药用植物学与生药学实验指导Word格式.docx
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二、仪器用品及实验材料:
显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、水合氯醛、稀甘油、稀碘液、蒸馏水。
实验材料:
洋葱、
三、实验内容:
显微镜的类型
由于微生物个体细小,因此我们必须用显微镜来研究它们的个体形态和细胞结构。
熟悉显微镜和掌握显微镜的操作技术是研究微生物不可缺少的手段。
现代显微镜一般可以分为两大类,一类是光学显微镜,另一类是非光学显微镜。
这两类显微镜又可根据不同的情况分成若干类型,现列表如下:
普通光学显微镜的基本构造
显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成(图Ⅲ-1)。
1.机械装置
镜座()和镜臂()镜座位于显微镜底部,呈马蹄形,它支持全镜。
镜臂有固定式和活动式两种,活动式的镜臂可改变角度。
镜臂支持镜筒。
镜筒()是由金属制成的圆筒,上接目镜,下接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种,单筒又可分为直立式和后倾式两种。
而双筒则都是倾斜式的,倾斜式镜筒倾斜45°
。
双筒中的一个目镜有屈光度调节装置,以备在两眼视力不同的情况下调节使用。
转换器()为两个金属碟所合成的一个转盘,其上装3—4个物镜,可使每个物镜通过镜筒与目镜构成一个放大系统。
载物台()又称镜台,为方形或圆形的盘,用以载放被检物体,中心有一个通光孔。
在载物台上有的装有两个金属压夹称标本夹,用以固定标本;
有的装有标本推动器,将标本固定后,能向前后左右推动。
有的推动器上还有刻度,能确定标本的位置,便于找到变换的视野。
调焦装置是调节物镜和标本间距离的机件,有粗动螺旋()即粗调节器和微动螺旋()即细调节器,利用它们使镜筒或镜台上下移动,当物体在物镜和目镜焦点上时,则得到清晰的图像。
2.光学系统
物镜()物镜安装在镜筒下端的转换器上,因接近被观察的物体,故又称接物镜。
其作用是将物体作第一次放大,是决定成像质量和分辨能力的重要部件。
物镜上通常标有数值孔径、放大倍数、镜筒长度、焦距等主要参数。
如:
0.30;
10×
;
160/0.17;
16。
其中“0.30”表示数值孔径(,简写为),“10×
”表示放大倍数,“160/0.17”分别表示镜筒长度和所需盖玻片厚度(),16表示焦距。
目镜()装于镜筒上端,由两块透镜组成。
镜把物镜造成的像再次放大,不增加分辨力,上面一般标有7×
、10×
、15×
等放大倍数,可根据需要选用。
一般可按与物镜放大倍数的乘积为物镜数值孔径的500—700倍,最大也不能超过1000倍的选择。
目镜的放大倍数过大,反而影响观察效果。
聚光器()光源射出的光线通过聚光器汇聚成光锥照射标本,增强照明度和造成适宜的光锥角度,提高物镜的分辨力。
聚光器由聚光镜和虹彩光圈()组成,聚光镜由透镜组成,其数值孔径可大于1,当使用大于1的聚光镜时,需在聚光镜和载玻片之间加香柏油,否则只能达到1.0。
虹彩光圈由簿金属片组成,中心形成圆孔,推动把手可随意调整透进光的强弱。
调节聚光镜的高度和虹彩光圈的大小,可得到适当的光照和清晰的图像。
光源()较新式的显微镜其光源通常是安装在显微镜的镜座内,通过按钮开关来控制;
老式的显微镜大多是采用附着在镜臂上的反光镜,反光镜是一个两面镜子,一面是平面,另一面是凹面。
在使用低倍和高倍镜观察时,用平面反光镜;
使用油镜或光线弱时可用凹面反光镜。
滤光片()可见光是各种颜色的光组成的,不同颜色的光线波长不同。
如只需某一波长的光线时,就要用滤光片。
选用适当的滤光片,可以提高分辨力,增加影像的反差和清晰度。
滤光片有紫、青、蓝、绿、黄、橙、红等各种颜色的,分别透过不同波长的可见光,可根据标本本身的颜色,在聚光器下加相应的滤光片。
