尿微量白蛋白UALB免疫比浊定量QuikRead仪器法作业指导书Word格式.docx
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采集的夜尿样本,要求至少采集6小时的夜尿。
记录采集尿样本的时间和尿量。
白蛋白的排泄率可根据以下公式计算:
总尿量(ml)*QuikReadU-ALB浓度值(mg/l)/采集时间(min)=尿微量白蛋白的排泄率(ug/min)
随机尿样本:
在随机尿样本中,使用首次晨尿样本可获得十分可靠的结果。
贮存样本在测试以前要求尿样本达到室温。
3.标本储存:
尿样本2-8℃可贮存14天。
尿样本不应当被冰冻保存。
4.标本运输:
室温运输
5.标本拒收标准:
细菌污染、乳糜尿
6.试剂
6.1试剂名称:
QuikReadU-ALB试剂
6.2试剂生产厂家:
OrioncoporationOrionDiagnostica
6.3包装规格:
50Test/kit
6.4试剂盒组成:
6.5试剂储存条件及有效期:
试剂2-8℃贮存。
缓冲液可在室温下(2-25℃)贮存。
试剂的稳定性可达到试剂盒上印的有效期。
7.仪器设备
7.1仪器名称:
QuikRead分析仪
7.2仪器厂家:
基恩科技有限公司
7.3仪器型号:
QuikRead型
7.4仪器通道选择:
采取两个发光二极管:
654μm,950μm;
吸收范围:
0.0-2.5
7.5仪器校准程序:
每个试剂盒有一个已知的校正数据,它记录在磁卡上,用以确定分析曲线,让磁卡通过仪器上读卡器,该数据信息就能送入QuikRead仪器之中,然后仪器就处于等待使用状态。
8.操作步骤
8.1Readthecard(阅读磁卡):
将磁卡在仪器的阅读槽中刷过,磁卡的磁带面向自己。
8.2ReadyforuseU-ALB(准备进行U-ALB测定)
8.3Measuringblank
8.3.1使用QuikRead分液器加1ml缓冲液到比浊管中。
8.3.2用毛细吸管加20μl不稀释的尿样本到比浊管中。
(参照注意事项)
8.3.3将U-ALB试剂帽盖于比浊管上拧紧。
轻轻混匀(不能颠倒)。
不要按压试剂帽的内侧部分。
不要触摸比浊管下部的光洁部分(光学测定部分)。
8.3.4把比浊管插入到仪器的检测孔中
8.4Blankmeasure(测定空白):
仪器测定样品空白。
这最多需要30秒时间。
在检测孔中读空白期间不要触摸比浊管。
8.5Addreagent(加试剂)
8.5.1按下试剂帽的内侧部分(例如,可以用手指或者一支笔来按)。
如此将使U-ALB干粉试剂加到比浊管中。
8.5.2从检测孔中拿出比浊管,快速地颠倒混匀。
比浊管中的溶液变成白色混合物。
8.6Shakethecuvette(混匀试管):
屏幕显示:
告诉你需要多长时间来混匀比浊管(6秒时间)。
移动的一串点表示你混匀的速度。
8.7Insertthecuvetteformeasurement(插入比浊管进行测定):
混匀结束后仪器发出三次短暂的嘟嘟声,立即放置比浊管于仪器的检测孔中。
假如比浊管没有放置检测孔中,三秒钟后试验将作废。
注意1:
不要触摸比浊管下部的光洁部分(光学测定部分)
注意2:
假如比浊管没有在规定的时间内放置于检测孔中仪器将显示信息“cuvetteinsertedtoolate(比浊管插入太晚)”
8.8Measuring120s(测定120s):
仪器在2分钟内测定出尿微量白蛋白的浓度。
结果显示在屏幕上,单位是mg/l.在实验完成之前屏幕上显示实验所需的最多剩余时间。
在结果没有出来并记录下来之前,不要将比浊管从测定孔中拿出来。
如果拿出来的话会立刻中断测定。
检查试剂帽的底部塑料物是否脱落在比浊管的下部。
如果在比浊管的下部存在试剂帽的底部塑料物,这可能干扰检测过程。
9.结果判断与分析:
QuikRead在5-150mg/l之间直接从仪器屏幕给出数字值。
10.质量控制:
定期使用U-ALB质控液(Cat.No.67881)。
QuikReadU-ALB质控液的瓶子上标有U-ALB的靶值。
11.计算:
直接读取屏幕上显示的数字结果即可。
12参考值范围:
夜尿样本:
<
20μg/min;
随机尿样本:
20mg/L
13.临床意义:
尿微量白蛋白升高是糖尿病、高血压病并发肾病的早期的危险指标。
肾病是糖尿病最普遍的并发症之一,国际上认为糖尿病病人应当监控早期肾病
(1)。
