内分泌疾病实验诊断技术新进展PPT资料.ppt
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1992年年灵敏度可达灵敏度可达10-21、特异性高特异性高l高效液相色谱分析高效液相色谱分析l毛细管电泳法毛细管电泳法激素测定的技术激素测定的技术激素测定的技术激素测定的技术l光谱分析技术:
光谱分析技术:
光谱法、紫外光谱法、原子吸收光谱法、荧光谱法、紫外光谱法、原子吸收光谱法、荧光光谱法、火焰光谱法、化学、生物发光光光光谱法、火焰光谱法、化学、生物发光光谱法谱法l放射受体分析放射受体分析甲状腺疾病实验室检查甲状腺疾病实验室检查血清甲状腺激素测定血清甲状腺激素测定TT4、TT3、FT4和和FT3甲状腺素甲状腺素(T4)全部由甲状腺分泌全部由甲状腺分泌三碘甲腺原氨酸三碘甲腺原氨酸(T3)20%20%直接来自甲状腺直接来自甲状腺,80%,80%在外在外周组织中由周组织中由TT4经脱碘代谢转化而来经脱碘代谢转化而来TT3是甲状腺激素在组织中的生物活性形式是甲状腺激素在组织中的生物活性形式循环循环TT4约约99.98%99.98%与特异的血浆蛋白相结合与特异的血浆蛋白相结合甲状腺素结合球蛋白甲状腺素结合球蛋白(TBG)6075%甲状腺素结合前白蛋白甲状腺素结合前白蛋白(TBPA)1530%白蛋白白蛋白(ALB)10%10%游离游离T4T4(FT4)仅约仅约0.02%0.02%循环中循环中T3约约99.7%特异性与特异性与TBG结合结合游离游离T3(FT3)约)约0.3%结合型甲状腺激素是激素的贮存和运输形式结合型甲状腺激素是激素的贮存和运输形式游离型甲状腺激素是甲状腺激素的活性部分游离型甲状腺激素是甲状腺激素的活性部分l直接反映甲状腺功能状态直接反映甲状腺功能状态l不受血清不受血清TBG浓度变化影响浓度变化影响总总T4(TT4)、总)、总T3(TT3)为结合型与游离型之和)为结合型与游离型之和。
正常成人血清正常成人血清TT4水平为水平为64154nmol/L(512g/dl)TT3为为1.22.9nmol/L(80190ng/dL)不同实验室及试剂盒略有差异不同实验室及试剂盒略有差异多采用竞争免疫测定法多采用竞争免疫测定法趋势趋势非核素标记(标记物为酶、荧光或化学发光物质)非核素标记(标记物为酶、荧光或化学发光物质)替代核素标记替代核素标记正常成人血清正常成人血清FT4为为925pmol/L(0.71.9ng/dL)FT3为为2.15.4pmol/L(0.140.35ng/dL)不同方法及实验室差异较大不同方法及实验室差异较大将游离型激素与结合型激素进行物理分离后将游离型激素与结合型激素进行物理分离后高敏免疫测定被认为是本测定的金标准,高敏免疫测定被认为是本测定的金标准,仅少数实验室能完成,一般仅用作制定参考值仅少数实验室能完成,一般仅用作制定参考值目前尚无可行的测定目前尚无可行的测定FT4的标准参照方法的标准参照方法目前大多数临床实验室测定目前大多数临床实验室测定FT4和和FT3所采用方法所采用方法(免疫测定或指数法免疫测定或指数法)并非直接测定游离激素,并非直接测定游离激素,测定结果仍受甲状腺激素结合蛋白浓度的影响测定结果仍受甲状腺激素结合蛋白浓度的影响称为称为“游离激素估计值游离激素估计值”更为合适更为合适即即FT4E和和FT3E蛋白质浓度高时蛋白质浓度高时FT4E过高估计过高估计FT4蛋白质浓度低时蛋白质浓度低时FT4E过低估计过低估计FT4免疫测定中的标记抗体法(免疫测定中的标记抗体法(labeledantibodymethods)是目前)是目前FT4和和FT3自动化测定中应用