活化部分凝血活酶时间测定Word文档下载推荐.docx
- 文档编号:14538132
- 上传时间:2022-10-23
- 格式:DOCX
- 页数:7
- 大小:22.13KB
活化部分凝血活酶时间测定Word文档下载推荐.docx
《活化部分凝血活酶时间测定Word文档下载推荐.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《活化部分凝血活酶时间测定Word文档下载推荐.docx(7页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
3.1检测原理:
全自动血凝仪测定,散射光凝固法检测——确定量的血浆样本(50μl)经过一定时间(3)温育后,加入部分凝血活酶时间反应试剂(50μl),加温1,加入0.025250μl,加温4,采用波长660的光照射反应物,通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化,从散射光光强度的测定可得凝集曲线,反应物凝固的时间即活化部分凝血活酶时间。
3.2反应方法学溯源:
37℃条件下,以鞣花酸激活因子Ⅻ和Ⅺ,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板,在2+参与下,观察贫血小板血浆凝固所需时间,即为活化部分凝血活酶时间,是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验.
4.性能参数
4.1重复性≤2%
4.2分析和计算参数:
报告单位秒(S)
4.3样本量:
50,试剂量:
50激活剂,502
4.4检验时间:
在最长检验时间之内测出结果,标准设置最长检验时间:
190秒
4.5精密度范围:
1.3~6.0%
5.原始样品系统:
血浆
6.容器和添加剂类型
容器采用真空负压专用抗凝管,添加剂类型为0.109M枸橼酸钠
7.试剂及配套品
7.1激活剂试剂()
7.1.1商标:
德灵()
7.1.2包装规格:
10×
2
7.1.3货号4218-1
7.1.4成分:
脑磷脂(从干燥兔脑粉中提取)加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0×
10-4M的鞣花酸溶液
7.1.5使用方法:
液体试剂,直接使用
7.1.6储存:
未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期,开盖后2~8℃有效期7天,不能冰冻。
未被污染的试剂稳定期是:
2~8℃3年、18~25℃1年、37℃2天;
7.2氯化钙溶液()
7.2.1商标:
7.2.2包装规格:
15
7.2.3货号37
7.2.4成分:
0.025的氯化钙溶液
7.2.5使用方法:
液体试剂,直接使用.
7.2.6储存:
没开盖试剂放2~8℃存放至试剂瓶上有效期.开盖后2~8℃有效期7天.
7.3清洗液(I):
用于测定过程中的吸样针冲洗
7.3.1商标:
希森美康()
7.3.2包装规格:
50
7.3.3货号500A
7.3.4成分:
1%次氯酸钠及活性成分
7.3.5使用方法;
7.3.6储存:
没开盖试剂放2~8℃存放至包装有效期,开盖后放于仪器内有效期仅存4小时
7.4校准质控血浆()
7.4.1商标:
德灵()
7.4.2货号1(),29107010×
1
2(),29107110×
3(),29107210×
7.4.3使用方法:
1蒸馏水溶解置室温15分钟后使用
7.4.4储存:
室温:
2h,2~8℃:
4h,冷冻分装保存20℃<
2周70℃<
6个月
8.校准程序:
仪器的验证和光路系统校正
仪器的验证由生产商、代理商指定工程师和我科共同完成.灯泡大约半年更换一次,光路系统的校正由代理商完成.
9.程序步骤:
9.1标本采集与要求
9.1.1标本采集:
抽取静脉血1.8,加入到含0.2109(1:
9)的枸橼酸钠溶液抗凝真空试管中,并轻轻颠倒10次使之充分混匀,不得有凝块、不得形成泡沫,总量不得超过2.0±
0.2,并在试管上做好标识.采血应避免溶血和脂血,故患者应尽量空腹和避免在输入脂肪乳过程中或其后8小时内采血.采血后2小时内送到检验科,需要运输时应在低温条件下运输.采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤,外源性凝血因子进入针管,最好不与其它实验一起采集,否则由于标本的分配、分装而使血液停留在针管的时间延长.
