《DNA的粗提取与鉴定》实验教学设计Word文件下载.doc
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要求
掌握DNA提取和鉴定的原理和实验操作
教
学
目
标
知识与能力
能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理
过程与方法
通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力
情感、态度与价值观
通过实验的学习,让学生了解到生物世界的奥秘
教学
重点
提取和鉴定DNA的原理与实验操作
难点
提取和鉴定DNA的实验原理与实验操作
方法
讲授法、小组合作法、边讲边练
教学程序设计
过
程
及
方
法
环节一明标自学
过程设计
二次备课
【学习目标】
1、能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理
2、通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力
3、通过实验的学习,让学生了解到生物世界的奥秘
【新课导入】
【自学指导】
根据《导学案》自主阅读选修一内容,归纳提取DNA的原理
1、实验原理
【自学效果展示】
一、DNA的提取
1、提取DNA的原理:
1)、DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2)、DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
鉴定DNA的原理:
DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
2、实验过程:
师生共同学习
以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取
鸡血细胞做实验材料的原因
①鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得
②鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长
①柠檬酸钠作用及作用机理
防止血液凝固。
柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液就不会凝固
②注意事项
鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了减少DNA的损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液
讨论:
提取鸡血中的DNA时,为什么除去血液中的上清液?
答:
血液分为两部分,一部分是血浆,一部分是血细胞,离心后除去的上清液是血浆
3、过程(结合导学案边做边学)
①提取鸡血细胞的细胞核物质
②溶解细胞核内的DNA
【合作释疑一】
(1)为什么要加入蒸馏水?
加入蒸馏水后细胞会有什么变化?
让细胞内浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至胀破
(2)用玻璃棒搅拌有什么意义?
用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。
注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太猛,防止打碎DNA
(3)滤去的是什么物质?
得到的是什么?
过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质;
得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA
③析出含DNA的粘稠物
④滤取含DNA的粘稠物
⑤将DNA的粘稠物再溶解
⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液
⑦提取含杂质较少的DNA
【合作释疑二】
(1)为什么要加50mL的冷酒精?
因为DNA不溶于冷酒精,而其他物质可以溶解在酒精中,使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中
(2)观察丝状物呈什么颜色?
白色
环节二合作释疑环节三点拨拓展
二、DNA的鉴定
【讨论:
】
(1)比较两个试管中溶液的颜色有什么不同?
有丝状物的试管变成蓝色,另一试管还是原来颜色
(2)这一鉴定结果说明什么问题?
提取出的丝状物是DNA
(3)DNA的直径约为20×
10-10m,实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小?
DNA分子直径只有2nm。
丝状物是多个DNA子聚在一起形成的
【点拨拓展:
(1)此实验过程中有几次使用蒸馏水?
几次过滤,几次析出,几次搅拌?
分别在哪一步?
整个实验共“两次蒸馏水,三次过滤,两次析出,六次搅拌”
①两次蒸馏水
第一次:
细胞吸水胀破第一步
第二次:
使DNA黏稠物析出第三步
②三次过滤
DNA存在于滤液里第一步
DNA被留在纱布上第四步
第三次:
DNA存在于滤液里第六步
过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层
③两次析出
用0.14mol/L的NaCI溶液含杂质多第三步
用冷却的95%的第七步
④六次搅拌:
第一、二、三、五、七步
其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA
(2)为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;
用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。
因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质
达标检测评价指南3
过程
环节四检测
1、为什么要加入蒸馏水?
2、为什么要加50mL的冷酒精?
3、为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
课堂
小结
提取DNA的实验中实验原理、实验材料以及实验的注意事项是重点,要求大家必须掌握在操作中多次用到玻璃棒以及搅拌、加蒸馏水的目的。
除此之外
课后
作业
导与练习P52-53课堂练习
板
书
设
计
4.1.2提取和鉴定DNA
一、提取DNA
1、原理2、步骤3、注意事项
二、鉴定DNA
1、原理2、现象
课
后
反
思
4
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- 关 键 词:
- DNA的粗提取与鉴定 DNA 提取 鉴定 实验教学 设计