马传染性贫血防治技术规范修订稿文档格式.docx
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本病潜伏期长短不一,一般为20~40天,最长可达90天。
根据临床特征,常分为急性、亚急性、慢性和隐性四种类型。
急性型高热稽留。
发热初期,可视黏膜潮红,轻度黄染;
随病程发展逐渐变为黄白至苍白;
在舌底、口腔、鼻腔、阴道黏膜及眼结膜等处,常见鲜红色至暗红色出血点(斑)等。
亚急性型呈间歇热。
一般发热39℃以上,持续3~5天退热至常温,经3~15天间歇期又复发。
有的患病马属动物出现温差倒转现象。
慢性型不规则发热,但发热时间短。
病程可达数月或数年。
隐性型无可见临床症状,体内长期带毒。
2.3病理变化
2.3.1剖检变化
急性型主要表现败血性变化,可视黏膜、浆膜出现出血点(斑),尤其以舌下、齿龈、鼻腔、阴道黏膜、眼结膜、回肠、盲肠和大结肠的浆膜、黏膜以及心内外膜尤为明显。
肝、脾肿大,肝切面呈现特征性槟榔状花纹。
肾显著增大,实质浊肿,呈灰黄色,皮质有出血点。
心肌脆弱,呈灰白色煮肉样,并有出血点。
全身淋巴结肿大,切面多汁,并常有出血。
亚急性和慢性型主要表现贫血、黄染和细胞增生性反应。
脾中(轻)度肿大,坚实,表面粗糙不平,呈淡红色;
有的脾萎缩,切面小梁及滤泡明显;
淋巴小结增生,切面有灰白色粟粒状突起。
不同程度的肝肿大,呈土黄或棕红色,质地较硬,切面呈豆蔻状花纹(豆蔻肝);
管状骨有明显的红髓增生灶。
2.3.2病理组织学变化
主要表现为肝、脾、淋巴结和骨髓等组织器官内的网状内皮细胞明显肿胀和增生。
急性病例主要为组织细胞增生,亚急性及慢性病例则为淋巴细胞增生,在增生的组织细胞内,常有吞噬的铁血黄素。
2.4实验室诊断
2.4.1马传贫琼脂扩散试验(AGID)(见附件)。
2.4.2马传贫酶联免疫吸附试验(ELISA)(见附件)。
2.4.3马传贫病原分离鉴定(见附件)。
2.4.4结果判定
具备马传贫流行特点、临床症状、病理变化,可做出初步诊断;
2.4.1或2.4.2或2.4.3结果阳性,即可确诊。
3疫情报告
3.1任何单位和个人发现疑似疫情,应当及时向当地动物防疫监督机构报告。
3.2动物防疫监督机构接到疫情报告并确认后,按《动物疫情报告管理办法》及有关规定及时上报。
4疫情处理
4.1发现疑似马传贫病马属动物后,畜主应立即隔离疑似患病马属动物,限制其移动,并立即向当地动物防疫监督机构报告。
动物防疫监督机构接到报告后,应及时派员到现场诊断,包括流行病学调查、临床症状检查、病理解剖检查、采集病料、实验室诊断等,并根据诊断结果采取相应防治措施。
4.2在马属动物饲养地,确诊为马传贫病畜后,当地县级以上人民政府畜牧兽医行政管理部门应当划定疫点、疫区、受威胁区;
县级以上地方人民政府根据需要组织有关部门和单位采取隔离、扑杀、销毁、消毒、限制易感动物和动物产品及有关物品出入等控制、扑灭措施。
若呈暴发流行时,由当地畜牧兽医行政管理部门,及时报请同级人民政府决定对疫区实行封锁,逐级上报国务院畜牧兽医行政管理部门。
县级以上人民政府根据需要组织有关部门和单位采取隔离、扑杀等强制性控制和扑灭措施,并迅速通报毗邻地区。
4.2.1划定疫点、疫区、受威胁区
疫点指患病马属动物所在的地点,一般是指患病马属动物所在的养殖场(户);
散养时,是指患病马属动物所在的自然村(屯);
或其它有关屠宰、经营单位。
疫区疫点外延3公里范围内的区域,包括病畜发病前3个月经常活动,可能污染的地区。
