移植囊胚数质量评分及形成时间对38岁女性冻融周期临床结局的影响.docx
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移植囊胚数质量评分及形成时间对38岁女性冻融周期临床结局的影响
摘要
目的 探讨移植囊胚数、质量及形成时间对<38岁女性冻融胚胎移植(frozen-thawedembryotransfer,FET)临床结局的影响。
方法 回顾性队列研究分析2017年1月至2020年1月期间在中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院生殖中心行冻融囊胚移植且年龄<38岁女性1441个周期的临床资料。
根据囊胚移植数、质量[内细胞团(innercellmass,ICM)、外胚滋养层细胞(trophectoderm,TE)评分]分为单优质囊胚移植组(单优组)、双优质囊胚移植组(双优组);再根据囊胚移植数、质量及形成时间将非优质囊胚分为双BC级囊胚移植组(双BC组)、双CB级囊胚移植组(双CB组)、BC级+CB级双囊胚移植组(BC+CB组)、单BC级囊胚移植组(单BC组)、单CB级囊胚移植组(单CB组)、第5日(day5,D5)单BC级囊胚移植组(D5单BC组)、D5单CB级囊胚移植组(D5单CB组)及第6日(day6,D6)单BC级囊胚移植组(D6单BC组),比较各组的临床妊娠率、种植率、早期流产率、多胎妊娠率和异位妊娠率。
结果 单优组的临床妊娠率、早期流产率、异位妊娠率与双优组间差异均无统计学意义(P均>0.05),多胎妊娠率[2.96%(14/473)]则显著低于双优组[55.65%(69/124)]、双BC组[42.55%(20/47)]、双CB组[63.49%(473/745)比35.22%(31/83)]、BC+CB组[45.57%(36/79)](P<0.001);单优组的临床妊娠率和种植率显著高于单CB组[63.49%(473/745)比45.59%(30/68),63.49%(473/745)比45.59%(30/68),P均=0.002],与单BC组间差异无统计学意义(P>0.05),各单囊胚移植组间多胎妊娠率、早期流产率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P均>0.05);D5单BC组的临床妊娠率、种植率均显著高于D6单BC组[65.79%(50/76)比39.47%(15/38),65.79%(50/76)比39.47%(15/38),P均<0.001];D5单CB组的临床妊娠率、种植率均高于D6单BC组,但差异无统计学意义(P>0.05)。
结论 冻融囊胚移植周期,年龄<38岁女性应行单优质囊胚移植;无优质囊胚时,应优先选择D5ICM评分更高的单囊胚移植,其次选择D5TE评分更高的单囊胚移植。
【关键词】 囊胚;评分;冻融胚胎移植;临床结局
随着人类辅助生殖技术(assistedreproductivetechnology,ART)水平的提高,临床妊娠率已得到极大的改善,但同时也带来多胎妊娠率持续居高不下的问题。
多胎妊娠严重威胁母婴安全,妊娠期并发症增加3~7倍,新生儿死亡率及发病率增加4~40倍[1-2]。
如何在提高患者妊娠率的同时降低并发症尤其多胎妊娠的发生,是生殖医学领域面临的新挑战。
目前,选择性单囊胚移植(electivesingleblastocysttransfer,eSBT)可获得良好的妊娠结局并降低多胎妊娠的发生已成为共识,而如何选择发育和种植潜能更高的非优质囊胚尚无定论[3-4]。
本研究通过回顾性分析38岁以下女性移植囊胚数、质量及形成时间对冻融周期临床结局的影响,旨在获得良好妊娠结局的同时降低多胎妊娠率。
资料与方法
一.
研究对象
回顾性队列研究分析2017年1月至2020年1月期间在中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院生殖中心行冻融胚胎移植(frozen-thawedembryotransfer,FET)患者的资料。
纳入标准:
①女方<38岁;②均行冻融囊胚移植;③FET周期数≤2。
排除标准:
①复发性流产患者;②反复种植失败患者;③免疫异常患者(如抗磷脂抗体综合征、红斑狼疮、白塞氏病等);④严重子宫及宫腔病变如子宫畸形、宫腔粘连、合并子宫肌瘤压迫内膜;⑤重度子宫内膜异位症或子宫腺肌瘤;⑥行胚胎植入前遗传学检测(preimplantationgenetictesting,PGT)的囊胚。
本研究符合《赫尔辛基宣言》的基本原则,所有患者均签署知情同意书。
二.
