体内药物分析课程必做作业答案Word格式文档下载.docx
- 文档编号:14076254
- 上传时间:2022-10-18
- 格式:DOCX
- 页数:21
- 大小:23.07KB
体内药物分析课程必做作业答案Word格式文档下载.docx
《体内药物分析课程必做作业答案Word格式文档下载.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《体内药物分析课程必做作业答案Word格式文档下载.docx(21页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
化学物质、合并用药;
人体昼夜节律、营养和精神状态。
为什么要进行体内药物分析?
体内药物分析的主要任务是什么?
为开展临床药学和临床药理学研究服务,以指导临床安全、合理、有效用药和正确评价新药。
体内药分的主要任务:
分析方法学的研究、治疗药物监测、药代动力学研究、人群代谢分型研究、体内内源性物质的测定及其它方面(药物滥用、吸毒、兴奋剂检测、法医毒物分析等)的应用。
2
药物进入体内后一般需经历哪些物理、化学变化?
这些变化与药理作用的关系如何?
物理变化——系指药物与生物大分子如血浆蛋白的结合反应。
化学变化——系指药物的代谢反应,包括一相代谢(氧化、还原、水解反应)和二相代谢反应(各种结合反应)
由于药物的作用强度与血液中游离药物的浓度密切相关,同时药物经代谢后活性发生了变化,故药物的物理、化学变化与药理作用密切有关。
药物在体内的代谢反应有哪些类型?
3
常用生物样本有哪些?
如何采集、储存。
常用生物样本有:
血样(血浆、血清和全血)、尿样、唾液。
采集与储存:
血浆——全血加抗凝剂,离心,取上清液;
血清——全血离心,取上清液。
采血后必须尽快离心分离出血浆或血清,置-20℃以下冷冻保存。
尿样——收集服药后一定时间内尿样,记录体积,混合均匀后取一定量,测定尿中药物浓度,计算一定时间内尿中药物的累积量。
唾液——漱口15分钟后收集口内自然流出或经舌在口内搅动后流出的混合唾液,离心后取上清液。
样本采集后不能及时测定,可置4℃冷藏,若放置时间较长,则需-20℃~-80℃冷冻保存。
生物样品测定前为什么要除去蛋白质?
除去蛋白质的常用方法有哪些?
除蛋白质的意义:
使结合型药物释放出来,以测定总浓度。
得到较“干净”的提取液,减少乳化。
消除对测定的干扰。
常用去蛋白质方法:
蛋白质沉淀法——生成不溶性盐或盐析和脱水作用。
包括:
加酸类、重金属盐、中性盐和能与水混溶的有机溶剂等,如:
三氯乙酸、高氯酸、Cu2+、硫酸铵、甲醇、乙腈等。
组织酶消化法——蛋白水解酶,如胰蛋白酶、胃蛋白酶等。
影响液-液提取和液-固提取效率的因素分别有哪些?
影响液-液提取的因素有:
水相pH提取溶剂离子强度
影响液-固提取的主要因素有:
固定相洗脱液流速样品装载量
4
评价分析方法的效能指标包括哪些项目?
如何求算?
试述体内药物分析方法设定的一般步骤。
首先进行文献查阅,设计方案,然后通过实验加以验证。
一般实验步骤如下:
以纯品进行测定——选择最佳测定条件(线性,灵敏度、pH、检测波长等)。
空白样品测定——按设定的方法进行前处理和测定,考察空白值的大小和干扰程度。
以水代替空白样品,添加标准品后测定,以获得提取回收率的大致情况,从而对前处理中各步操作条件进行选择。
空白样品中添加标准后测定——求样品回收率,建立标准曲线等。
体内实样测定——根据实样测定结果来判断设定的方法是否合理、可行。
以上步骤需要反复试验以获得最佳实验条件。
阐述定量限与检测限的定义、区别及表示方法。
定量限——即定量下限(LLOQ),表示药物可定量测定的最低量,须符合一定精密度和准确度要求,常以标准曲线最低浓度点来确定,或以S/N=5~10确定。
检测限(LOD)——表示药物的最低可测度,不必定量,通常以信噪比(S/N)=2~3时被测药物的绝对量表示;
两者的区别主要在于是否有定量要求:
LOD没有定量要求,而LLOQ则有定量要求。
体内药物分析方法有哪些?
