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1、生物技术定义?
是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,采用先进工程技术手
段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。
2、生物技术(生物工程)及其主要研究领域(发酵工程、生化反应工程、酶工程、细胞工程、基因工程、蛋白质工程)。
3、生物技术的特点
八高一低
鸟嚓吟(G)
4胸腺喀睫(T)
脱氧核糖
胸腺囉唳脱氧核昔酸
7
—itMIt
磷酸
6
&
碱基对
10•—条脱氧核昔酸链的片段
1.真核细胞基因结构和原核细胞的有何相同点和不同点?
相同点:
都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成。
不同点:
原核细胞基因的编码区是连续的,真核细胞基因的编码区是间隔的,不连续的。
2•真核细胞基因组中的基因常有内含子存在,能否在原核细胞中表达?
能,为什么?
不能,为什么?
不能,因为原核细胞缺乏对真核基因中内含子的剪接功能和转录后加工系统。
原核生物必须有相应的原核RNA聚合酶可识别原核细胞的启动子,以催化RNA的合成。
基因表达是以操纵子为单位,操纵子由数个相关的结构基因和调控功能的部位组成的。
因
此在构建原核表达载体时必须有1个强的原核启动子及其两侧的调控序列。
3.PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件(ABCD)
A.AmPrB.ori复制子C.LacZ标记D.多克隆位点
在含某个基因的载体中,将H的基因DNA片段插入该基因,导致该基因的功能失活如:
抗性基因的插入失活筛选,含Tetr和Ampr基因的载体,若将目的基因插入Tetr基因,导致Tetr基因失活,形成重组质粒Tcts和Ampr
4.利用PCR技术扩增目的基因
1概念:
PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术
2原理:
_DNA复制
3条件:
已知基因的核苜酸序列、四种脱氧核首酸、一对引物、DNA聚合酶前提条件:
4方式:
以指数方式扩增,即一2"
(n为扩增循环的次数)
5结果:
使冃的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增
5.PCR技术扩增过程
a、DNA变性(90°
C-95°
C):
双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA
b、复性(55°
C-60°
系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链
c、延伸(70°
C-75°
在Taq酶的作用下,从引物的5’端一3’端延伸,合成与模板互补的DMA链。
1•用一定的限制酶_切割质粒,使其出现一个切口,露出—黏性末端
2.用同•种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端
3.将切下的目的基因片段插入质粒的」处,再加入适量DNA连接酶,形成了一个重组DNA分子(重组质粒)
1•下表关于基因工程中有关基因操作
2、下列属于获取目的基因的方法的是(d)
①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取
③从受体细胞中提取④利用PCR技术
⑤利用DNA转录⑥人工合成
A.①②③⑤B.①②⑤⑥C.①②③④D.①②④⑥
3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因在基因工程中的主要作用是b
A.提高受体细胞在自然坏境中的耐药性
B.有利于对目的基因是否导入进行检测
C.增加质粒分子的分子量
D.便于与外源基因连接
4.有关基因工程的叙述正确的是d
A.限制酶只在获得目的基因时才用
B.重组质粒的形成是在细胞内完成的
C.质粒都可作为运载体
D・蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
5.哪项不是基因表达载体的组成部分(b)
A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目的基因
6.下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法(b)
D.花粉管通道法
A.基因枪法B・显微注射法C.农杆菌转化法
1)以下说法正确的是c
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核昔酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须具备的条件Z—是:
具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D、基因控制的性状都能在后代表现出来
2)不属于质粒被选为基因运载体的理由是d
A、能复制B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNA
3)有关基因工程的叙述中,错误的是(a)
A、D\A连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
B、限制性内切酶用于目的基因的获得
C、目的基因须由运载体导入受体细胞
D、人工合成目的基因不用限制性内切酶