(二)光学显微镜的使用
1.右手握住镜臂,左手托住镜座。
2.把显微镜放在实验台上,略偏左,显微镜放在距实验台边缘7厘米左右处。
3.安装好目镜和物镜。
4.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。
5.把一个较大的光圈对准通光孔。
左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。
转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。
通过目镜,可以看到白亮的视野。
6.把所要观察的玻片标本放在载物台上,用推进器夹压住,利用推进器上下或左右移动标本,使其正对通光孔的中心。
7.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降(或载物台缓缓上升),直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。
8.左眼向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升(或载物台缓缓下降),直到看清物像为止。
再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
9.高倍镜观察:
在低倍镜看清楚标本的前题下,找到最适宜观察的部位后,将此部位移至视野中心,然后将高倍镜转至正下方,在转换物镜时,需用眼睛在侧面观察,避免镜头与玻片相撞。
然后由目镜观察,并仔细调节光圈,使光线的明亮度适宜,同时用细调节器调节至物像清晰为止。
(三)光学显微镜的保养
取拿显微镜時,必須一手握住镜臂,另一手拖住底部的镜座,使显微镜保持直立的位置。
清洁显微镜的镜头,要用专用的擦镜纸不可使用布或卫生纸。
实验完毕,取出载玻片。
把显微镜的外表擦拭干净。
转动转换器,把两个物镜偏到两旁,并将镜筒缓缓下降到最低处。
最后把显微镜放进镜箱里,送回原处。
(四)植物细胞的结构
制作红皮洋葱内表皮的临时水装片,镜下观察细胞结构。
细胞壁较透明,细胞质五色均匀,细胞核扁球形,仔细观察可见其内1—3个发亮的核仁
作业与思考:
1、光学显微镜主要由哪几部分构成?
2、光学显微镜的保养应着重注意哪些方面?
3、如何由低倍镜转换到高倍镜?
4、制洋葱内表皮细胞结构图,标明细胞壁、细胞质和细胞核。
5、填图:
实验二植物细胞后含物及细胞壁
实验目的:
掌握细胞主要后含物的种类及鉴别。
熟悉特化细胞壁的种类及鉴别。
学习徒手切片和组织粉末装片法
仪器用品及实验材料:
显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、水合氯醛、稀甘油、稀碘液、苏丹试液竹、盐酸、间苯三酚试液、蒸馏水。
马铃薯块茎、半夏粉末、大黄粉末、
实验内容:
刮取马铃薯块茎组织少许,制作临时水装片,不可透化。
镜下观察不同类型淀粉粒。
加稀碘液观察颜色的变化。
取大黄粉末制临时装片,加水合氯醛透化,观察簇晶形态。
取半夏粉末制临时装片,加水合氯醛透化,观察针晶形态。
取黄柏粉末制临时装片,加水合氯醛透化,观察方晶形态。
细胞壁特化的类型与鉴别
木质化
取夹竹桃叶柄,做徒手切片,滴间苯三酚,加热,再加浓盐酸一滴,加盖玻片。
观察一些细胞壁呈樱桃红或红紫色,即为木质化。
用火柴棍重复以上实验。
木栓化
取带皮马铃薯块茎,制徒手切片,加苏丹试液,稍加热,放置2分钟,加盖玻片。
观察表皮细胞外壁呈橘红色,即为木栓化。
角质化
取夹竹桃叶主脉两侧材料,做徒手切片,加苏丹试液,稍加热,放置2分钟,加盖玻片。
观察表皮细胞外壁呈红或橘红色,即为角质层。
纹孔与胞间连丝
观察柿胚乳细胞永久制片,观察并绘图表示细胞壁、细胞腔、纹孔与胞间连丝。
1、各步实验中淀粉粒、晶体的形态图。
2、植物细胞后含物主要有哪些种类?