各有何优缺点?
体内药物分析方法可分为三大类:
光谱法——包括比色法、紫外法和荧光法。
方法优点是操作简便、快速,所需设备简单。
其缺点是不具备分离功能,选择性较差,对前处理要求高;
比色法和紫外法灵敏度较低。
免疫法——包括放射免疫、酶免疫、荧光免疫等。
方法优点是灵敏、专属,操作简便、快速,对样品预处理要求不高。
其缺点是精密度较差,需要试剂盒和专属仪器。
色谱分析法——包括HPLC,GC,LC/MS,GC/MS等。
方法优点是具有分离分析功能,是评价其它方法的参比方法。
5
紫外法消除干扰的方法有哪些?
说明原理和应用条件。
P82
1.差示分光光度法
(1)利用最大吸收波长进行测定
(2)利用最小吸收波长处的增色效应进行测定
(3)利用最大吸收与最小吸收之差(即振幅)进行测定
2.双波长测定法
如何进行激发光谱和荧光光谱的测定?
P91页
荧光物质吸收紫外光后被激发出荧光,如果将激发荧光的光源用单色器使其分光后,测定在每一波长的激发光照射下,物质所发射的荧光,以荧光强度对激光光波长作图,得到荧光物质的激光光谱,实际上,激发光谱就是荧光物质的吸收光谱。
激发光谱中最高峰的波长,能使荧光物质发出最强烈的荧光。
如果使激发光的波长和强度保持不变,而让物质所发生的荧光通过单色器色散,依次将不同波长的荧光照射于接收器上,并依次测其荧光强度,然后以荧光强度对相应的荧光波长作图,得到该物质的荧光发射光谱,简称荧光光谱。
6
免疫分析的基本原理、基本条件是什么?
基本原理:
即抗原-抗体结合反应。
在反应体系中,当抗体(Ab)量一定时,抗原(Ag)与标记抗原(Ag*)就与抗体发生竞争性结合反应,生成的[Ag*-Ab]与[Ag]的量呈负相关,这种特异的竞争性抑制的数量关系是免疫分析的定量基础。
基本条件是:
特异性抗体、标记抗原、未标记抗原(即标准品)。
常用免疫分析有哪几种?
相互间区别在哪些方面?
常用免疫分析有放射免疫法、酶免疫法、荧光免疫法、化学发光免疫法等,它们的主要区别在于标记物不同,由此采用的测定方法也不同。
在RIA中,结合物与游离标记物的分离方法有哪些?
7
气相色谱仪最常用检测器是什么?
有何特点?
适用范围?
GC法定量方法与内标选择原则?
对内标物的要求:
内标物必须是样品中不含有的组分,其保留时间应与待测物tR值相近,但R≥1.5,并具有足够的纯度。
内标物选择原则:
内标与被测物相差一个化学元素;
或内标与被测物为同系物;
或内标与被测物结构相似,或内标与被测物理化性质相似。
什么是正相色谱?
什么是反相色谱?
说明RP-HPLC法的常用固定相、流动相、适用范围,及流动相中甲醇等有机溶剂浓度变化对被测组分保留时间的影响。
常用固定相——ODS(C18)柱;
流动相——甲醇-水、乙腈-水、四氢呋喃-水;
适用范围——非极性至中等极性的各类分子型化合物;
流动相中甲醇等有机溶剂浓度增大,被测组分保留时间缩短。
HPLC仪常用检测器有哪些?