最多的方法自动化测定中应用最多的方法在某些情况下(如妊娠时)建议使用在某些情况下(如妊娠时)建议使用游离游离T4指数(指数(FT4I)和游离)和游离T3指数(指数(FT3I)FT4I=TT4T3U,FT3I=TT3T3UT3U为血清为血清T3树脂摄取试验中甲状腺激素结合比值树脂摄取试验中甲状腺激素结合比值(ThyroidHormoneBindingRatio,THBR)*强调各实验室应有自己的正常参考值范围并列于化验单上强调各实验室应有自己的正常参考值范围并列于化验单上应参加全国或相应各省市的中心质控应参加全国或相应各省市的中心质控TT4、TT3反映甲状腺功能状态最佳指标反映甲状腺功能状态最佳指标甲亢时增高,甲减时降低,一般平行变化甲亢时增高,甲减时降低,一般平行变化甲亢甲亢TT3增高常较增高常较TT4增高出现更早增高出现更早TT3对轻型甲亢、早期甲亢及甲亢治疗后复发诊断更敏感对轻型甲亢、早期甲亢及甲亢治疗后复发诊断更敏感T3型甲亢诊断主要依赖于型甲亢诊断主要依赖于TT3,TT4可不增高可不增高T4型甲亢诊断主要依赖于型甲亢诊断主要依赖于TT4,TT3可不增高可不增高甲减甲减TT4降低更明显,早期降低更明显,早期TT3可正常可正常许多严重的全身性疾病可有许多严重的全身性疾病可有TT3降低降低TT4在甲减诊断中起关键作用在甲减诊断中起关键作用凡是能引起血清凡是能引起血清TBG水平变化的因素均可影响水平变化的因素均可影响TT4、TT3测定结果,对测定结果,对TT4的影响较大的影响较大使使TBG增高而导致增高而导致TT4和和TT3测定结果假性增高的因素:
测定结果假性增高的因素:
妊娠、病毒性肝炎、遗传性妊娠、病毒性肝炎、遗传性TBG增多症增多症某些药物(雌激素、口服避孕药、吩噻嗪、三苯氧胺等)某些药物(雌激素、口服避孕药、吩噻嗪、三苯氧胺等)使使TBG降低而导致降低而导致TT4和和TT3测定结果假性降低的因素:
测定结果假性降低的因素:
低蛋白血症、遗传性低蛋白血症、遗传性TBG缺乏症缺乏症多种药物(雄激素、糖皮质激素、生长激素、利福平等)多种药物(雄激素、糖皮质激素、生长激素、利福平等)有上述情况时应测定游离甲状腺激素有上述情况时应测定游离甲状腺激素血清血清FT4和和FT3测定敏感性和特异性较好,稳定性较差测定敏感性和特异性较好,稳定性较差目前临床应用的任何一种检测方法都未能完全准确地目前临床应用的任何一种检测方法都未能完全准确地反映真正的游离激素水平反映真正的游离激素水平疾病影响:
血清疾病影响:
血清TBG明显异常、家族性异常白蛋白血明显异常、家族性异常白蛋白血症、内源性症、内源性T4抗体及某些抗体及某些NTI(如肾衰)等如肾衰)等药物影响:
胺碘酮、肝素等药物影响:
胺碘酮、肝素等FT4苯妥英钠、利福平等苯妥英钠、利福平等FT4TT4、TT3测定仍是判断甲状腺功能的主要指标测定仍是判断甲状腺功能的主要指标TSH测定方法主要方法主要方法灵敏度灵敏度功能功能(mU/L)第一代第一代RIA12诊断临床甲减诊断临床甲减无法诊断甲亢无法诊断甲亢第二代第二代IRMA0.10.2可以诊断甲亢可以诊断甲亢第三代第三代ICMA0.010.02第四代第四代TRIFA0.001*第二代第二代敏感敏感TSH(sTSH)测定)测定第三、四代第三、四代超敏超敏TSH(uTSH)测定)测定建议选择第三代以上的建议选择第三代以上的TSH测定方法测定方法TSH正常值参考范围正常值参考范围0.3-5.0mIU/L95%严格筛选的甲状腺功能正常志愿者严格筛选的甲状腺功能正常志愿者TSH值值0.42.5mIU/L建议将血清建议将血清TSH上限降低到上限降低到2.5mIU/L(未达成共识)(未达成共识)TSH值值0.10.4mIU/L老年人心房纤颤和心血管疾病危险性可能增加老年人心房纤颤和心血管疾病危险性可能增加需关注需关注TSH正常值参考范围的调整及变化正常值参考范围的调整及变化各实验室应当制定自己的各实验室应当制定自己的TSH正常范围正常范围美国临床生物化学学会(美国临床生物化学学会(NACB)建议)建议:
