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来源于低等动植物;
化学结构、生物来源具多样性,含量低
②采集与提取标准化
③药理筛选
④结合现代生物技术,保证可持续发展利用:
再生资源优先开发;
养殖的工业化和生物合成;
生物反应器及基因工程技术的应用;
必须立足我国特有的海洋药用生物资源研发海洋生物一类新药
4.我国海洋生物制药产业化发展的重点领域
(1)海洋生物抗癌药物的研究
(2)海洋生物心脑血管药物的研究
(3)海洋生物抗菌、抗病毒药物研究
(4)海洋生物消化系统药物的研究
(5)海洋生物镇痛抗炎药物的研究
(6)海洋生物泌尿系统药物研究
(7)海洋生物免疫调节作用药物的研究
(8)海洋生物毒素先导化合物的研究
5.海洋生物的特点(海洋生物活性成分特异性的原因)
(1)生活环境与陆生生物迥然不同:
有一定的水压、高盐度、小温差、有限的溶解氧、有限的光照及化学缓冲海水体系;
(2)次生代谢产物较陆生生物独特新颖:
新陈代谢、生存繁殖方式、适应机制具有显著特性;
(3)化合物结构独特、生物活性多样;
(4)开展海洋药物研究具有重要的理论意义与实际应用价值。
8.海洋生物有效化学成份的概念和主要的化学成分种类
概念:
指从海洋生物中分离纯化出具有生物活性的天然有机化合物。
种类:
①大环内酯类;
②聚醚类化合物;
③肽类化合物;
④c15乙酸原化合物;
⑤前列腺类似物
9.溶剂分离法的原理与选用溶剂的注意点。
原理:
根据活性物质在溶剂中溶解度(极性)的差异分离
选择溶剂注意点:
①对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小;
②不与化学成分起化学变化;
③经济、易得、使用安全
10.色谱法原理及其分类。
利用不同物质在不同相态的选择分配性,以流动相对固定相中物质进行洗脱,混合物中不同物质会以不同速度沿固相移动,最终达到分离效果
11.超临界流体萃取的原理,什么是超临界co2萃取及其特点
利用流体在超临界状态时具有密度大、粘度小、扩散系数大等优良的传质特性而成功开发的,具有提取率高、产品纯度好、流程简单、能耗低的特点。
超临界co2萃取:
以超临界状态下的co2为溶剂,利用该状态下流体co2所具有的高渗能力和高溶解能力分离混合物的过程。
①可以在接近室温(35-40℃)及co2气体笼罩下进行提取,有效地防止了热敏性物质的氧化和逸散,完-1-
整保留生物活性,而且能把高沸点,低挥发渡、易热解的物质在其沸点温度以下萃取出来。
②由于全过程不用有机溶剂,因此萃取物绝无残留溶媒,同时也防止了提取过程对人体的毒害和对环境的污染,100%的纯天然,符合当今“绿色环保”、“回归自然”的高品位追求。
③控制工艺参数可以分离得到不同的产物,可用来萃取多种产品,而且原料中的重金属、无机物、尘土等都不会被co2溶解带出。
④蒸馏和萃取合二为一,可以同时完成蒸馏和萃取两个过程,尤其适用于分离难分离的物质,如有机混合物、同系物的分离精制等。
⑤能耗少;
热水、冷水全都是闭路循环,无废水、废渣排放。
co2也是闭路循环,仅在排料时带出少许,不会污染环境。
由于能耗少、用人少、物料消耗少,所以运行费用非常低。
12.高速逆流色谱仪(hsccc)如何做到化合物样品的分离
(1)样品中一种高分配系数的化合物在固定相中的浓度要高于在流动相中的浓度,要晚一些从柱子里洗脱出来。
(2)另一种低分配系数的化合物在流动相中的浓度要高于在固定相中的浓度,要早一些洗脱出来。
(3)如果一种化合物在两相中的是平均分配的(d=1),不论哪一相溶剂被选为流动相,在流动相流出1倍柱体积的量后,这种化合物都会被洗脱出来。
13.质谱仪器中最主要的三种离子是什么?
分子离子的三个特征是什么?
