性病实验室检测与质量管理PPT格式课件下载.pptx
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病期在2年以上。
无任何梅毒的症状和体征。
胎传(先天)梅毒早期:
在2岁前发病;
在2岁以后发病。
梅毒实验室检测梅毒实验室检测病原学检测暗视野显微镜检查镀银染色梅毒螺旋体核酸检测血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清试验(非特异性抗体检测)梅毒螺旋体抗原血清试验(特异性抗体检测)病原学检测病原学检测暗视野显微镜检查镀银染色检查世界卫生组织推荐作为性病实验室必备项目之一。
用于一、二期梅毒的皮肤黏膜损害(硬下疳、扁平湿疣、鳞屑性皮损)及淋巴结病变的检测。
硬下疳出现1-2周后血清学试验才出现阳性,病原学检测可提高早期现症梅毒的检出率。
为避免非致病性螺旋体干扰,谨慎用于口腔(齿垢密螺旋体)和直肠(屈折密螺旋体、蚀疮溃疡密螺旋体)部位的检查。
试验敏感性不高,未检出螺旋体不能排除梅毒,应同时进行血清学试验。
病原学检测病原学检测可用于早期梅毒、现症梅毒、胎传梅毒的诊断及流行病学、复发与再感染、基因亚型与临床等研究。
一期、二期梅毒溃疡组织有较高检出率,特别是一期梅毒患者生殖器溃疡分泌物,血液、脑脊液标本由于其中梅毒螺旋体含量极低,检测阳性率很低。
梅毒螺旋体核酸检测梅毒螺旋体核酸检测目前不作临床常规项目开展目前不作临床常规项目开展梅毒血清学检测梅毒血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验(非特异性抗体检测)(非特异性抗体检测)(非特异性抗体检测)(非特异性抗体检测)梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验(特异性抗体检测)(特异性抗体检测)(特异性抗体检测)(特异性抗体检测)梅毒螺旋体一旦感染人体,宿主可对螺旋体表面的类脂物质作出免疫应答,在3-4周产生抗类脂抗原的抗体(反应素)。
抗原为梅毒螺旋体特异蛋白(包括重组梅毒螺旋体特异抗原),检测梅毒患者血中特异性抗梅毒螺旋体抗原的抗体。
未经治疗的病人,其血清内的非特异性抗体可长期存在。
经正规治疗后,非特异性抗体滴度可以逐渐降低甚至转为阴性。
感染梅毒螺旋体后,一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性,则患者终身阳性。
梅毒血清学检测梅毒血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清试验(梅毒非特异性抗体检测)性病研究实验室试验(VDRL)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)梅毒螺旋体抗原血清试验(梅毒特异性抗体检测)荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)梅毒螺旋体抗体免疫印迹试验(TP-WB)梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验(TP-ELISA)梅毒螺旋体快速诊断试验(TP-RT)梅毒螺旋体化学发光免疫分析法(TP-CLIA)梅毒非特异性抗体检测操作指南(梅毒非特异性抗体检测操作指南(WS/T491-2016WS/T491-2016)2016-07-072016-07-07发布发布2016-12-152016-12-15实施实施非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验VDRLVDRLVenerealDiseaseResearchLaboratoryTestVenerealDiseaseResearchLaboratoryTest抗原(心磷脂、卵磷脂、胆固醇的无水乙醇溶液)、磷酸盐缓冲液。
RPRRPRRapidPlasmaReagentCircleCardTestRapidPlasmaReagentCircleCardTest抗原(同上)、EDTA、氯化胆碱、磷酸盐缓冲液、碳颗粒碳颗粒。
TRUSTTRUSTTolulizedRedUnheatedSerumTestTolulizedRedUnheatedSerumTest抗原(同上)、EDTA、氯化胆碱、磷酸盐缓冲液、甲苯胺红染色粒子甲苯胺红染色粒子。
非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验VDRLVDRL(肉眼(肉眼)非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验VDRLVDRL(低倍镜)低倍镜)1:
11:
1阳性阳性1:
21:
2阳性阳性1:
41:
4阳性阳性1:
321:
32阴性阴性1:
161:
16阳性阳性1:
81:
8阳性阳性非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验RPRRPR与与TRUSTTRUST临床应用临床应用辅助诊断梅毒螺旋体感染后,人体会产生抗类脂质物质的抗体。
梅毒非特异性抗体检测呈阳性反应,与活动性梅毒有关,是判断“现症感染”的指标,结合梅毒特异性抗体检测结果可确诊梅毒。
超过10%的静脉药瘾者的滴度1:
8,部分早期梅毒和潜伏梅毒的滴度1:
8,低滴度值不可用于排除假阳性反应。
VDRL是唯一诊断神经梅毒的标准方法,对CSF有较高的特异性,呈阳性反应的患者,可结合流行病资料和临床表现诊断神经梅毒。
VDRL/RPR/TRUST有如下结果,可作为判断先天梅毒的依据之一。