4)有关基因工程的叙述正确的是(d)
A、限制酶只在获得目的基因时才用
B、重组质粒的形成在细胞内完成
C、质粒都可作为运载体
D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料
5)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中,不进行碱基
互补配对的步骤是(c)
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达
下列获取目的基因的方法中需要模板链是(b)
A.从基因文库中获取目的基因
B.利用PCR技术扩增目的基因
C.反转录法D.通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
下列有关基因工程的叙述中,错误的是啊a、c
A、DNA连接酶将粘性末端的碱基对连接起来
B、基因探针是指用放射性同位素或荧光分子等标记的D7A分子
C、基因治疗主要是对有缺陷的进行修复
D、蛋白质中氨基酸序列可为合成目的基因提供资料
第二章《基因工程》复习题
一、选择题
1.限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是(D)
A修复自身的遗传缺陷B促进自身的基因重组
C强化白身的核酸代谢D提高自身的防御能力
2.生物工程的上游技术是(D)
A基因工程及分离工程B基因工程及发酵工程
C基因工程及细胞工程D基因工程及蛋白质工程
3.基因工程操作的三大基本元件是:
(1供体II受体III载体IV抗体V配体)(A)
A.I+II+IIIB.I+III+IVC.II+III+IVD.II+IV+V
4.多聚接头(Polylinker)指的是(A)
A.含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工DNA片段
B.含有多种复制起始区的人工DNA片段
C.含有多种SD顺序的人工DNA片段
D.含有多种启动基因的人工DNA片段
5.下列五个DNA片段中含有回文结构的是(D)
A.GAAACTGCTTTGACB.GAAACTGGAAACTG
C.GAAACTGGTCAAAGD.GAAACTGCAGTTTC
6・若将含有5'
末端4碱基突岀的外源DNA片段插入到含有3'
末端4碱基突岀的载体质粒上,又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少,则需用的工具酶是(D)
IT4-DNA聚合酶IIKlenowIIIT4-DNA连接酶IV碱性磷酸单酯酶
A.IllB.I+IIIC.II+III
D.I+II+III
7.下列有关连接反应的叙述,错误的是(A)
A.连接反应的最佳温度为37°
C
B.连接反应缓冲体系的廿油浓度应低于10%
C.连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于lmM
D.连接酶通常应过量2-5倍
8.T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起,其底物的关键基团是(D)
A.
B.2'
-0H和3'
-P
D.5'
2'
-0H和5'
C.3'
9.载体的功能是(I运送外源基因高效进入受体细胞II为外源基因提供复制能力III为外源基因提供整合能力)(D)
A.IB.I+IIIC・II+IIID.I+II+III
10.克隆菌扩增的目的是(I增殖外源基因拷贝II表达标记基因III表达外源基因)
(D)
A.I+IIB.I+IIIC.II+IIID.I+II+III
11下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中,错误的是(C)
A.大肠杆菌一繁殖迅速B.枯草杆菌一分泌机制健全
C.链霉菌一遗传稳定D.酵母菌一表达产物具有真核性
12.考斯质粒(cosmid)是一种(B)
A.天然质粒载体
B.由X-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体
C.具有溶原性质的载体
D.能在受体细胞内复制并包装的载体
13.某一重组DNA(6.2kb)的载体部分有两个Smal酶切位点。
用Smal酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子,其长度总和与已知数据吻合,该重组分子插入片段上的Smal酶切位点共有(D)
A.4个B.3个C.2个D.至少2个
14.外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是(I融合基因能稳定扩增II融合蛋白能抗蛋白酶的降解III表达产物易于亲和层析分离)(D)
A.IllB.I+IIC.I+IIID.II+III
15•提高重组率的方法包括(I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间)(A)
A.I+IIB.I+II+IIIC.I+III+IVD.II+III+IV
16•识别基因序列不同,但酶切后产生的粘性末端相同的一类酶为(B)
A.同工酶B.同尾酶C.同裂酶D.同位酶
17.pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件(ABD)
A.AnP和TetrB.ori复制子C.LacZ标记D.多克隆位点
18.入噬菌体外包装目的基因片段的大小应为(D)
A.小于入
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