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吸入:
高挥发浓度可能导致头痛,晕眩和镇静。
皮肤:
能够灼伤皮肤并使皮肤有刺痛感,如同所见的皮疹及水泡一样。
若二甲基亚砜与含水的皮肤接触会产生热反应。
要避免接触含有毒性原料或物质的二甲基亚砜溶液,因其毒性不为人所知,而二甲基亚砜却可能会渗入肌肤,在一定条件下会将有毒物质代入肌肤。
吸收:
吸收危险性很低。
2.EB:
EB(Ethidiumbromide,溴化乙锭)溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。
溴化乙锭用标准302nm紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。
它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。
在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。
当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。
这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近,导致与DNA结合的染料呈现荧光,其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。
DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料,而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。
这两种情况下,被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。
由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍,所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭(0.5ug/ml)时,可以检测到少至10ng的NDA条带。
溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。
溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性!
会在6070度是蒸发(所以最好不要在胶太热的时候加,或者应该加到液体里,0.5ug/ml,染色半小时)(当EB加得过多时,也可以在室温用水将已染色的凝胶浸泡20min以降低未结合的EB引起的背景荧光)。
溴化乙锭溶液的净化处理:
由于溴化乙锭具有一定的毒性,实验结束后,应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置,以避免污染环境和危害人体健康。
(1)对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液,可如下处理:
将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml;
加入一倍体积的0.5mol/LKMnO4,混匀,再加入等量的25mol/LHCl,混匀,置室温数小时;
加入一倍体积的2.5mol/LNaOH,混匀并废弃。
(2)EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理:
按1mg/ml的量加入活性炭,不时轻摇混匀,室温放置1小时;
用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。
3.DEPC:
DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。
DEPC是一种潜在的致癌物质,在操作中应尽量在通风的条件下进行,并避免接触皮肤。
DEPC毒性并不是很强,但吸入的毒性是最强的,使用时戴口罩。
不小心占到手上注意立即冲洗,RNaseAwayTM试剂可以替代DEPC,操作简单,价格低,且无毒性。
只需将RNaseAwayTM直接倒在玻璃器皿和塑料器皿的表面,浸泡后用水冲洗去除,即可以快速去除器皿表面的RNase,并且不会残留而干扰后继实验。
4.丙烯酰胺:
属中等毒性物质。
可通过皮肤吸收及呼吸道进入人体,因此,在搬运和使用中必须穿戴好防护用具,如防毒服,防毒口罩及防毒手套等。
丙烯酰胺的危害主要是引起神经毒性,同时还有生殖、发育毒性。
神经毒性作用表现为周围神经退行性变化和脑中涉及学习、记忆和其他认知功能部位的退行性变化,试验还显示丙烯酰胺是一种可能致癌物,职业接触人群的流行病学观察表明,长期低剂量接触丙烯酰胺会出现嗜睡、情绪和记忆改变、幻觉和震颤等症状,伴随末梢神经病如手套样感觉、出汗和肌肉无力。
累积毒性,不容易排毒。
具备以下任何一项者,可列为慢性丙烯酰胺中毒观察对象:
a.接触丙烯酰胺的局部皮肤出现多汗、湿冷、脱皮、红斑;
b.出现肢端麻木、刺痛、下肢乏力、嗜睡等症状;
c.神经-肌电图显示有可疑神经源性损害。
治疗原则:
可用B族维生素、能量合剂,并辅以体疗、理疗及对症治疗。
重度中毒者应同时加强支持疗法。
5.NN-亚甲双丙烯酰胺,有毒,影响中枢神经系统,切勿吸入粉末。
6.DTT二硫苏糖醇,很强的还原剂,散发难闻的气味。
可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。
当使用固体或高浓度储存液时,戴手套和护目镜,在通风橱中操作。
7.TEMED强神经毒性,防止误吸,操作时快速,存放时密封。
8.PMSF:
苯甲基磺酰氟(PMSF),C7H7FO2S或C6H5CH2SO2F是一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。
它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性。
可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。
戴合适的手套和安全眼镜,始终在化学通风橱里使用。
在接触到的情况下,要立即用大量的水冲洗眼睛或皮肤,已污染的工作服丢弃掉。
9.氯仿(CHCl3)对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用。
它是一种致癌剂,可损害肝和肾。
它也易挥发,避免吸入挥发的气体。
操作时戴合适的手套和安全眼镜并始终在化学通风橱里进行。
10.甲醛(HCOH)有很大的毒性并易挥发,也是一种致癌剂。
很容易通过皮肤吸收,对眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激和损伤作用。
避免吸入其挥发的汽雾。
要戴合适的手套和安全眼镜。
始终在化学通风橱内进行操作。
远离热、火花及明火。
11.吉姆萨(Giemsa)染料咽下可致命或引起眼睛失明,通过吸入和皮肤吸收是有毒的。
其可能的危险是不可逆的效应。
戴合适的手套和安全护目镜。
在化学通风橱里操作,不要吸入其粉末。
12.叠氮钠(NaN3)毒性非常大。
它阻断细胞色素电子运送系统。
含有叠氮钠的溶液要标记清楚。
可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。
戴合适的手套和安全护目镜,操作时要格外小心。
13.十二烷基硫酸钠(SDS)有毒,是一种刺激物,并造成对眼睛的严重损伤的危险。
不要吸入其粉末。
14.三氯乙酸(TCA)有很强的腐蚀性。
戴合适的手套和安全防目镜。
15.TritonX-100引起严重的眼睛刺激和灼伤。
可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。
戴合适的手套和护目镜。
16.过硫酸铵,对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。
吸入可致命。
操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。
始终在通风橱里操作,操作完后彻底洗手。
17.Trizol含有毒物质苯酚,如皮肤接触Trizol。
请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。
如果只是少量接触,并处理后症状减轻,估计问题就不大了。
紫外光或紫外线可损伤眼视网膜。
切勿用裸眼和没有防护装置的紫外光源。
在实验室里常用的紫外光源包括手提式紫外灯和紫外透射仪。
只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。
紫外线也是诱变剂和致癌的。
为使暴露减少到最低限度,确保紫外光源要采用适当防护装置。
在紫外光下操作时要戴合适的预防性手套。
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