分组
根据移植囊胚数、等级[内细胞团(innercellmass,ICM),外胚滋养层细胞(trophectoderm,TE)评分]分为单优质囊胚移植组(单优组)、双优质囊胚移植组(双优组);再根据移植囊胚数、质量及形成时间将非优质囊胚分为双BC级囊胚移植组(双BC组)、双CB级囊胚移植组(双CB组)、BC级+CB级双囊胚移植组(BC+CB组)、单BC级囊胚移植组(单BC组)、单CB级囊胚移植组(单CB组)、第5日(day5,D5)单BC级囊胚移植组(D5单BC组)、D5单CB级囊胚移植组(D5单CB组)及第6日(day6,D6)单BC级囊胚移植组(D6单BC组)。
三.
研究方法
1.促排卵方案及胚胎培养:
采用本中心常规方案进行超促排卵,当主导卵泡直径达18mm时,给予重组人绒毛膜促性腺激素(recombinanthumanchorionicgonadotropin,rhCG,艾泽,德国默克雪兰诺)250μg皮下注射,36~38h在超声引导下经阴道取卵,根据患者精液参数选择常规体外受精(invitrofertilization,IVF)或卵胞质内单精子注射(intracytoplasmicsperminjection,ICSI),18h后观察受精情况,第3日(day3,D3)进行卵裂胚评分和胚胎移植,对不宜移植如输卵管或宫腔积液、高卵巢过度刺激综合征(ovarianhyperstimulationsyndrome,OHSS)风险、扳机日孕酮水平≥1.5ng/L等患者及D3移植后剩余胚胎进行囊胚培养,D5及D6对囊胚进行评分和玻璃化冷冻。
2.囊胚评分及冷冻标准:
采用Gardner[5]方法对囊胚进行评分,根据囊胚腔扩张程度分为6级。
1级,早期有腔囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2;2级,囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2;3级,完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据胚胎;4级,囊胚腔完全充满胚胎,体积大于早期胚胎,透明带变薄;5级,正在孵出的囊胚,囊胚的一部分开始从透明带中孵出;6级,孵出囊胚,囊胚全部从透明带中孵出。
并按照ICM和TE的细胞数量和形态分级(6个级别)。
ICM分级包括A级,内细胞团紧密,细胞数量多;B级,内细胞团松散;C级,内细胞团数量极少或较少。
TE分级包括A级,细胞数量多,形成紧密排列的细胞层;B级,细胞数量少,排列松散;C级,极少数细胞。
本中心囊胚冷冻及评分标准为4级且ICM和TE评分至少一个在B级以上。
优质囊胚标准为4级,ICM和TE均在B级以上(含B级);非优质囊胚为≥4级,ICM和TE评分为BC、CB者。
3.内膜准备及胚胎移植:
患者采用激素替代周期或自然周期准备子宫内膜。
①激素替代周期:
月经周期第2~4日口服戊酸雌二醇(德国先灵制药有限公司)4~6mg/d,12~14d行超声检查,内膜厚度≥8mm时,肌内注射黄体酮注射液(浙江仙琚制药股份有限公司)40mg/d进行内膜转化,第6日进行胚胎复苏。
②自然周期:
月经周期第9~12日开始阴道B超监测卵泡发育,当优势卵泡直径>17~20mm时,用或不用肌内注射hCG(珠海丽珠制药有限公司)6000IU诱导排卵,当B超监测已排卵时加用地屈孕酮[雅培贸易(上海)有限公司]40mg/d,排卵后D5进行胚胎复苏。
囊腔恢复达30%以上者进行胚胎移植。
术后继续进行黄体支持至移植后13d,妊娠者黄体支持至移植后10周。
4.主要观察指标:
临床妊娠率、种植率、早期流产率和多胎率。
胚胎移植后30~35d阴道超声下见孕囊者判定为临床妊娠,妊娠12周内胚胎停止发育或发生妊娠物排出诊断为早期流产。
临床妊娠率=临床妊娠周期数/总移植周期数×100%;种植率=孕囊数/总移植胚胎数×100%;早期流产率=早期流产周期数/临床妊娠周期数×100%;多胎妊娠率=多胎妊娠周期数/临床妊娠周期数×100%;异位妊娠率=异位妊娠周期数/临床妊娠周期数×100%。
四.