由于微量白蛋白提示早期肾病,因此糖尿病病人每年应当进行多次尿白蛋白的检测。
微量白蛋白尿的及时检测十分重要因为时期干预能阻止甚至逆转肾病的进程。
由于高血压病人可能发展成为微量白蛋白尿,因此定期检测尿白蛋白浓度对他们也十分有益
(2)。
微量白蛋白尿被定义为夜尿样本中白蛋白的排泄率为20-200ug/min或者随机尿样本中白蛋白的浓度为20-200mg/L。
在3-6个月期间三次尿样本中至少有二次阳性被诊断为微量白蛋白尿(3)。
14.操作性能
14.1方法成熟、结果可靠、操作简便、报告快速(3分钟内出结果)、采样方便(20μl尿液)、定量测试(5-150mg/L)、尿蛋白在40g/L范围内不会出现抗原过剩无须尿蛋白化学检测预筛。
14.2回收率:
90%-107%(126mg/L)
14.3检测极限:
5mg/L
15.超出范围结果处理
15.1仪器设有一套抗原过剩检测系统,因此白蛋白浓度超过150mg/L和达到40000mg/L时仪器显示“>
150mg/L”。
15.2较高的浓度如果需要更精确的值时,必需稀释样品并重新进行测定。
例如:
使用0.9%NaCl对比较高浓度的尿样本进行1:
5(1+4)或者1:
25(1+24)预稀释,测定稀释的尿样本结果乘以稀释比例。
稀释比例1:
5稀释比例1:
25
1)吸取250μl原尿1)吸取100μl原尿
2)加入0.9%NaCl1ml2)加入0.9%NaCl2400μl
3)混匀稀释的尿样本3)混匀稀释的尿样本
4)和测定原尿样本相同4)和测定原尿样本相同
的方法进行分析的方法进行分析
5)最后尿微量白蛋白的5)最后尿微量白蛋白的结果乘以5结果乘以25
16.方法局限性
16.1试剂中含有<
0.1%叠氮钠作为防腐剂。
叠氮物会和金属反应生成易爆炸的化合物,因此,如有溢出应用水清洗掉。
16.2白蛋白试剂帽中含有<
如果吸入、吞下或者经皮肤接触进入人体对人体是有害的。
17.当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:
当检验系统(仪器)不能工作时,可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。
18.参考文献
18.1VibertiGC,MongensenCE,PassaP,etal.StVincentdeclaration,1994:
Guidelineforthepreventionofdiabeticrenalfailure.
18.2BigazziR,BianchiS,BaldariDandCampeseV.Microalbuminuriapredictscardiovasculareventsandrenalinsufficiencyinpatientswithessentialhypertension.JHypertension,1998;
16,1325-1333.
18.3MogensenCE,KeaneWF,BennettPH,etal.Preventionofdiabeticrenaldiseasewithspecialreferencetomicroalbuminuria.Lancet,1995;
346,1080-1084
19.注意事项
19.1本试剂只使用于体外测定使用。
19.2不要用过期的试剂。
19.3质控液中含有来源于人体的材料,已经过测定,HIV、HCV、HBsAg呈阴性,所有材料在56℃1小时已失去活性,但仍当它为传染源处理。
19.4所有的试剂在使用前必须达到室温。
使用未稀释的样本。
19.5分液器可准确分液1ml。
将分液器装到缓冲液瓶上并拧紧。
先分几次缓冲液确定分液器功能完好,已分出的缓冲液丢弃不用。
瓶中的缓冲液有多余的以用于可能需要的分液器功能的检查。
缓缓的将分液器的活塞压到底,避免剧烈地压活塞。
压一次分出1ml缓冲液。
为了避免污染,分液器只能用于QuikRead.
19.6试剂帽中含有白蛋白试剂不能暴露接触水分。
不用的时候应仔细地盖紧铝盖。
19.7磁卡不能弯折或者接触液体或者强磁体。
19.8不能混用不同批号的试剂和磁卡。
19.9QuikReadU-ALB试剂帽标记有绿颜色以区别于其他分析试剂。
19.10建议所有使用过的试剂和材料丢弃前经过高压灭菌(121℃1小时)处理。
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