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4.五级装配:
第一级,小分子有机物的形成
第二级,小分子有机物组装成生物大分子
第三级,由生物大分子进一步组装成细胞的高级结构
第四级,由生物大分子组装成具有空间结构和生物功能的细胞器
第五级,由各种细胞器组装成完整细胞
6.支原体:
目前已知的最小的细胞
第二章细胞生物的研究方法和技术
1.显微镜技术:
光镜标本制备技术、
2.光镜标本制备技术步骤:
样品固定、包埋与切片、染色
3.电子显微镜种类:
透射电子显微镜,扫描电镜,金属投影,冷冻断裂和冷冻石刻电镜,复染技术,扫描隧道显微镜
4.细胞化学技术:
酶细胞化学技术,免疫细胞化学技术,放射自显影
5.细胞分选技术:
流式细胞术
6.分离技术:
离心技术,层析技术,电泳技术
1.细胞功能:
外界与通透性障碍,组织和功能定位,运输作用,细胞间通讯,信号检测
2.膜化学组成:
膜脂,膜糖,膜蛋白
3.膜脂的三个种类:
磷脂,糖脂,胆固醇
4.脂质体用途:
用作生物膜的研究模型,作为生物大分子与药物的运载体
5.膜糖功能:
细胞与环境的相互作用,接触抑制,信号转导,蛋白质分选,保护作用。
6.膜蛋白类型:
整合蛋白,外周蛋白,脂锚定蛋白
7.膜蛋白功能:
运输蛋白,酶,连接蛋白,受体(信号接受和传递)
8.不对称性的研究方法:
冰冻断裂复型,冰冻蚀刻
9.膜流动性研究方法:
质膜融合,淋巴细胞的成斑成帽效应,荧光漂白恢复技术
10.膜流动性的重要性:
酶活性,信号转导,物质运输,能量转换,细胞周期
11.影响膜脂流动性的因素:
脂肪酸链,胆固醇,卵磷脂/鞘磷脂比值
12.影响膜蛋白流动的因素:
整合蛋白,膜骨架,细胞外基因,相邻细胞,细胞外配体、抗体、药物大分子
13.膜骨架的主要蛋白:
血影蛋白,肌动蛋白和原肌球蛋白,带4.1蛋白,锚定蛋白
14.转运蛋白质包括:
载体蛋白,通道蛋白
15.协同运输的方向:
同向协同,反向协同
1.细胞表面结构:
细胞外被、膜骨架、胞质溶胶
2.细胞外被功能:
连接,细胞保护,屏障
3.糖萼:
由细胞表面的碳水化合物形成的质膜保护层,又称为多糖包被。
4.细胞壁成分:
纤维素,半纤维素,果胶质,木质素,糖蛋白
5.细胞外基质成分:
蛋白聚糖(成分是糖胺聚糖),结构蛋白,黏着蛋白
6.透明质酸:
细胞外基质中游离存在,在结缔组织中起强化、弹性和润滑作用,具有抗压能力
7.胶原的功能:
是骨、腱和皮肤组织中的主要蛋白,起细胞外基因骨架作用;
促进细胞生长;
维持并诱导细胞分化。
8.弹性蛋白:
是弹性纤维的主要成分,富含甘氨酸和谷氨酸。
9.黏着蛋白的种类:
纤粘连蛋白FN,层粘连蛋白LN
10.FN功能:
介导细胞黏着,是细胞外基质的组织者,影响细胞的迁移
11.LN功能:
是基膜的主要结构;
介导细胞黏着于胶原,使之发生铺展;
影响细胞迁移、生长、分化。
12.基膜的组成成分:
层粘连蛋白,巢蛋白,Ⅳ型胶原,硫酸肝素糖蛋白
13.基膜作用:
对组织起支持作用,调节分子通透性,作为细胞运动的选择性通透屏障
14.细胞识别中起作用的事糖被,引起细胞黏着的是膜蛋白
15.细胞识别系统:
抗原—抗体的识别,酶与底物的识别,细胞间的识别,酶与信号分子的识别
