准:
1无菌试验合格。
2接种霉菌比在其它培养基上生长良好,其它菌生长不好。
用途:
作分离培养霉菌用。
注意:
1接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12.5%氯霉素沙氏斜面培养基上。
2也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。
13、肉渣培养基
成份:
牛肉渣牛肉浸液(牛肉膏)
制法:
将做牛肉浸液的牛肉渣,装入试管,高约3毫米,加入牛肉浸液或牛肉膏汤(PH7.6)约5毫升,比肉渣高一倍,液面上加入已溶解的凡士林,高约0.5厘米(不加也可),121℃高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用。
用途:
用于厌氧菌培养。
注意:
如无肉渣也可用牛、羊血等代替,将血块先放入水内煮沸,取出成小块,血块在加热后摇匀成碎颗粒状。
14、单糖发酵管培养基(半固体)
成份:
PH7.6-7.8蛋白胨水1000毫升(0.3克/100毫升)
1.2%酚红液0.4毫升
琼脂0.4-0.5克
10%糖或醇10毫升
制备:
把蛋白胨水,琼脂加热溶解,然后加1.2%酚红液0.4毫升,10%糖10毫升,混匀,分装试管,每管约2-3毫升,经115℃高压灭菌20分钟后,分置于试
管架上,贴上各类糖或醇类标签备用。
质控标准:
细菌发酵糖类或醇而产生酸,能使培养基PH改变,指示剂由红变黄色,如因发酵产生气体则半固体内产生气泡,如有动力则半固体由清亮变混浊。
15、明胶培养基
成份:
肉浸液1000毫升(牛肉浸膏5克)
明胶12克
制法:
100毫升肉浸液中,加入明胶12克,隔水加热煮化,校正PH7.2,分装小号试管,用阿诺氏间歇灭菌80℃30分钟,连续3日,或者108℃高压20分钟,冷却,贮存备用。
15-1、碱性蛋白胨水
成份:
蛋白胨20克氯化钠5克
硝酸钾0.1克结晶碳酸钠(NaclCO3.12H2O)0.2克
水1000毫升
制法:
将蛋白胨,Nacl,硝酸钾,结晶碳酸钠称好,溶于1000DW中,校正PH8.4分装试管,121℃高压灭菌15分钟后备用。
用途:
用于霍乱弧菌培养。
16、葡萄糖蛋白胨水(M。
V用)
成份:
蛋白胨5克葡萄糖5克
K2HPO45克水1000毫升
制法:
将上述称好溶解分装试管,调PH7.4高压灭菌115℃灭菌20分钟,或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管
标准:
灭菌试验合格。
接种大肠杆菌VP阴性,M阳性;接种产气杆菌VP阳性,M阴性。
用途:
作鉴别肠道杆菌用。
17、枸椽酸盐培养基
成份:
磷酸二氢铵0.1克硫酸镁0.02克
磷酸氢二钾0.1克枸椽酸钠0.23--0.5克(0.36)
氯化钠0.5克琼脂1.5克
0.5%溴麝香草酚兰2毫升(调PH6.8再加)
制法:
将上述称好,放入水中煮沸溶解,调PH6.8,然后分装中号试管,高压灭菌,趁热倒呈斜面,凝固
后备用。
标准:
1、灭菌试验合格,培养基呈果绿色适宜。
2、接种大肠杆菌,培养基上不生长,也不变色。
3、接种产气杆菌,培养基呈深兰色。
用途:
作鉴别大肠杆菌用。
18、双糖铁培养基
成份:
下层:
蛋白胨1克氯化钠0.5克
葡萄糖0.2克琼脂0.3-0.5克
水100毫升
将上述物质混匀调PH7.6后加1.2%酚红0.4毫升
上层:
蛋白胨1克氯化钠0.5克
乳糖1克硫代硫酸钠0.03克
硫酸亚铁0.02克琼脂1克
水100毫升
制法:
1将下层配好,分装中号试管(1毫升),塞好包扎,15磅高压灭菌半小时,使凝固后备用。
2制上层时,先将蛋白胨水制好,加入硫酸亚铁,硫代硫酸钠,加热溶解PH8.1,再加入酚红分瓶,(每瓶300毫升,称取琼脂包扎灭菌,趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟)。
3取已制的下层管,每管用无菌法倒入上层液约1。
5毫升,边斜放置使成斜面,凝固后备用。
标准:
无菌试验合格,接种大肠杆菌下层产酸产气,上层产酸。
19、尿素培养基
成份:
蛋白胨0.1克氯化钠0.5克
磷酸二氢钾0.2克尿素0.2克(或10%2毫升)
葡萄糖0.01克(或10%葡萄糖0.1毫升)
H2O100毫升酚红(0.2%)0.4毫升
制法:
1除葡萄糖,尿素外把其它药品称好放入水中煮沸,使溶解,调PH7.2过滤,15磅高压灭菌15分钟.
2配制尿素(灭菌)液:
每100毫升基液内加2毫升.
3配制10%葡萄糖(灭菌)每100毫升加0.1毫升.
4分装小试管待用.
标准:
1灭菌试验合格.
2接种变形杆菌24小时呈红色.
用途:
鉴定变形杆菌用.
20、胆盐中性红琼脂
成份:
蛋白胨琼脂PH7.2-7.45000毫升
胆盐2.5克
乳糖5.0克
对氨基苯甲酸25毫克
1%中性红溶液25毫升
制法:
将胆盐,对氨基苯甲酸,乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中,待冷至50-60℃时,加入1%中性红液2.5毫升,混合后即倾注平皿,凝固待用.
*:
1%中性红:
1克中性红加酒精60毫升,加水40毫升
21、丙二酸盐培养基(缩苹果酸钠)
成份:
丙二酸钠0.3克酵母浸膏0.1克
Nacl0.2克硫酸铵0.2克
K2HPO40.06克K
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