正常人:
120例、严格筛选例、严格筛选甲状腺自身抗体阴性(甲状腺自身抗体阴性(TPOAb、TgAb)无甲状腺疾病的个人史和家族史无甲状腺疾病的个人史和家族史未触及甲状腺肿未触及甲状腺肿未服用除雌激素外的药物未服用除雌激素外的药物TSH测定的临床应用测定的临床应用甲状腺疾病的筛选:
甲状腺疾病的筛选:
TSH-firststrategy诊断亚临床甲状腺疾病诊断亚临床甲状腺疾病监测原发性甲减监测原发性甲减L-T4替代治疗替代治疗TSH靶值靶值0.22.0mIU/L0.53.0(老年人)(老年人)监测分化型甲状腺癌(监测分化型甲状腺癌(DTC)L-T4抑制治疗抑制治疗TSH靶值靶值低危患者低危患者0.10.5mIU/L高危患者高危患者0.1美国甲状腺学会(美国甲状腺学会(ATA)甲状腺结节和分化型甲状腺癌诊断和治疗指南甲状腺结节和分化型甲状腺癌诊断和治疗指南(2006)低危患者低危患者指手术及指手术及131I清除治疗后无局部或远处肿瘤转移,肿瘤切清除治疗后无局部或远处肿瘤转移,肿瘤切除完全,无局部浸润,无恶性度较高的组织学特点及血管浸除完全,无局部浸润,无恶性度较高的组织学特点及血管浸润,治疗后第一次行润,治疗后第一次行131I全身扫描(全身扫描(WBS)时未见甲状腺外)时未见甲状腺外131I摄取。
摄取。
高危患者高危患者指肉眼可见肿瘤浸润,肿瘤切除不完全,有远处转移,或指肉眼可见肿瘤浸润,肿瘤切除不完全,有远处转移,或131I清除治疗后清除治疗后131I全身扫描(全身扫描(WBS)时可见甲状腺外)时可见甲状腺外131I摄取摄取。
甲状腺功能正常的病态综合征(甲状腺功能正常的病态综合征(euthyroidsicksyndrome,ESS)患者患者TSH检测:
检测:
建议采用较宽的建议采用较宽的TSH参考范围参考范围(TSH0.0210mIU/L)并联合应用并联合应用FT4/TT4测定测定中枢性甲减的诊断:
中枢性甲减的诊断:
原发性甲减当原发性甲减当FT4低于正常时,血清低于正常时,血清TSH值应大于值应大于10mIU/L,若若TSH正常或轻度增高,应疑及中枢性甲减正常或轻度增高,应疑及中枢性甲减不适当不适当TSH分泌综合征的诊断:
分泌综合征的诊断:
甲状腺激素水平增高而甲状腺激素水平增高而TSH正常或增高的患者需考虑本病,正常或增高的患者需考虑本病,但首先要排除结合蛋白异常和测定技术问题但首先要排除结合蛋白异常和测定技术问题。
甲状腺自身抗体测定甲状腺自身抗体测定TPOAb、TgAb和TRAbTPOAb一组针对不同抗原决定簇的多克隆抗体(一组针对不同抗原决定簇的多克隆抗体(IgG型为主)型为主)诊断自身免疫性甲状腺疾病诊断自身免疫性甲状腺疾病可能对于甲状腺细胞有细胞毒性作用可能对于甲状腺细胞有细胞毒性作用参与组织破坏过程,与甲状腺功能低下有关参与组织破坏过程,与甲状腺功能低下有关高度纯化的天然高度纯化的天然/重组的人重组的人TPO作为抗原作为抗原RIA、ELISA及及ICMA,敏感性和特异性明显提高,敏感性和特异性明显提高阳性切点值(阳性切点值(cu
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- 内分泌 疾病 实验 诊断 技术 进展