活体成像技术活细胞成像Word格式.docx
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同时,还必须掌握所研究的对象在时间上的变化,即代谢情况。
这一点,包括两种含义,即要了解同一器官不同时间量上的变化,也要了解不同时间点不同脏器内分布的变化,同样离不开精确的定位。
1.肿瘤方面的应用(应用的成像技术:
X光、荧光、发光)
例一:
使用荷有4T1luc肿瘤细胞的小鼠模型;
肿瘤细胞稳定表达生物素酶,通过生物发光技术显示肿瘤位置;
用CY5.5近红外荧光染料标记VEGF(血管内皮生长因子)的单链抗体,静脉注射后,采用荧光成像技术显示抗体体内分布和代谢信息。
活体成像表明,这种抗体可以特异性结合到肿瘤细胞上,成为一种新的肿瘤标示物。
MarinaVBacker1,ZoyaLevashova,NATUREMEDICINE2007,13(4):
504-509
例二:
前列腺癌的生物发光成像:
深层的前列腺癌成像,辅以肾造影剂显示的膀胱显影,进行精确的肿瘤定位。
例三:
肺癌的生物发光成像:
深层脏器的生物发光成像。
B,timecoursefortheinvivoimagingofprimary
tumorandtumormetastasis(arrows)inxenograftsofPC-3andDU145transfectedwithDsRed
2、药学研究的应用(使用X光、同位素和荧光三种模块)
CCPM是一种新型的荧光染料,可以用作肿瘤细胞的特异性标示;
DTPA则为常见原料药。
采用乳腺瘤裸鼠模型,通过尾静脉注射In111标记的DTPA-CCPM分子,利用放射性同位素成像和近红外荧光成像技术,在不同时间点进行活体成像,观察染料分子在体内的分布与代谢情况。
结果显示,这种染料分子可以特异性靶向到肿瘤细胞,并表现出良好的半衰期,展现了很好的药用前景,为肿瘤治疗研究提供新工具。
ZhiYang,ChunLi,Biomacromolecules2007,8(11):
3422-3428
使用同位素In111标记特异性靶向小鼠肿瘤细胞的药物分子,口腔给药后,在不同时间点进行活体成像,可以看到,随时间推移,药物分子逐步靶向肿瘤,最后非特异结合的药物代谢出体外,特异性结合在肿瘤细胞上的药物清晰展示肿瘤所在位置和大小。
3、纳米材料研究的应用(使用白光、荧光蛋白和荧光标记三种技术)
使用裸鼠动物模型,皮下接种稳转GFP和RFP的肿瘤细胞。
所用纳米材料,共标记三种分子,一是CY5.5近红外荧光染料,二是抑制GFP表达的siRNA,三是协助靶向的一种跨膜多肽MPAP。
静脉注射后48小时成像,结果显示,纳米材料已富集到肿瘤部位,GFP表达水平显著下降,但RFP表达未受影响。
此实验揭示一种纳米材料可以承担多重生物反应作用,不仅可以进行活体成像,还可以携带药物进行肿瘤治疗。
ZdravkaMedarova,WellingtonPham,NATUREMEDICINE2007,13(3):
372-377
不同水平检测举例
1.整体和组织水平
2.组织细胞水平
DIABETES,VOL.54,JUNE2005
3.细胞水平
其他功能:
体外分析功能:
主要用于活体实验后的分子水平的验证实验,包括多色荧光成像、化学发光成像、同位素成像、白光成像等。
文献列表
1.LINE-1ActivityinFacultativeHeterochromatinFormationduringXChromosomeInactivation.Cell141(6)pp.956-969
2.DistinctFactorsControlHistoneVariantH3.3LocalizationatSpecificGenomicRegions.Cell140(5)pp.678-691
3.MeioticChromosomeHomologySearchInvolvesModificationsoftheNuclearEnvelopeProteinMatefin/SUN-1.Cell139(5)pp.920-933
4.CytoskeletalForcesSpantheNuclearEnvelopetoCoordinateMeioticChromosomePairingandSynapsis.Cell139(5)pp.907-919
5.MitochondrialDysfunctionLeadstoNuclearGenomeInstabilityviaanIron-SulfurClusterDefect.Cell137(7)pp.1247-1258
6.Centromere-SpecificAssemblyofCENP-ANucleosomesIsMediatedbyHJURP.Cell137(3)pp.472-484
7.DEX-1andDYF-7EstablishSensoryDendriteLengthbyAnchoringDendriticTipsduringCellMigration.Cell137
(2)pp.344-355
8.RAP1IsEssentialforSilencingTelomericVariantSurfaceGlycoproteinGenesinTrypanosomabrucei.Cell137
(1)pp.99-109
9.EpigeneticReprogrammingandSmallRNASilencingofTransposableElementsinPollen.Cell136(3)pp.461-472
10.Dbf4-DependentCdc7KinaseLinksDNAReplicationtotheSegregationofHomologousChromosomes
inMeiosis.Cell135(4)pp.662-678
11.ACF7RegulatesCytoskeletal-FocalAdhesionDynamicsandMigrationandHasATPaseActivity.Cell135
(1)pp.137-148
12.InVivoImagingofoskarmRNATransportRevealstheMechanismofPosteriorLocalization.Cell134(5)pp.843–853
13.FinalStagesofCytokinesisandMidbodyRingFormationAreControlledbyBRUCE.Cell132(5)pp.832-845
14.RegulationofaLatePhaseofTCellPolarityandEffectorFunctionsbyCrtam.Cell132(5)pp.846-859
15.PhosphorylationoftheAxialElementProteinHop1byMec1/Tel1EnsuresMeioticInterhomologRecombination.Cell132(5)pp.758-770
16.NeuroepithelialStemCellProliferationRequiresLIS1forPreciseSpindleOrientationandSymmetricDivision.Cell132(3)pp.474-486
17.TheTelomereBouquetControlstheMeioticSpindle.Cell130
(1)pp.113-126
18.NewHistoneIncorporationMarksSitesofUVRepairinHumanCells.Cell127(3)pp.481-493
19.DEP-Domain-MediatedRegulationofGPCRSignalingResponses.Cell126(6)pp.1079-1093
20.SpatiotemporalFeedbackbetweenActomyosinandFocal-AdhesionSystemsOptimizesRapidCellMigration.Cell125(7)pp.1361-1374
21.ACF7RegulatesCytoskeletal-FocalAdhesionDynamicsandMigrationandHasATPaseActivity.Cell135
(1)pp.137-148
22.InVivoImagingofoskarmRNATransportRevealstheMechanismofPosteriorLocalization.Cell134(5)pp.843-853
23.FinalStagesofCytokinesisandMidbodyRingFormationAreControlledbyBRUCE.Cell`132(5)pp.832-845
24.RegulationofaLatePhaseofTCellPolarityandEffectorFunctionsbyCrtam.Cell132(5)pp.846-859
25.PhosphorylationoftheAxialElementProteinHop1byMec1/Tel1EnsuresMeioticInterhomologRecombination.Cell132(5)pp.758-770
26.NeuroepithelialStemCellProliferationRequiresLIS1forPreciseSpindleOrientationandSymmetricDivision.Cell132(3)pp.474-486
27.Quies
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