分子离子:
样品分子失去一个电子而形成的离子称为分子离子。
同位素离子:
由重同位素组成的分子形成的离子
碎片离子:
由m+·
或碎片离子单分子裂解产生的离子
特征:
①质核比为分子量;
②是奇电离子,分子失去一个价电子生成的离子;
③并非所有的有机物分子离子都能出现
14.质谱在鉴定海洋天然产物结构的应用有哪些?
(1)(最基本)提供分子量信息
(2)确定碎片离子
(3)确定有机化合物的元素组成及其分子式
(4)确定有机化合物的结构式
15.海洋药用无脊椎动物的主要生物学来源有哪几个门,各举一例,并说明其主要的药用价值。
(1)多孔动物门:
海绵,活体检测水质,具有抗肿瘤活性物质。
(2)环节动物门:
沙蚕,提取沙蚕毒素。
是一种仿杀虫剂。
(3)腔肠动物门:
海蜇,治疗心血管疾病。
珊瑚,抑制癌细胞增长。
(4)软体动物门:
贝类、乌贼、海兔,中药:
厣,海螵鞘,石决明,珍珠。
(5)节肢动物门:
虾、蟹、鲎,甲壳质、壳聚糖。
(6)苔藓动物门:
苔虫素防腐蚀剂,抗癌,促进造血。
(7)棘皮动物门:
海星、海胆、海参
16.海洋药用大型藻类的主要生物学来源有哪几个门,各举一例,并说明其主要的药用价值。
门类:
红藻门(石花菜)、褐藻门(裙带菜)、轮藻门(苦草)
药用价值:
①石花菜:
清肺化痰、清热燥湿,滋阴降火、凉血止血
②裙带菜:
抗癌
③苦草:
清热解毒,止咳祛痰,养筋和血。
用于急、慢性支气管炎、咽炎,扁桃体炎,关节疼痛;
外治外伤出血。
17.红树林有哪些主要的次生代谢产物,简述其中的一、两种。
(1)萜类:
是红树林植物中含量最为丰富的一种代谢产物,二萜是最为重要的化学成分,与多种生物活性密切相关。
二倍半萜化合物-柠檬苦素具有较好的细胞毒性。
(2)糖苷类化合物:
是红树林植物中一种重要的代谢产物。
(3)甾醇:
植物甾醇是滨海湿地植物中的常见化学成分,含量高且类型单一。
(4)生物碱类:
在滨海湿地植物中发现较少。
但在红树林植物中发现了新颖结果的生物碱,有拒食活性。
(5)含硫化合物:
是滨海湿地植物中一类比较特殊的成分,目前仅在红树科的brugiera属中有发现。
有新颖结构的化合物发现。
(6)其它:
芳香类表现抗革兰氏阳性菌和阴性菌活性。
18.红树里植物的次生代谢产物主要有哪些生物学活性?
①抗病毒活性;
②抗肿瘤活性;
③镇痛、抗炎及抗氧化活性;
④抗菌、毒素和昆虫拒食素及其他活性
19.海洋生物技术概念与内容
利用海洋生物或其组成部分,综合应用基因工程、细胞操作技术和细胞培养等技术手段,生产出有用
的生物产品,以及定向改良海洋生物的某些遗传特性的综合性科学技术。
内容:
①开发、生产和改造海洋生物天然产物,以便用作药物、食品、新材料;
②定向改良海洋动物、植物遗传特性,为海水养殖业提供具有生长快、品质高和抗病害的优良品种;
③培养具有特殊用途的“超级细菌”,用来清除海洋环境的污染,或者生产具有特定生物治理的物质。
20.海洋生物制药研发瓶颈及其解决办法
瓶颈:
①有效成分无法确定;
②药源不足
解决办法:
①人工养殖;
②开辟新的资源领域,探索新的方法和技术
21.
优点:
①节省水、电和蒸汽耗量,降低生产成本;
②提高产品得率;
③经济效益显著;
④减轻劳动强度,改善生产环境。
22.什么是生物反应器?
生产藻类活性物质生物反应器技术的研究有哪两项?
