微生物标本采集手册Word文档格式.docx

微生物标本采集手册Word文档格式.docx

《微生物标本采集手册Word文档格式.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《微生物标本采集手册Word文档格式.docx（19页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

一、检查项目

血液、骨髓液的细菌培养

二、标本采集

【标本采集前的注意事项】

应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。

【标本送检指征】

病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。

1发热（≥38℃）或低温（≤36℃）

2寒战

3白细胞增多（＞10×

109/L，特别有“核左移”时）

4粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×

109/L）

5血小板减少

6皮肤、粘膜出血

7昏迷

8多器官衰竭

9血压降低

10呼吸加快

几种特殊情况：

1可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。

2老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。

骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。

但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。

【标本采集的容器】

法国梅里埃公司血培养仪配套血培养瓶（我院）或手工血培养瓶。

【标本的采集方法】

防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。

1皮肤消毒程序：

严格按以下三步法进行：

（1）75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。

（2）用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2％碘酊作用30s或聚维酮碘作用60s，从穿刺点向外以1.5～2cm直径画圈进行消毒。

（3）75％酒精脱碘。

对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。

2培养瓶消毒程序

（1）用75％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。

（2）酒精作用60s。

（3）在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。

3培养瓶接种程序

抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。

如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中。

【标本采集注意事项】

1血培养采集的时间和频率

（1）采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h内采集2～3份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2瓶。

因为研究已证实，2～3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。

（2）入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3天，每天采集2份，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。

（3）对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发热后1h采集。

因为发热时血液中可能没有细菌。

（4）可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2～3份血培养。

（5）不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，先采集2～3份血标本，24～36h后估计体温升高之前，再采集2份以上。

（6）可疑为菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血培养方法，选择其它种类的培养瓶，如高渗培养瓶，中和抗生素培养瓶，结核菌培养瓶等，以获得罕见的或苛氧的微生物。

（7）可疑为细菌性心内膜炎，在1～2h内多部位采集3份血标本，如果24h阴性，再采取3份以上的血标本。

2采血量

成人：

推荐每个血培养瓶应加的血量为5～10ml，血液和肉汤比为1：

5～10（体积：

体积）。

儿童：

因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～5ml用于血培养。

血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3～5％。

人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌的生长。

骨髓采血量一般为1～2ml。

【标本的送检地点】

检验科微生物室，非正常上班时间送检验科急诊化验室。

*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。

【标本的保存】

含血样的培养瓶应立即送往实验室；

如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放。

因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降。

在运往实验室的途中如果天气寒冷，应采取一定的保温措施。

第二章痰标本的微生物检验

痰液的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。

二、标本采集

应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。

1咳嗽、咳痰：

痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。

2咯血：

肺结核病人常痰中带血。

3呼吸困难

4发热

5胸痛：

当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛。

*肺部感染的患者有25～50％可能发生菌血症，应同时作血培养。

【标本采集容器】

一次性无菌留痰盒。

【标本采集方法】

1自然咳痰法：

咳痰前，先用清水或漱口液反复漱口（为减少口腔正常菌群污染标本），然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内。

对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10％NaCL水溶液，使痰液易于排出。

对咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽。

2气管镜采集法：

用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。

3胃内采痰法：

无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。

4管穿刺法：

主要用于厌氧菌培养

小儿取痰法：

用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。

1采集时间：

（1）以晨痰为好。

多数病人清晨痰较多，易于采集。

且清晨痰含有的病理成分较多。

会增加培养的阳性率。

（2）最好在应用抗菌药物之前采集标本。

2送检

采集后应立即送检，以防止某些细菌在外环境中死亡。

做结核分支杆菌和真菌培养的标本如不能及时送检，可放4℃保存，以免杂菌生长。

【标本的送检地点】

检验科微生物室

第三章上呼吸道标本的微生物检验

一、检验项目

上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。

1病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。

2细菌性咽－扁桃体炎：

明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39℃以上。

3上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。

咽拭子或鼻咽拭子。

嘱患者用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，拭子要避免接触口腔和舌粘膜。

应于抗生素应用之前。

时间上可无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，也应晨起后采集为佳。

2送检：

应立即送检。

检验科微生物室。

第四章尿液标本的微生物检验

尿液的细菌培养，真菌培养、结核菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。

1有典型的尿路感染症状；

2肉眼脓尿或血尿；

3尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性；

4不明原因的发热，无其他局部症状；

5留置导尿管的病人出现发热；

6膀胱排空功能受损；

7泌尿系统疾病手术前。

无菌试管或无菌尿液标本留取容器。

1清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，开始排尿，将前段尿排去，插入性接取中段尿约10ml于无菌容器中，立即送检，于一小时内接种。

该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。

2耻骨上膀胱穿刺：

使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液，是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。

主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。

3直接导尿：

按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。

可减少尿液标本的污染，准确地反映膀胱感染情况。

但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。

4小儿收集包：

对于无控制能力的小儿可应用收集包收集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时才有意义。

如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复查。

5留置导尿管收集尿液：

利用留置导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。

长期留置导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本。

一般于晨起第一次尿液送检。

应选在抗菌药物应用之前。

第五章粪便标本的微生物检验

粪便标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、肠道菌群、真菌涂片、结核菌涂片。

【标本送检指征】

1急性腹泻：

大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。

2慢性腹泻：

大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状。

3无痛性大量水样便或米泔样稀便。

4先吐后泻：

恶心、呕吐、腹痛、腹泻。

有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。

5抗生素治疗后腹泻：

常发生于长期抗生素治疗后，糊状