9.1.2不合格标本的处理
对凝固、有凝块、严重溶血、重度黄疸、脂血、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的标本,按程序文件《样品核收、登记和保存程序》处理
9.1.3标本保存
检测应在标本采集后2小时内完成,2~8℃保存不超过4小时,分离后的血浆-20℃以下密封可保存2周.需长期保存的标本在-70℃下不超过6个月,且只能冻融1次,分析前在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。
分析后的标本不保存.
9.2检测前准备
采样后应尽快分离血浆(60分钟内进行),将标本1500×
g(3000)离心10分钟,务使血小板去除;
.在进行质控物和病人标本分析检测前,进行仪器状态和试剂检查,确保准备完好后才能进行分析.并将检查结果记录在相应的仪器设备使用记录表上.
9.3病人标本的检测
9.3.1开机:
开1500仪器左侧电源→开机后仪器进行自检、预热,当屏幕上显示时可以进行试验
9.3.2每日针冲洗:
在主屏幕上选,然后按下进行针冲洗
9.3.3准备试剂:
按照仪器试剂位置设定,把上述每项的试剂准备好,放在相应的位置
9.3.4准备反应杯:
打开仪器顶部反应杯储存槽,查看反应杯是否足够,需及时添加
9.3.5准备标本;
将离心好的样本放在相应的样本架上(一个架子可放10个样本),准备好放在进样器上
9.3.6输入试验项目:
按下主菜单上的键,在试验项目键点击,使项目下显示“-”变为“○”,按“↑”或“↓”将需要测试标本如上操作选择;
9.3.7输入样本号:
按下,按顺序输入样本的序号或病人的病历号
9.3.8开始检测:
待一切准备工作就绪,按下屏幕右上角键,仪器开始检测…
9.3.9查看结果:
返回主屏幕,检测的项目如果由“◎”变为“●”表明此试验已经完成,然后按下(储存结果)键,屏幕会换到结果显示界面,按下边第一个菜单,查看凝集曲线、吸光度、结果等,检查是否有错误信息,有错误报警的标本需考虑重测
9.3.10关机前冲洗针:
关机前需要洗针,按下,然后按下
9.3.11关机:
回到主屏幕下,切断仪器电源.
10.质量控制程序:
.
10.1质控物准备
用1蒸馏水溶解一瓶质控血浆,轻轻颠倒混匀约5秒,置于室温30分钟,用前摇匀即可,不要剧烈振摇.将未用完的质控血浆在室温保存2小时、2~8℃4小时、-20℃以下冰箱中可保存24小时
10.2上机检测
将质控标本加入样品杯,上机检测.具体操作详见1500血液凝固分析仪作业指导书
10.3质控规则
10.3.1质控图正常分布规律
各点应分布在均值的两侧,95.45%数据落在x±
2s内,99.73%数据落在x±
3s内.
10.3.2质控图失控规则
a)一个质控物的测定结果超过x±
3s(13s规则);
b)一个质控物的测定结果连续2次超过x+2s或2s(22s规则)
C)一个质控物的测定结果连续2次测定其中1次超过x+2s另1次超过2s(R4s规则)
d)一个质控物的测定结果连续4次超过1s或1s(41s规则)
e)连续10次质控物结果都在均数的同一侧(10x规则)
f)连续5次测定结果渐增或渐减(5T规则)
10.4室内质控分析与失控处理
10.4.1质控结果分析
检测人员对质控结果进行分析,在发现质控数据违背质控规则后,通知组长,协助处理.组长分析该失控信号的真伪,并做出是否发出与测定质控品相关的那批病人标本检验报告的决定,必要时由检验科主任处理.检测人员填写失控报告.
10.4.2失控原因分析极其处理过程
失控信号的出现受多种因素的影响,包括操作上的失误,试剂、校准品或质控品的失效,仪器维护不良以及采用的质控规则、控制限范围、一次测定的质控标本数等.解冻的质控血浆一定要先混匀再吸出至样品杯中,操作时间严格按作业指导书进行.所以,室内质控失效时.首先要查明失控原因,然后随机挑选出一定比例的病人标本进行重新测定,对失控做出恰当的判断.失控的处理原则见程序文件《内部质量控制管理程序》
10.5质控标本检测完毕后,及时将质控血浆放回冰箱20℃以下密封保存24小时.
