临床微生物学检验考试重点知识总结Word文档下载推荐.docx
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10、生长曲线分为四期:
⑴迟缓期:
是细菌适应环境的过程,为细菌的分裂繁殖做好准备。
⑵对数生长期:
细菌以最大的速率生长和分裂,细菌数量对数增加。
此期细菌代谢活跃而稳定,其大小、形态、染色性和生化反应典型,对外界因素反应敏感,是检测细菌生物学性状和进行药物敏感性试验的适宜阶段.⑶稳定期:
生长繁殖菌数和死亡数处于动态平衡,此期细菌合成较多的代谢产物(如抗生素).⑷衰亡期:
细菌死亡速率逐步增加,死亡数大于增加数,一般不用该期的细菌做鉴定和研究工作。
11、细菌的遗传物质包括染色体、质粒。
病毒的基本结构包括核心、衣壳。
辅助结构是包膜,包膜对乙醚是敏感的,若呈阳性,则说明有乙醚存在。
12、营养体呈单细胞类型的真菌又称酵母菌。
13、营养体呈多细胞类型的真菌是由菌丝和孢子交织组成,称为丝状菌或霉菌。
14、细菌的科学名称的生物双名式,有一个属名和一个种名构成,属名在前,是名词,首字母大写;
种名在后,是形容词。
例如Mycobecteriumtuberculosis(结核分枝杆菌)
15、病原学检测(标本采集的原则):
⑴尽早采集:
一旦怀疑细菌感染,应及时采集标本进行细菌学检验。
⑵选择不同采集时机和标本种类:
根据临床症状和流行病学资料可预测感染性疾病的病原体,根据病程和感染部位的不同,选择合适时机采集不同种类标本。
⑶在抗生素应用前采集:
应尽可能在抗生素留取前标本。
⑷遵守无菌操作:
应严格注意无菌操作,不得被其他部位细菌污染。
盛放标本的容器应无菌。
⑸正确保存和运送:
采集的标本及时运送,如路途遥远,一般应冷藏(但对脑膜炎和淋病奈瑟菌,需保温35~37℃)。
革兰染色影响因素①涂片厚薄②酒精脱色时间③染液贮存时间④细菌生长时期
16、抗酸染色法主要用于结核分枝杆菌和麻风分支杆菌的检查。
17、倾注平板接种法:
常用于牛乳、饮水和尿液标本的菌数的测定。
18、氧化—发酵试验(O—F试验):
为发酵型,此类细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖,通常为兼性厌氧型。
19、IMVIC试验:
I代表吲哚试验,M代表MR试验,V代表VP试验,C代表枸橼酸盐试验;
IMVIC试验用于肠杆菌和细菌的鉴定。
20、氧化酶试验:
本试验肠杆菌科阴性,弧菌科、非发酵菌阳性(除个别菌种外)、奈瑟菌属均阳性。
21、凝固酶试验用于致病性葡萄菌的鉴定。
22、玻片法凝集试验原理:
取已知型别的抗血清1滴滴在玻片的一端,用接种环取细菌混匀成悬滴。
另取生理盐水1滴滴在载玻片的另一端,用接种环混匀成悬滴,轻轻摇晃玻片,如果加入血清出现凝集颗粒,而对照侧仍然均匀浑浊,则凝集阳性。
用途:
用于细菌菌种鉴定和分型。
特点:
方便简单、快速、特异性强。
23、荚膜肿胀试验原理:
有荚膜的细菌如肺炎链球菌等,当与相应的抗血清反应时荚膜将明显增宽,在显微镜下可见在蓝色细菌周围有边界清晰的环状物,厚薄不等,而对照侧无,则为荚膜肿胀试验阳性。
用途:
常用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等的检测。
24、制动试验:
用已知鞭毛抗体与未知细菌鞭毛抗原结合,使鞭毛强制相互粘着失去动力,细菌停止运动,从而特异性的鉴定。
常用于运动活跃的细菌鉴定,如霍乱弧菌。
25、病毒的分离培养方法:
⑴动物接种⑵鸡胚培养⑶组织培养【实验室主流】
27、二倍体细胞培养:
广泛用于病毒分离和疫苗制备。
28、纸片扩散法:
培养基:
pH为7.2~7.4,琼脂厚度为4mm。
