羟自由基清除能力测定法_精品文档.doc
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1、羟自由基清除能力测定法
试剂:
1.865mmol/L邻二氮菲、无水乙醇溶液、0.2M的pH7.4磷酸盐缓冲液、1.865mmol/L的FeSO4·7H2O溶液、0.03%(v/v)的H2O2、抗坏血酸
取1.0mL浓度为1.865mmol/L邻二氮菲的无水乙醇溶液于带塞试管中,分别加入浓度为0.2M的pH7.4磷酸盐缓冲液2mL和1mL不同浓度的样品,充分混匀后加入1.0mL浓度为1.865mmol/L的FeSO4·7H2O溶液,再次混匀后加入1.0mL0.03%(v/v)的H2O2,于37℃恒温水浴,60min后,在536nm下分别测量各组混合溶液的吸光度值得AS,以蒸馏水代替样品作为空白组测吸光度值得Ab,以蒸馏水替代H2O2作为损伤组,测其吸光度值An,以抗坏血酸代替样品作为阳性对照,抗氧化剂的羟自由基清除率按以下公式计算:
羟自由基清除率(%)=[(As-An)/(Ab-An)]×100。
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