疫区划分时注意考虑疫区的饲养环境和天然屏障(如河流、山脉等)。
受威胁区是指疫区外延5公里范围内的区域。
4.2.2封锁
疫区封锁期间,禁止染疫和疑似染疫的马属动物及其产品出售、转让和调群;
繁殖马属动物要用人工授精方法进行配种;
种用马属动物不得对疫区外马属动物配种;
对可疑马属动物要严格隔离检疫;
关闭马属动物交易市场。
禁止非疫区的马属动物进入疫区,并根据扑灭疫情的需要对出入封锁区的人员、运输工具及有关物品采取消毒和其它限制性措施。
4.2.3隔离
当发生马传贫时,要及时应用临床检查、血清学试验等方法对可疑感染马属动物进行检测,根据检测结果,将马属动物群分为患病群、疑似感染群和假定健康群三类。
立即扑杀患病群,隔离疑似感染群、假定健康群,经过3个月观察,不再发病后,方可解除隔离。
4.2.4监测
疫区内应对同群马属动物隔离饲养,所有马属动物每隔1个月进行一次血清学监测;
受威胁地区每3个月进行一次血清学监测。
4.2.5扑杀
患病马属动物、阳性马属动物在不放血条件下进行扑杀。
4.2.6无害化处理
病畜和阳性畜及其胎儿、胎衣、排泄物等按照GB16548《畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程》进行。
4.2.7消毒
对患病和疑似患病的马属动物污染的场所、用具、物品严格进行消毒;
受污染的粪便、垫料等必须采用堆积密封发酵1个月等方法处理。
4.2.8封锁的解除
封锁的疫区内最后一匹阳性马属动物扑杀处理后,并经彻底消毒等处理后,对疫区监测90天,未见新病例;
且经血清学检查3次(每次间隔30天),未检出阳性马属动物的,对所污染场所、设施设备和受污染的其它物品彻底消毒,经当地动物防疫监督机构检查合格后,方可由原发布封锁令机关解除封锁。
5预防与控制
5.1检疫
异地调入的马属动物,必须来自非疫区。
调出马属动物的单位和个人,应按规定报检,经当地动物防疫监督机构进行检疫(应包括血清学检查),合格后方可调出。
马属动物需凭当地动物防疫监督机构出具的检疫证明运输。
运输途中发现疑似马传贫病畜时,货主及运输部门应及时向就近的动物防疫监督机构报告,确诊后,由动物防疫监督机构就地监督畜主实施扑杀等处理措施。
调入后必须隔离观察30天以上,并经当地动物防疫监督机构两次临床综合诊断和血清学检查,确认健康无病,方可混群饲养。
5.2监测和净化
5.2.1马传贫控制区、稳定控制区采取“监测、扑杀、消毒、净化”的综合防治措施。
每年对全县6~12月龄的幼驹,用血清学方法监测一次。
如果检出阳性马属动物,除按规定扑杀处理外,应对疫区内的所有马属动物进行临床检查和血清学检查,每隔3个月检查一次,直至连续2次血清学检查全部阴性为止。
5.2.2马传贫消灭区采取“以疫情监测为主”的综合性防治措施,每县每年抽查存栏马属动物的1%(存栏不足10000匹的,抽检数不少于100匹,存栏不足100匹的全检),做血清学检查,进行疫情监测,及时掌握疫情动态。
6控制和消灭标准
6.1稳定控制标准
6.1.1县级稳定控制标准
A、全县(市、区或旗)范围内连续5年没有马传贫临床病例;
B、全县(市、区或旗)停止注苗一年后,连续两年每年抽检300匹份马属动物血清(不满300匹全检),经血清学检查,全部阴性。
6.1.2市级稳定控制标准
全市(地、盟、州)所有县(市、区、旗)均达到稳定控制标准。
6.1.3省级稳定控制标准
全省所有市(地、盟、州)均达到稳定控制标准。
6.1.4全国稳定控制标准
全国所有省(市、自治区)均达到稳定控制标准。