对营养要求较高的细菌如链球菌、肠球菌属、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌等需加入相应的营养添加剂。
细菌接种:
用0.5麦氏管校正菌液浓度(1.5×
108CFU/ml),在琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板60°
以保证接种菌的均匀分布,各纸片中心相距>
24mm,纸片距平板內缘>
15m,苛养菌应孵育在含CO2的环境中,肠球菌检测对苯咗西林和万古霉素的耐药性须孵育24h。
29、最低抑菌浓度(MIC):
稀释法所测得的某抗菌药物能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为最低抑菌浓度。
是体外药敏试验衡量细菌对抗菌药物的敏感指标。
30、K-B法影响因素:
1.培养基:
培养基的质量如pH、硬度、湿度、深度。
2.药敏纸片:
药敏纸片的含药量、药敏纸片的保存和厚薄。
3.接种菌量4.试验操作质量:
孵育条件和温度、时间,抑菌圈测量工具等。
31、E-试验:
是一种结合稀释法和扩散法的原理和特点测定微生物对抗菌药物的敏感度的定量技术,E试条是一种宽5mm,长50mm的商品化塑料试条。
32、联合药物敏感试验:
体外联合药物敏感试验的意义:
1.治疗混合性感染2.预防或延迟细菌抗生素耐药性的发生3.联合用药可以减少剂量以避免达到病毒性剂量4.联合用药比单一用药时常常效果更好。
抗菌药物联合用药可以出现4种结果:
1.拮抗作用2.无关作用3.累加作用4.协同作用。
判断标准:
FIC指数<
0.5协同作用;
0.5~1为相加作用;
1~2为无关作用;
>
2为拮抗作用。
33、培养基的一般质量控制:
1.外观:
每种培养基均应标注清楚、无浑浊,固体培养基应无菌落生长。
2.无菌试验:
培养基制作完成后,应检测每批培养基的灭菌效果,无菌生长为合格。
3.培养基的量:
斜面培养基的长度为试管长度的2/3,MH平板的厚度为4mm,其他平板厚度一般为3mm。
4.培养基pH:
配制好的培养基pH应与规定的pH相差±
0.2以内。
5.性能试验:
每一批新配制的、新购入的培养基,均应用已知性质的标准菌株进行预测,合格方可使用。
34、灭菌器:
用生物指示剂嗜热脂肪芽孢杆菌ATCC7953和ATCC12980的培养基或菌片。
35、生物安全水平及适用范围:
⑴一级生物安全防护实验室BSL-1:
是微生物基础实验室,进行试验用的都是最低等级的污染物或安全的微生物,并且完全符合标准实验室操作,如枯草芽孢杆菌等。
⑵二级生物安全防护实验室BSL-2:
适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物,属于第三类病原微生物的如:
沙门菌属、乙型肝炎病毒等的试验操作。
⑶三级生物安全防护实验室BSL-3:
操作对象一般是可以经呼吸道传播的危险微生物,如:
结核分枝杆菌。
⑷四生物安全防护实验室级BSL-4:
进行试验研究的物质是一些非常高危险性并且可以致命的有毒物质,可以通过空气传播并且现今并没有有效的疫苗或者治疗方法来处理,如:
出血热病毒。
36、医院感染:
又称医院获得性感染,包括在医院获得而出院后才发生感染,但不包括入院前已存在的感染或入院时已处于潜伏期的感染。
探视者在医疗机构中获得的感染、工作人员的职业性感染也属于医院感染,入院48h后发生的感染通常认为是医院感染。
37、医院感染病原体特点:
1.病原体以细菌最多见,真菌感染明显增多2.大多数为条件治病微生物3.多数病原菌对抗菌药物具有耐药性或多重耐药4.免疫功能低下患者可以感染多种病原体常见的医院感染:
泌尿道感染
38、血培养的指征:
1.当患者发热≥38℃或低体温≤36℃2.外周血白细胞计数超过10×