统计学方法
采用SPSS19.0软件统计分析数据,符合正态分布的计量资料用均数±标准差(±s)表示,组间采用t检验或单因素方差分析;计数资料用百分比或率(%)表示,采用χ2检验或Fisher’Exact检验,P<0.05为差异有统计学意义。
结果
一.
单优组和双优组临床结局比较
由表1可见,单优组与双优组患者年龄、体质量指数(bodymassindex,BMI)、转化日内膜厚度、临床妊娠率、早期流产率和异位妊娠率间差异均无统计学意义(P>0.05);单优组的种植率(63.49%)显著高于双优组(51.33%),多胎妊娠率(2.96%)则显著低于双优组(55.65%)(P均<0.001)。
二.
双非优囊胚移植的临床结局比较
由表2可见,双BC组与双CB组及BC+CB组间患者年龄、BMI、转化日内膜厚度、种植率、早期流产率、多胎妊娠率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P均>0.05)。
双BC组的临床妊娠率(70.15%)虽高于双CB组(65.19%)及BC+CB组(63.20%),但差异均无统计学意义(P>0.05)。
三.
单囊胚移植患者的临床结局比较
由表3可见,单优组与单BC组及单CB组间患者年龄、BMI、转化日内膜厚度差异均无统计学意义(P>0.05)。
单优组D5囊胚占比显著高于单BC组及单CB组(P均<0.001),但单BC组与单CB组间差异无统计学意义(P>0.05)。
单优组的临床妊娠率和种植率均显著高于单CB组(P=0.002),但与单BC组间差异无统计学意义(P>0.05)。
单BC组的临床妊娠率和种植率均明显高于单CB组,但差异无统计学意义(P>0.05)。
三组间早期流产率、多胎妊娠率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。
四.
不同发育时间非优质囊胚移植的临床结局比较
由表4可见,D5单BC组、D5单CB组及D6单BC组间患者年龄、BMI、转化日内膜厚度差异均无统计学意义(P>0.05)。
D5单BC组的临床妊娠率和种植率均显著高于D6单BC组(P<0.001);D5单CB组的临床妊娠率和种植率高于D6单BC组,D6单BC组早期流产率高于D5单BC组及D5单CB组,但差异均无统计学意义(P>0.05);三组间多胎妊娠率、异位妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。
讨论
多胎妊娠严重危害母婴健康,并给患者家庭和社会带来巨大的经济负担。
因此,帮助不孕患者获得一个健康、足月分娩的活婴是生殖医学工作者的最终目标。
2018年中华医学会生殖医学分会制定的《关于辅助生殖胚胎移植数目的专家共识》明确指出,应进一步减少胚胎移植数目,规避多胎妊娠的发生和母婴风险[6]。
囊胚因其具有更高的整倍体率和种植潜能,可获得较卵裂期胚胎移植更高的临床妊娠率和活产率(尤其冻融周期),但也带来更高的多胎妊娠率[7-9]。
有研究显示,在冻融囊胚移植周期中,即使移植2枚非优质囊胚(BC/CB级)多胎妊娠率也高达23.9%[10],因此单囊胚移植被认为是实现高临床妊娠率并避免多胎妊娠的有效手段[11]。
本研究的结果也证实,即使移植2枚非优质囊胚(双BC、双CB及BC+CB)其多胎妊娠率也高达35.22%~45.57%;而单优质囊胚移植可获得与双优质囊胚移植相近的临床妊娠率(P>0.05),多胎妊娠率则显著下降,表明冻融周期单优质囊胚移植既可获得良好临床结局,又是降低多胎妊娠率最有效的预防措施,并为实验室囊胚冷冻及临床制订胚胎移植策略提供了依据。
众所周知,囊胚由ICM和TE构成
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