新生儿的血清、CSF中梅毒非特异性抗体水平高于同期母亲2个滴度;
新生儿CSF-VDRL呈阳性反应;
出生后3个月内,与初期的血清、CSF中梅毒非特异性抗体水平增加2个滴度。
临床应用临床应用疗效监测在连续的疗效监测过程中,抗体滴度水平和变化趋势有着不同的临床意义:
抗体下降2个滴度判断治疗有效;
抗体下降2个滴度,并且连续2个监测周期的定性试验呈阴性反应,判断治愈;
抗体滴度下降2个滴度,或上升2个稀释度,在排除重新感染和实验室技术性误差的情况下,继续随访监测;
抗体上升2个滴度或定性试验从阴性反应转变成阳性反应,应结合流行病学史和临床体征,可判断复发、再感染或治疗失败。
监测疗效时应采用与初次检测相同的方法和试剂。
临床应用临床应用假阳性反应个别品牌真空采血管中含有的添加剂成分,可干扰检测结果引起假阳性反应。
与梅毒感染无关的其它因素,如急性和慢性疾病、自然组织损伤等,梅毒非特异性抗体试验也可呈阳性反应。
常见的疾病因素有系统性红斑狼疮、麻风病、疟疾、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、肿瘤、其它螺旋体疾病等可引起假阳性反应。
常见的生理性因素有孕妇、老年人群可发生假阳性反应。
假阴性反应感染梅毒螺旋体后,机体免疫应答需要一定过程,抗类脂质的抗体浓度尚处于实验方法的检测限之下,称为窗口期。
可发生假阴性反应。
少数早期梅毒和神经梅毒以及部分晚期梅毒,可发生定性试验假阴性反应。
前带现象部分早期梅毒(1%2%二期梅毒、0.5%1%一期梅毒)的样品可出现前带现象。
血清固定部分晚期潜伏梅毒、少数其它病程的样品可发生血清固定现象。
557%7%孕妇会出现一过性的孕妇会出现一过性的RPRRPR阳性。
阳性。
血清固定血清固定部分患者经过足量驱梅治疗,梅毒非特异性抗体维持在相对恒定的低滴度状态。
判断血清固定,应具备3个要素:
流行病学病史和临床表现排除复发、重新感染;
连续2个随访周期(6月),血清抗体维持在1滴度范围之内的低滴度水平(一般1:
8),既变化趋势方向不明;
无实验室的技术性和方法学误差。
少数患者可终生存在血清固定现象。
方法方法原理原理优点优点缺点缺点FTA-ABSFTA-ABS完整形态的梅毒螺旋体作为抗原完整形态的梅毒螺旋体作为抗原患者血清经吸收剂处理患者血清经吸收剂处理敏感性好、特异性高敏感性好、特异性高“金标准金标准”操作繁琐操作繁琐技术要求高技术要求高TP-WBTP-WB超声裂解或重组的梅毒螺旋体印超声裂解或重组的梅毒螺旋体印迹至硝酸纤维膜上迹至硝酸纤维膜上可分别检测可分别检测IgM/IgGIgM/IgG“确证试验确证试验”操作烦琐操作烦琐价格昂贵价格昂贵TPHATPHA超声裂解的梅毒螺旋体致敏红细超声裂解的梅毒螺旋体致敏红细胞肉眼可见凝集反应胞肉眼可见凝集反应相对上述方法相对上述方法操作简单操作简单红细胞易产生红细胞易产生非特异性凝集非特异性凝集TPPATPPA原理与原理与TPHATPHA相同相同惰性明胶颗粒作为载体惰性明胶颗粒作为载体试剂稳定试剂稳定特异性好特异性好早期梅毒早期梅毒敏感性不高敏感性不高TP-ELISATP-ELISA重组的梅毒螺旋体抗原包被重组的梅毒螺旋体抗原包被价格低廉价格低廉大样本、可自动化大样本、可自动化厂家间敏感性和特异厂家间敏感性和特异性差异较大性差异较大TP-RTTP-RT双抗原夹心法或间接法双抗原夹心法或间接法免疫层析试验或免疫渗滤试验免疫层析试验或免疫渗滤试验简便、快速简便、快速无需仪器设备无需仪器设备敏感性、特异敏感性、特异性有待评估性有待评估TP-CLIATP-CLIA化学发光和酶免疫反应相结合化学发光和酶免疫反应相结合双抗原夹心法双抗原夹心法敏感性特异性优于敏感性特异性优于ELISAELISA法、自动化法、自动化试剂成本较高试剂成本较高梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验FTAFTAABSABS完整的梅毒螺旋体包被完整的梅毒螺旋体包被“金标准金标准”。
梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验TPTPWBWB(IgG/IgMIgG/IgM)梅毒螺旋体转印或基因重组抗原包被梅毒螺旋体转印或基因重组抗原包被确证试验确证试验/胎传梅毒胎传梅毒梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验TPPATPPA抗原为超声裂解的梅毒螺旋体,常用于实验室内部复核。
抗原为超声裂解的梅毒螺旋体,常用于实验室内部复核。
梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验TPTPELISAELISA基因重组抗原,最常用筛查基因重组抗原,最常用筛查方法方法,敏感性,敏感性、特异性有待、特异性有待评估。
评估。
梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验基因重组抗原,发展快、品牌多,性能有待评估。
基因重组抗原,发展快、品牌多,性能有待评估。
TPTPCLIACLIA梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验TPTPRTRT试验试验基因重组抗原,发展快、品牌多,性能有待评估。
方法选择方法选择皮肤性病门诊皮肤性病门诊/样本量少的实验室样本量少的实验室TPRTTRUST/RPRTPPA入院检查入院检查/术前筛查术前筛查/样本量大的实验室样本量大的实验室TPELISA/TPCLIATRUST/RPRTPPA流程选择流程选
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