16.识别反应三类型:
内吞,细胞黏着,信号反应
17.钙黏着蛋白能通过它们所在的细胞类型进行区别:
E-钙黏着蛋白(表皮),N-钙黏着蛋白(神经),P-钙黏着蛋白(胎盘)
18.斑块连接分为:
黏着连接,桥粒
19.黏着连接有两种:
黏着带:
细胞-细胞间黏着斑:
细胞与细胞外基质
20.参与黏着连接的组分:
钙黏着蛋白,肌动蛋白,细胞质斑
21.黏着斑组分:
整联蛋白,纤连蛋白
22.桥粒分为:
桥粒(钙黏着蛋白),半桥粒(整联蛋白)
细胞是通过中间纤维锚定在细胞骨架上。
23.通讯连接:
一种特殊的细胞连接,位于特化的具有细胞间通讯作用的细胞。
方式:
间隙连接,胞间连接,化学突触
1.细胞通讯的一般过程:
识别,信号转导
2.细胞应答包括:
酶活性的变化,基因表达的变化,细胞骨架,通透性的变化,细胞死亡程序的变化
3.细胞通讯的方式:
信号分子,相邻细胞表面分子的黏着,细胞与细胞外基质连接
4.细胞通讯的基本过程:
①信号分子的合成②信号分子的释放③信号分子的传递④靶细胞与信号分子识别⑤胞外信号的跨膜转导⑥靶分子的激活和细胞应答的开始
5.信号分子分为:
水溶性,脂溶性
6.信号分子与细胞通讯:
糖分泌,化学突触,内分泌
7.信号分子种类:
激素(内分泌信号),局部介质(糖分泌信号),神经递质(神经元信号)
8.受体存在位置:
细胞表面受体(水溶性),细胞内部受体(脂溶性)
9.细胞内部受体的基本结构:
C端配体结合结构域,中间结构域,N端转录激活结构域
10.细胞表面受体主要种类:
离子通道偶联受体,G蛋白偶联受体,酶连受体。
11.跨膜受体:
12.研究细胞表面受体的方法:
单克隆抗体标记法,亲和标记法
13.两种信号转导类型:
G-蛋白,酶活性。
14.信号转导包括:
磷酸化和去磷酸化
15.级联反应:
16.第二信使特点:
仅在细胞内部起作用,能启动或调节细胞内稍晚的反应,五种(cAMP,DG,IP3,cGMP,Ca2+)
17.细胞质膜上最多,最重要的信号转
导系统:
G-蛋白连接的受体
18.信号转导系统的三部分:
七个螺旋跨膜受体,G-蛋白,效应物
19.G-蛋白连接的受体的两个主要结构域:
外部结构域(识别信号分子),内部结构域(连接到G蛋白,调控某种结合酶的活性,产生第二信使)
20.效应物:
接收信息后能够产生第二信使的物质
21.G蛋白的α亚基的三个功能位点:
GTP结合位点,GTP酶活性位点,ATP核糖化位点
22.PKA中,第二信使cAMP的类型:
激活型,抑制型
23.激活型系统的组成:
Rs激活型受体,Gs激活型的G蛋白,效应物
24.抑制型系统的组成:
抑制型受体,抑制型G蛋白(Giprotein),效应物
25.PKA信号途径:
产生cAMP,信号放大(蛋白激酶A的活化),信号的解除和抑制
26.被激活的PKA作用方式:
使关键把酶磷酸化,调节基因表达
27.毒素影响cAMP信号途径:
霍乱毒素(choleratoxin),百日咳毒素(pertussistoxin)
28.信号系统的组成:
受体,Gq蛋白,PLC-β(激活PLC,在PKA途径中激活AC)
29.PKC途径的第二信使:
双信号(DAG和IP3的产生)
30.细胞如何调控Ca2+浓度?