6.2马传贫消灭标准
6.2.1县级达到消灭标准,在达到稳定控制标准的基础上,还应符合以下条件:
全县(市、区或旗)范围内在达到稳定控制标准后,连续两年每年抽检200匹份马属动物血清(不满200匹者全检),血清学检查全部为阴性。
6.2.2市级马传贫消灭标准
全市(地、盟、州)所有县(市、区、旗)均达到消灭标准。
6.2.3省级马传贫消灭标准
全省所有市(地、盟、州)均达到消灭标准。
6.2.4全国马传贫消灭标准
全国所有省(市、自治区)均达到消灭标准。
附件1
马传染性贫血琼脂扩散反应试行操作方法
1检验用琼脂板的制备
1.1取高级琼脂糖1克或普通琼脂1.2克直接放入加有500mL蒸馏水的三角瓶中,配成2%的琼脂溶液,在沸水浴中煮沸,全融化后再冷凝,切成1~1.5cm3小块,装入干净砂布袋中,用10倍量自来水冲漂两天,每天换水两次,然后改用无离子水冲漂1~2天,每天换水两次。
将冲漂完毕的琼脂小块装入1000mL三角烧瓶中,同时加入500mL无离子水再加入相当于配制1000mL磷酸缓冲液(PBS液)或硼酸缓冲液(BBS液)的各种盐类用量,再加入1%硫柳汞溶液10mL,在沸水浴中使之全融化并混匀。
若是取优质琼脂1克时,可直接放入含有万分之一硫柳汞的100mL的PBS或BBS液中,用热水浴融化混匀。
1.2融化后以两层纱布夹薄层脱脂棉过滤,除去不溶性杂质。
1.3将直径90mm的平皿放在水平台上,每平皿倒入热融化琼脂液15~18mL,厚度约2.5mm左右,注意不要产生气泡,冷凝后加盖,把平皿倒置,防止水分蒸发,放在普通冰箱中可保存两周左右。
根据受检血清样品多少亦可采用大、中、小三种不同规格的玻璃板。
10×
16cm的玻璃板加注热琼脂液40mL;
6×
7cm的加注11mL;
32×
7.6cm的加注6mL。
琼脂经处理后配成的琼脂液,可装瓶中用胶塞盖好,以防水分蒸发,待使用琼脂板时,现融化现倒。
1.4打孔
反应孔现用现打。
打孔器为外径5mm直径的薄壁型金属打孔器。
在坐标纸上画好七孔型图案。
把坐标纸放在带有琼脂板的平皿或玻璃板下面,照图案在固定位置上用金属管打孔,将切下的琼脂板取出,勿使琼脂膜与玻璃面离动。
外周孔径为5mm,中央孔径为5mm,孔间距3mm,如图1所示。
图17孔型
(1)
(2)
(3)G(4)
(5)(6)
当受检血清数量多时,可用如图2所示的检测40份血清的图案。
图240孔型
010203040506
+G+G+G+
070809101112
1314151617181920
+G+G+G+G+
2122232425262728
293031323334
353637383940
注解:
图1、图2中的“G”字周围应有圆圈。
2抗原
检验用抗原按马传贫琼扩抗原生产制造及检验规程进行生产。
3血清
3.1检验用标准阳性血清:
能与合格抗原在12小时内产生明显致密的沉淀线的马传贫血清,做8倍以上的稀释仍保持阳性反应者为宜,小量分装,冻结保存,使用时要注意防止散毒。
3.2受检血清:
来自受检马的不腐败的血清,勿加防腐剂和抗凝剂。
4抗原及血清的添加
打孔完毕,在琼脂板上端写上日期及编号等。
在图1(7孔型)的中央孔加抗原,2、5孔加检验用标准阳性血清,其余1、3、4、6孔加入受检血清。
在图2(40份血清)的孔型所有①②③……数字号孔分别加入受检马血清,
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- 传染性 贫血 防治 技术规范 修订稿