茶多酚提取实验Word文档下载推荐.docx
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1.浸提
1.1 预处理:
粉碎干茶叶;
粉碎的目的是与液体的接触面增大,使提取率增高;
1.2 提取:
准确称取经过预处理的干茶叶末10.00g,按照单因素实验的料液比、浸提温度、浸提时间分别搅拌浸提。
过滤(用抽滤的方法)得到茶多酚提取液。
用附一的方法测提取液中的茶多酚含量。
单因素实验步骤:
(1)将称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中,加入200mL蒸馏水,在85℃下,分别提取0.5h、0.75h、1.0h、1.25h、1.5h,测提取液的吸光度,绘制曲线图,找出最佳提取时间。
(2)称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中,加入200mL蒸馏水,在所测得的最佳提取时间下,分别在75℃、80℃、85℃、90℃、95℃下浸提,测提取液的吸光度,绘制曲线,找出最佳提取温度。
(3)在上述的最佳提取温度,最佳提取时间下,分别用1:
10、1:
15、1:
20、1:
25、1:
30的料液比浸提,绘制提取液的吸光度曲线,找出最佳料液比。
单因素:
①料液比(g/L):
1:
101:
151:
201:
251:
30
②浸提温度(℃):
7580859095
③浸提时间(h):
0.50.751.01.251.5
取单因素实验的每个因素的最佳范围内的值,做三因素三水平的正交实验。
实验结果记录在附五的实验记录表格中。
通过对正交实验进行极差分析后选出最优组合,进行下一步实验。
2.盐析
加氯化钠于茶叶浸提液中,质量分数为2-6%,静置0.5-1.5h后过滤(可用抽滤或者离心的方式)。
3.沉淀
在上述滤液中加入茶叶重量2%~5%的NaHSO3,然后加入茶叶重量20%的硫酸铝饱和水溶液,加热至70℃~80℃,用15%NaHCO3溶液在快速搅拌下调节pH至5~6,此时有大量沉淀析出,沉淀自然沉降一段时间后过滤,最后用等体积70℃热水洗涤沉淀三次。
4.酸溶
将沉淀在快速搅拌下放入到一定料酸比体积下的pH=2.5~4.5的硫酸水溶液中溶解沉淀,控制酸转溶液的pH、酸溶时间,少量胶状沉淀经抽提去除。
用附一的方法测酸转溶液中茶多酚的含量
(1)将上一步骤所得的沉淀放入有40mL、pH=3.0的硫酸水溶的烧杯中,溶解,分别溶解40min、45min、50min、55min、60min,离心除去沉淀,测酸转溶液的吸光度,绘制曲线,找出最佳酸转时间。
(2)取上一步骤所得的沉淀放入有40mL硫酸水溶液的烧杯中,控制硫酸的pH为2.5、3.0、3.、4.0、4.5,在
(1)的最佳酸转时间下,
(3)
(4)
液pH。
七、思考题:
通过对本工艺的实验结果进行分析,讨论分析哪些因素影响茶多
酚产品的产率?
怎样影响的?
应如何控制?
附一:
提取过程中茶多酚的分析测定方法(定量)
准确吸取待测溶液1ml,将其稀释1~25倍(稀释成15倍),再从稀释液中准确吸取1ml,注入25ml的容量瓶中,加水4ml和酒石酸亚铁溶液5ml,充分混合,再加pH=7.5的磷酸盐缓冲溶液至刻度,用1cm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白液作参比,测定吸光度。
计算公式:
茶多酚(g/ml)=1.957AX/500
A:
吸光度X:
稀释倍数。
1)酒石酸亚铁溶液
1g硫酸亚铁和5g酒石酸钾钠用水溶解并定容至至1L,放置过夜后使用。
2)pH=7.5的磷酸二氢钾缓冲液
A液:
称取磷酸氢二纳23.877g,溶解并定容至至1L;
B液:
称取经110度烘干2h的磷酸二氢钾9.078g,加水溶解并定容至至1L
A液85ml和B液15ml混匀即可。
附二:
计算项目:
1)浸提液中茶多酚的总量及茶多酚的浸提率计算
浸提液中茶多酚的总量(g)=浸提液中茶多酚的含量(g/ml)×
浸提液体积(ml)
茶多酚的浸提率=[浸提液中茶多酚的总量(g)/原料茶叶末中茶多酚的总量(g)]×
100%
2)经过盐析、沉淀及酸溶后茶多酚的总量和回收率计算
酸转溶液中茶多酚的总量(g)=酸转溶液中茶多酚的含量(g/ml)×
酸转溶液的体积(ml)
酸转溶液中茶多酚的回收率=[酸转溶液中茶多酚的总量(g)/浸提液中茶多酚的总量(g)]×
3)萃余相中茶多酚的总量和茶多酚的萃取率计算
萃余相中茶多酚的总量(g)=萃余相中茶多酚的含量(g/ml)×
萃余相溶液的体积(ml)
茶多酚的萃取率=100%×
[酸转溶液中茶多酚的总量(g)-萃余相中茶多酚的总量(g)]/酸转溶液中茶多酚的总量(g)
4)茶多酚的最终得率计算
100%×
[酸转溶液中茶多酚的总量(g)-萃余相中茶多酚的总量(g)]/原料茶叶的重量
附四:
浸提单因素实验记录表格:
料液比(g/mL)
10
15
20
25
吸光度
浸提液体积(mL)
浸提温度(℃)
70
80
85
90
95
浸提时间(h)
0.5
0.75
1.0
1.25
1.5
酸转单因素实验记录表
酸浓度(pH)
2.5
3.0
3.5
4.0
4.5
酸转溶液体积(mL)
料酸比(g/L)
2
3
4
5
6
酸转时间(min)
40
45
50
55
60
附五:
浸提正交试验记录表格:
实验号
1
A540
料液比
浸提温度
浸提时间
空列
实验1
实验2
实验3
实验4
实验5
实验6
实验7
实验8
实验9
K1
K2
K3
R
附六:
酸溶正交试验记录表格:
酸浓度
料酸比
酸转时间
料液比g/ml
0.189
0.172
0.162
0.103
0.106
茶多酚含量(g)
0.222
0.303
0.38
0.302
0.373
浸提温度℃
0.084
0.092
0.124
0.251
0.185
浸提时间min
0.098
0.118
0.181
0.184
酸浓度mol/L
0.13
0.141
0.147
0.137
0.122
料酸比g/mL
0.186
0.206
0.107
0.121
0.116
0.0546
0.0819
0.063
0.089
0.102
酸转时间min
0.138
0.154
0.11
0.123
A
B
C
D
茶多酚含量
(g)
0.00657552
0.00146775
0.0070452
0.00504906
0.0017613
0.0105678
0.007485525
0.00598842
0.005
0.004
0.008
0.006
0.001
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