①细胞中存在Ca2+泵可帮助细胞进行Ca2+调控
②细胞质膜的一侧有和Ca2+结合的位点,一次可结合两个Ca2+,结合后使酶激活,并结合上一分子的ATP,伴随ATP的水解和酶被磷酸化,Ca2+泵构型发生改变,结合Ca2+的一面转到细胞外侧,由于结合亲和力低的Ca2+被释放,此时酶发生去磷酸化,构型恢复到静止状态。
③当细胞内Ca2+浓度升高,Ca2+同钙调蛋白结合,形成复合物,该复合物同抑制区结合,释放激活位点,泵开始工作。
当浓度低时,CaM同抑制区脱离,抑制区又同激活位点结合,使泵处于静止状态。
④另一种情况。
抑制区的磷酸化从而失去抑制作用,反之,起抑制作用。
32.信号的终止:
DAG的水解,IP3的水解,Ca2+的水解
33.酶连接受体的特点:
不需要G蛋白,而是通过受体自身的蛋白激酶的活性来完成信号跨膜转换。
该通过对信号反应慢。
与细胞分裂有关
34.酶连受体的结构:
配体结合区,像PK的区域,催化区域
35.酶连受体类型:
受体酪氨酸激酶,受体鸟苷环化酶,受体酪氨酸磷酸酶,受体丝氨酸激酶,酪氨酸激酶偶联受体。
内源酶促活性受体
36.Ras的信号放大作用:
蛋白活性改变,基因表达改变
37.趋同(convergence):
不同的信号因子作用于不同的受体,但能整合激活一个共同的效应物。
(信号不同,受体不同,激活产物相同)
趋异(divergence):
相同配体,能转换激活许多不同的效应物,引起细胞不同反应。
(信号相同,受体相同,效应不同)
交谈(crosstalk):
不同信号转导途径间的相互影响。
(信号分子不同,受体不同,效应相互交谈、影响。
)
38.信号终止的途径:
信号分子的水解,受体钝化,受体的减量调节
1,核糖体的rRNA基因:
选择性扩增,转录,前体rRNA的加工和修饰,5SrRNA的合成和加工
2,前体rRNA加工修饰时,甲基化修饰主要部位在核糖第二位羟基上。
3,RNA聚合酶Ⅰ参与rRNA三大亚基的转录
4,5SrRNA的合成和加工时,在核仁外进行,通过聚合酶Ⅲ转录
5,小亚基的rRNA和蛋白质的装配关系:
组成核糖体的蛋白质和rRNA在大小亚基中均有一定的空间排布
6,核糖体在组装过程中,蛋白质与RNA的结合具有先后层次。
根据rRNA结合的顺序,将核糖体蛋白分为两种:
初级结合蛋白,次级结合蛋白
7,大肠杆菌的核糖体与叶绿体核糖体亚基重组后具有功能,线粒体的核糖体亚基同原核生物核糖体亚基相互重组后核糖体没有功能。
8,核糖体与mRNA结合的位点:
SD序列
9,嘌呤毒素(puromycin)对蛋白质合成有抑制作用
10,N端规则(N-endrule):
多肽链N端特异性的氨基酸与半衰期有关
11,真核生物中的小分子RNA种类:
snRNA(核内小RNA),scRNA(胞质小RNA)
12,反义snRNA在前体RNA加工中的作用:
与特定的蛋白质形成核小核糖核蛋白,在真核生物的前体rRNA加工时候需要大量的snRNA的帮助,snRNA与rRNA进行互补形成的RNA-RNA双链部分可作为前体rRNA进行加工的标志
13,核剪接:
发生在细胞核中,从前体mRNA中切除内含子,加工成熟的mRNA被运送到细胞质。
遵循GU-AU规则
14,Ⅰ组内含子剪接特点:
需要游离的鸟苷,存在于低等真核生物细胞核rRNA基因和真菌线粒体基因中。
基因:
前体rRNA、mRNA、tRNA
15,Ⅱ组内含子剪接特点:
内含子转录后形成6个发夹环,遵循GU-AU规则,不需要snRNA参与,不形成剪接体,形成套索,存在的细胞器:
线粒体和叶绿体。
前体mRNA
1,外膜功能:
半透性。
参与磷脂的合成,将线粒体基质中进行彻底氧化的物质先进行初步分解
2,内膜功能:
高度不通透。
ATP的合成和电子传递链参与氧化磷酸化。
转运蛋白参与。
合成酶类:
合成DNA、RNA、蛋白质
3,膜间隙功能:
建立电化学梯度
4,细胞内Ca2+作用?
细胞如何调控Ca2+作用?
(三个部位)
5,(12分)蛋白质合成后如何转运到细胞的不同部位?
(三条途径:
内质网高尔基体溶酶体,线粒体叶绿体,核内)
6,Ca2+有哪些功能?
(膜内:
Ca2+泵,Na+-Ca2+交换器,膜外:
内质网Ca2+泵,线粒体,细胞质基质中钙调蛋白)
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