10⑨/L(特别是存在核左移时),或绝对粒细胞减少3.合并有明显感染症状体征、伴有感染病灶存在时,就应该采血进行血液细菌培养
39、血液标本采集:
.①采血时机:
理想的血液细菌培养应该是患者接受抗生素治疗之前进行,故采集血培养应尽可能在患者寒战或发热前②采血部位:
应行径皮外周静脉穿刺采血,应严格无菌操作③采血份数:
对每名患者应至少从不同部位采集至少2~3份,对怀疑亚急性感染性心内膜炎的患者,应间隔1h,连续采集3份血进行培养④采血量:
通常采血量应是培养基的1/5或1/10,成人患者每次最好采集10~15ml;
对于儿童患者,每瓶至少注入1~5ml。
40、全自动血培养仪的检测原理:
微生物在生长过程中消耗培养基内的营养物质产生CO2,通过CO2感应器反映瓶内CO2浓度变化,以此来判断瓶内有无微生物生长。
检测方法:
放射性14C标记技术,特殊CO2感受器均质荧光等检测培养基中PH值,氧化还原电势以判断血液或其他无菌体液中有无细菌。
41、用于常规细菌检测的脑脊液应为>
或=1ml;
用于检测抗酸菌的脑脊液量应为>
或=5ml
42、皮肤和软组织感染的细菌学检查:
封闭性A、封闭性脓肿:
局部消毒后,用注射器抽取脓液和脓肿标本置于厌氧运送培养基内送检B、放线菌感染标本:
选取流出脓液中的额“硫磺样颗粒”置于无菌试管内送检。
43、急性呼吸道感染约有70%~80%由病毒引起。
44、痰液标本的采集法中的气管采集法:
通过支气管镜用保护性导管支气管刷采取呼吸道标本,最适合进行细菌培养。
45、痰液标本的检查方法:
确定标本是否适合做细菌培养,在低倍视野中鳞状上皮细胞<
10个,或白细胞>
25个。
46、常规粪便培养,同时选用肠道强选择性培养基(SS平板或XLD或HE)和弱选择性培养基(如Mac或EMB或中国蓝平板)
47、金黄色葡萄球菌感染为黄绿色水样粪便
48、膀胱穿刺法:
常采用耻骨上膀胱穿刺抽取尿液法,该方法是目前判断膀胱内有无细菌感染的金标准,常在怀疑厌氧菌感染时采用。
49、尿液中一般细菌及假丝酵母菌培养菌落计数>
105CFU/ml提示可能为泌尿系统感染。
50、淋病奈瑟菌、衣原体、生殖道支原体、杜克嗜血杆菌的分离培养是淋病、生殖道沙眼衣原体感染、生殖道支原体感染、软下疳实验室诊断的“金标准”,阳性者可确诊。
51、葡萄球菌属:
多数菌株耐盐性强;
凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)近年来成为医院感染的主要病原菌。
52、链球菌属:
A群链球菌也称化脓性链球菌,可致急性肾小球肾炎、风湿热等变态反应性疾病;
草绿色链球菌偶可引起亚急性细菌性心内膜炎。
53、脑膜炎奈瑟菌引起化脓性脑脊髓膜炎(流脑);
淋病奈瑟菌引起急性淋病性尿道炎。
54、淋病奈瑟菌的培养:
标本应接种于预温的巧克力平板,5%~10%CO2培养,35~37℃,24~48h。
55、奈瑟菌的特征:
革兰阴性球菌,肾形或咖啡状,成双排列,凹面相对。
氧化酶和触酶阳性,淋病奈瑟菌只分解葡萄糖,产酸不产气。
56、肠杆菌科生物学特性:
①革兰阴性杆菌,无芽孢,有菌毛,多数有周身鞭毛。
②需氧或兼性厌氧,营养要求不高,在普通培养基上生长良好,血平板生长为灰白、湿润、光滑的菌落,在肠道选择性培养(MAC、EMB、SS)上,因乳糖分解或不分解,生长为不同特征的菌落。
③生化反应活跃,发酵葡萄糖,氧化酶阴性(邻单胞菌除外),触酶阳性(痢疾志贺菌除外),能还原硝酸盐为亚硝酸盐。
④肠杆菌科抗原构成主要的有菌体抗原(O抗原)、鞭毛抗原(H抗原)、表面抗原和菌毛抗原等;
表面抗原可阻断O抗原与相应抗体之间的反应,加热去除表面抗原能消除这种阻断作用。
⑤肠杆菌科细菌抵抗力不强
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