生物反应器:
一般是指利用固定化酶及固定化细胞高效生产产物的技术,是现代生物技术研究的焦点。
生产藻类活性物质生物反应器技术的研究
光和微藻生物反应器包括:
1.大面积室外养殖
2.真正意义上的生物反应器—在可控条件下高密度养殖
23.藻类基因工程的概念与研究进展
概念——是指利用分离自海洋生物的有药用价值的基因、以规模化养殖的海洋生物作为表达受体进行遗传操作,从而大量获得高值廉价的海洋生物药物。
海洋蓝藻基因工程的应用研究—发展为两个方向,海藻分子生物学与基因工程的研究;
从生物大分子角度研究海藻个体发育与系统发育,从分子水平上揭示海藻起源、进化及生命现象、生命过程的规律、本质以及机理。
进展:
1)克隆技术2)质粒发现分离技术3)标记技术4)克隆与遗传转化技术
24.简答基因芯片在海洋生物制药中的应用
(1)新药靶点发现;
(2)药物作用机制研究;
(3)超高通量药物筛选;
(4)药物毒理学研究;
(5)药物基因组学研究
26.什么是药物筛选?
目前活性筛选有哪些主要的方法?
药物筛选:
是现代药物开发流程中检验和获取具有特定生理活性化合物的一个步骤,系指通过规范化的试验手段从大量化合物或者新化合物中选择对某一特定作用靶点具有较高活性的化合物的过程。
目前活性筛选的三种方法:
(1)寻找某类已知化合物及其类似物:
如青蒿素紫杉醇苔藓虫内酯
(2)寻找具有某种活性的物质:
抗肿瘤活性、抗菌筛选、抗病毒筛选等
(3)多种活性筛选:
高通量筛选(hts)、高内涵筛选、虚拟筛选
27.常用的药物活性筛选方法有哪些?
(1)抗菌活性筛选---抗生素的研究:
抗一般细菌、厌氧细菌、真菌、支原体药物筛选
(2)对动物的影响活性:
幼体定植或变态、无脊椎动物运动、金鱼毒性、器官和生理系统监测
(3)细胞水平筛选:
抗肿瘤药物筛选
(4)酶抑制剂筛选法:
抗肿瘤、血栓、病毒、糖尿病等
(5)受体拮抗活性筛选
(6)免疫调节活性代谢物的筛选法
(7)抗病毒药物的活性筛选
(8)其他筛选。
如神经系统药物、抗炎、心血管疾病药物、抗氧化等筛选。
28.抗肿瘤药物筛选经常采用哪种筛选方法?
常用的肿瘤筛选的细胞株?
(4-5个即可)
方法:
细胞水平筛选(mtt法、srb法)
细胞株:
p388(小鼠白血病细胞);
a-594(人肺癌细胞);
bel-7404(人肝细胞性肝癌);
s180(小鼠移植性肿瘤);
lewis(肺癌)
29.简述如何采用mtt法筛选抗肿瘤活性药物?
(1)接种一定量对数生长期细胞90μl/孔于96孔板,培养24h
(2)每孔加待测样液10μl,37℃5%co2培养48h
(3)每孔加mtt20μl,培养4h,每孔加三联液50μl,co2培养过夜
(4)酶标仪测od570,计算待测样对细胞的影响
30.超高通量筛选平台发展的两个方向?
高通量筛选技术体系的组成?
①微孔板/微阵列技术,芯片膜片钳技术
②微流体芯片技术
体系的组成:
(1)化合物样品库;
(2)自动化的操作系统;
(3)高灵敏度的检测系统;
(4)数据库管理系统。
31.高通量筛选技术的三种平台及其优缺点?
(1)反酵母双杂交系统的药物筛选模型
①该系统中的酵母细胞能够繁殖,因此无须对靶分子进行耗时、耗力、耗材的生物纯化过程,而且能够在相对短的时间内对大量的蛋白质进行测试。
②该系统是在一个生物体环境内进行的,因此与体内环境较为接近。
细胞通透性以及细胞毒作用都作为参数在筛选过程中被考虑。
而这一点恰前可以弥补体外筛选试验的不足。
③该系统能够与现有的高通量筛选兼容,从而可以在96孔或384孔板上测试组合化学分子库中的化合物。
另外它还很容易与计算机工
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