11.干扰和交叉反应
多种药物如双香豆素、链激酶、尿酶、口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等可影响结果,如出现异常结果,需做进一步实验以确定导致异常的原因,溶血、黄疸、脂血标本或混浊样本影响结果,应重新采血.血标本与抗凝剂比例不当也影响检测结果.当红细胞比积过大(>
0.55)或过小(<
0.20)可影响测定结果,这时枸橼酸钠的用量为0.00185×
V1×
(1.00-α)×
100
(注枸橼酸钠用量,V1-血量,α-红细胞比积)
有下列浓度的物质存在时,对的干扰小于10%
标本类型
甘油三酯()
血色素()
结合胆红素()
正常
不正常
≤780
≤605
≤505
≤208
≤36
≤10
12.结果计算程序的原理
由仪器测定反应物凝固的时间即为活化部分凝血活酶时间
13.生物参考区间:
21.1-36.5S(患者结果超过正常对照10S上有临床意义)
14.患者检验结果的可报告区间
21~124秒
15.警告/危急值
:
≤20S或≥80S
16.实验室解释
16.1常用于内源性凝血系统(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子)的筛选及肝素抗凝治疗的监测
16.2延长:
见于先天性凝血因子缺乏(如血友病甲、乙,接触因子Ⅻ、Ⅺ缺乏、等);
多种凝血因子缺乏(如严重肝病、维生素K缺乏、、纤溶亢进等);
血液中有抗凝物质存在如凝血因子抑制物、狼疮抗凝物、华法林或肝素水平增高,FⅡ、FⅠ及FⅤ、FⅩ缺乏,大量输入库血。
16.3缩短:
见于高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态以及血栓前状态、血栓性疾病。
16.4是监测肝素治疗的首选指标。
要注意测定结果必须与肝素治疗范围的血浆浓度呈线性关系,否则不宜使用。
一般在肝素治疗期间,维持在正常对照的1.5~3.0倍为宜.
16.5对内源凝血途径因子(Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ)缺乏较敏感(血小板异常不影响)能检出Ⅷ小于25%的轻型血友病.对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感,故延长的最常见疾病为血友病.此时可进一步做纠正试验,即于患者血浆中加入1/4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清(试剂参见凝血酶原消耗试验的纠正试验),再做,如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正,则为因子Ⅷ缺乏;
如吸附血浆不能纠正,其余两者都能纠正,则为因子Ⅸ缺乏;
如三者都不能纠正,则为病理性循环抗凝物质。
17.安全性防护措施
17.1在操作仪器时应按照仪器作业指导书进行操作,防止受伤、触电等
17.2在进行维护和检查工作时,请带上橡胶手套,使用专用的工具和部件,在工作完成后,用消毒液清洗双手,以免发生感染
17.3在处理血样时应小心谨慎,应始终戴上橡胶手套,以避免发生细菌感染,若样本溅入眼睛或者伤口,须用大量清水冲洗,并立即就诊
17.4在处理废液以及装卸相关部件时,请勿接触废液.如果其中包含血样,可能导致感染发生.如果无意接触血液,首先用消毒液清洗,然后用肥皂清洗
17.5在处理试剂时:
如果试剂不慎落入眼睛,立即用大量清水冲洗,并接受治疗;
如果不慎吞入试剂,立即向医生求助,喝入大量清水,并尽量呕出吞入试剂;
如果试剂沾上皮肤或者手,用大量清水冲洗;
在丢弃废液和消耗品时,请按照处理医疗、传染性、工业性废水的步骤进行处理,如果其中含有血样,可能导致细菌感染.
18.变异的潜在来源
18.1冷冻血浆可减低对狼疮抗凝物以及对Ⅻ、Ⅺ、、缺乏的灵敏度;
室温下,FⅧ易失去活性,因此恰当的标本处理非常重要。
18.2高脂血症可使延长
18.3抗凝剂:
草酸盐、、肝素不适用于检查
18.4标本采集处理不当,如
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 活化 部分 凝血 时间 测定