指出各种检测器的适用范围和适用注意点。
常用检测器有:
紫外、二极管阵列、荧光、蒸发光散射、电化学、质谱等。
紫外检测器——通用型检测器,适合具有紫外吸收的各种物质的检测。
二极管阵列检测器——具有光谱、色谱和三维图谱,可以进行定性和定量分析,以及色谱峰纯度检查。
荧光检测器——专属检测器,适合具有荧光或潜在荧光物质的检测,灵敏度高。
蒸发光散射检测器——适合于无紫外吸收物质的检测,要求流动相必须是挥发性的,不能含有非挥发性的缓冲盐。
电化学检测器——适合于具有氧化还原性质的物质,要求流动相必须有一定的电导率,一般为盐类、有机溶剂和水的混合物。
质谱检测器——具有定性定量功能和高的灵敏度。
8
什么是手性药物?
为什么要研究手性药物?
常用手性色谱方法有哪些?
分子结构中含有不对称碳原子(即手性中心)的药物称为手性药物。
因手性药物两对映体在体内的生物活性有差异,包括药效学差异(竞争拮抗等)和药动学差异(吸收、分布、代谢、排泄)。
为正确评价两对映体的作用和进行对映体药物的质量控制,所以要研究手性药物。
常用手性HPLC法有:
手性衍生化法、手性流动相添加剂法、手性固定相法。
9
毛细管电泳有哪几种分离模式?
毛细管电泳分离模式有毛细管区带电泳,胶束电动色谱,毛细管凝胶色谱,毛细管等电聚焦,毛细管等速电泳,移动界面毛细管电色谱。
10
常用联用技术有哪些?
常用联用技术有LC-MS,GC-MS,GC-GC,HPLC-HPLC,GC-HPLC,免疫分析-HPLC等
二、名词解释
TDM答:
治疗药物监测,为英文“therapeuticdrugmonitoring”的缩写。
一相代谢答:
指药物在体内发生的氧化反应、还原反应、水解反应。
二相代谢答:
指药物在体内的结合反应,包括:
葡萄糖醛酸结合、硫酸酯化、甲基化、乙酰基化、氨基酸缀合、谷胱甘肽缀合等。
生物转化答:
主要指体内代谢反应。
CYP1A2答:
细胞色素P4501族A亚族第2个酶基因。
血清答:
全血经离心后的上清液。
血浆答:
全血加抗凝剂(肝素等),经离心后的上清液。
RSD答:
相对标准偏差,即精密度的一种表示方法。
检测限答:
表示药物的最低可测度,不必定量,通常以S/N=2~3倍时被测药物的绝对量表示。
定量限答:
表示药物可定量测定的最低量,须符合一定精密度和准确度要求,常以标准曲线最低浓度点来确定,或以S/N=5~10确定。
提取回收率答:
指药物加入到生物样本中经前处理后测得的量与理论加入量的比值。
荧光光谱答:
以发射波长为横坐标,荧光强度为纵坐标所作的图。
激发光谱答:
以激发波长为横坐标,荧光强度为纵坐标所作的图
酶免疫分析答:
酶免疫分析是在放射免疫分析基础上发展起来的一种免疫分析方法,以酶代替同位素来标记药物,酶与底物、辅酶等反应后引起吸收光谱变化而被检测。
反相HPLC答:
即流动相极性大于固定相极性的HPLC。
ODS答:
即十八烷基硅烷键合硅胶,为常用反相HPLC的固定相。
三、填充题
体内药物分析的特点干扰杂质多,样品量少浓度低,不能再度获得完全相同的样品,B要有一定的仪器设备、工作量大等。
影响血药浓度的因素有机体因素(生理因素、遗传因素、病理因素)、药物因素(剂型、手性药物相互作用)、环境因素(药酶诱导剂、抑制剂、大气污染、饮食)等。
药物在体内发生的物理变化和化学变化分别是指和。
常用生物样品有血样(血浆、血清、全血),尿样,唾液等
常用去蛋白的方法有蛋白质沉淀法(加蛋白质沉淀剂,如:
三氯乙酸,高氯酸,Zn2+,Cu2+,硫酸铵,氯化钠,甲醇,乙腈,丙酮等)和组织酶消化法(加蛋白水解酶如:
胃蛋白酶,胰蛋白酶,枯草菌溶素等)
生物样品中药物与代谢
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 体内 药物 分析 课程 作业 答案