产生和储藏的部位如何?
如何鉴别?
3、经水合氯醛透化后,木质化细胞壁能否被间苯三酚染色?
4、为什么细胞壁不栓化和角质化均可用鉴别?
5、何为纹孔与胞间连丝?
有何功能?
实验三分生组织与保护组织
(1)掌握保护组织的形态特征,及其在植物体的分布部位。
(2)了解分生组织的形态特征及有丝分裂的分裂相特征。
显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、水合氯醛、稀甘油、苏丹试液、蒸馏水。
薄荷叶、白菜叶或其它植物叶;
玉米或洋葱根尖横切永久制片、椴木茎横切永久制片、厚朴皮横切永久制片。
(一)分生组织(示教)
根尖:
取玉米或洋葱根尖横切永久制片镜下观察分生区细胞形态,寻找有丝分裂前期、中期、后期、末期等细胞。
(二)保护组织
1、初生保护组织——表皮
分别取白菜叶、薄荷叶等叶,撕取表皮,制临时装片,观察表皮细胞腹面观,注意观察气孔器、气孔轴式和上面的各种毛茸。
2、次生保护组织——周皮
取椴树茎横切永久制片、厚朴皮横切永久制片观察周皮。
另观察椴树茎横切的形成层。
四、作业与思考:
1、初生保护组织——表皮中有哪几种组织或细胞?
2、何谓周皮?
包括哪几部分?
各有何特点?
3、形成层属于何种组织?
4、绘叶表面气孔、毛茸图。
实验四机械组织与基本组织
(1)掌握机械组织的形态和结构特征。
(2)熟悉机械组织和基本组织的类型。
(3)了解基本组织的形态。
显微镜、载玻片、盖玻片、尖头镊、解剖针、刀片、剪刀、吸水纸、擦镜纸、水合氯醛、稀甘油、盐酸、间苯三酚试液、蒸馏水。
梨、肉桂粉末、钩藤粉末、薄荷茎横切永久制片。
(一)机械组织
1、厚角组织:
取薄荷茎横切永久制片,观察棱角处表皮下的厚角组织细胞。
2、厚壁组织
取钩藤粉末透化装片,间苯三酚试液、盐酸染色。
观察其纤维。
取肉桂粉末透化装片,间苯三酚试液、盐酸染色。
观察石细胞和纤维。
取梨肉少许,压后透化装片,间苯三酚试液、盐酸染色。
观察石细胞。
(二)基本组织:
在上述的制片中观察其中的基本组织。
1、绘梨和肉桂纤维及石细胞图。
2、厚角组织和厚壁组织在形态和结构上有何异同?
实验五输导组织与分泌组织
(1)掌握机输导组织与分泌组织的形态和结构特征。
(2)熟悉输导组织和分泌组织的类型。
豆芽、生姜根茎、南瓜茎横切永久制片、南瓜茎纵切永久制片、松叶横切永久制片,桔皮横切永久制片。
(一)输导组织
1、导管与管胞
取南瓜茎横切永久制片、南瓜茎纵切永久制片,观察各种导管类型及管胞。
取豆芽茎组织,压碎,水合氯醛透化,间苯三酚试液、盐酸染色,加盖玻片。
镜下观察导管形态。
2、筛管:
取南瓜茎横切永久制片、南瓜茎纵切永久制片,观察筛管细胞形态及筛板、筛孔等结构。
3、分泌组织
取生姜根茎,压后透化装片,观察黄色的油细胞。
桔皮横切永久制片,观察分泌腔。
松叶横切永久制片,观察分泌道。
1、绘南瓜茎和豆芽茎各种导管图。
2、绘生姜油细胞图
3、导管
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