观察不同抗高血压药对肾血管性高血压的降压作用文档格式.docx
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(1)高血压是一种严重危害人体健康影响生活质量的一种疾病,临床表现有关头痛且多发生在后脑部。
还可有头晕,头胀,颈部扳住感,耳鸣,眼花,健忘,失眠,烦闷。
乏力,四肢麻木,心悸等。
也是造成肢体偏瘫,心力衰竭,脑梗塞,脑出血,肾衰竭的重要原因。
临床上由高血压发生致残致死的病例屡见不鲜,故称之为“隐形杀手”[1]。
(2)高血压最常见的疾病之一,按1991年全国高血压抽样调查的患病率和1990年普查城乡男女所占百分比计算,我过15—74岁年龄段中,城市男女患高血压人数分别为1700和1300万,农村分别为3500万和3000万。
合计全国约有9500万名高血压病人,远远超过英国,法国和德国,加拿大等西方国家的一国人口总数。
1991年我国高血压患病率比1979-1980约增加25%,并且此种患病率增加的趋势仍在继续。
与高血压相关的人脑血管疾病,已在我国很多地方成为超过世界肿瘤的最主要杀手,它对国民经济和人民生命财产造成的巨大损失难以计算;
已成为我国治病防治工作面临的巨大挑战[2]。
(3)美国FDA和美国NIH的全组顾问委员会负责人认为,绝大多数基因治疗临床实验没有明显的和不可预测的风险,基因治疗的主流是好的,是具有广阔前景的领域,应该坚持而不放弃。
2000年3月,为进一步加强临床监察力度,FDA和NIH公布了。
两项新措施:
制定基因治疗临床试验监察计划和定期开办基因治疗安全性专题研讨会。
相比之下,腺病毒作为载体受到广泛关注,因为腺病毒DNA不整合到宿主细胞基因中,对人体无遗传毒性。
自从FDA1995年批准重组腺病毒用于人体实验至今,没有任何使用腺病毒而引发肿瘤及其它遗传性疾病的报道[3]。
(4)目前有效的降压药物中,推荐使用CCB、ACE1或ARB及利尿剂、B-阻断剂在高血压药物治疗的地位逐渐下降。
高血压指南中所推荐的联合用药治疗再一次被临床试验所证实。
ASCOT-BPLA研究首次证明了一种优化组合方案在长期高血压治疗中的益处。
药物干预可以预防和推迟高血压的发生,我国近1亿人处于高血压前期,这个数据远高于美国。
如果采用一种方法、预防或推迟这一人群发展高血压,将对我们经济尚不发达的国家具有重要意义。
盐替代法可以对高血压进行敢于,CSSS研究证明,利用盐替代法可以降血压[4]。
存在的问题:
目前高血压患者渐趋增多,且市场上抗高血压药种类繁多。
由于缺乏相关知识,很多高血压患者出现滥用药物的情况,为了寻找更好的药物,我们设计此实验验证是否联合用药优于单一用药。
解决问题的思路:
复制肾性高血压模型,采用注射不同的降压药观察并记录用药前后血压值,本实验采用自身对照。
参考文献:
[1]http:
//www.phama-.北京诺华制药有限公司。
健康田地。
挑战高血压
[2]黄峻。
王海燕主编。
高血压现代治疗。
前言,江苏科学技术出版社。
2000
[3]药立波主编。
冯作化。
周春燕副主编。
医学分子生物学。
基因治疗。
基因治疗现状。
人民出版社。
第2版
[4]《中国医药杂志》2006第8卷第4期双月刊269–271
[5]《肾脏病与透析移植杂志》2006.4第15卷第2期144-151
[6]《药理学》第6版杨宝峰苏定冯244-254
[7]《内科学》第6版叶任高陆再英260-261
二、实验设计方案(实验设计目标,拟解决的主要问题,实验动物设计,实验专业设计,实验统计设计,实验方法设计,可行性分析,预期结果,实验设计工作时间安排)。
(一)实验设计目标,拟解决的关键问题
设计目标:
探讨联合抗高血压药和单一用抗高血压药对肾性高血压的降压情况。
并进一步了解联合用降压药是否优于单一用药,从而为临床治疗高血压提供依据。
拟解决的主要问题:
复制肾血管性高血压模型。
对肾血管性高血压模型进行分组与实验结果分析。
(二)实验设计
1、实验动物设计
我们选用家兔作为实验动物,有以下几点理由:
(1)、家兔易得到,容易饲养,在科研工作中被广泛利用。
(2)、肾血管性高血压升高明显,持久和恒定,较易反映出药物的降压作用。
(3)、形成高血压所需要的时间短,工作量较少。
2、实验专业设计
选用家兔作为实验动物,复制肾血管性高血压模型后分别注射不同的降压药观察血压降压情况来判断药物的疗效,观察并记录结扎肾动脉前后的血压(mmHg)及时间(h)等实验指标。
3、实验统计设计
实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则。
(1)随机:
选正常成年健康体重相近的家兔30只,将30只家兔按体重由小变大编号后,从随机数字表中查取随机数字,依次抄录于家兔编号下。
具体方法:
动物编号为1—30号,随机数字从11行第一个数字开始接着抄写30个,按照能被3除的规律:
不余到A组,余1到B组,余2到C组.每组10只。
(2)对照:
本组实验采用自身对照,在前面的专业设计里已经提及。
(3)重复:
本实验采用的是每实验小组有10只家兔,具有一定的重复性。
(4)统计数据收集:
本实验搜集计量资料,初步确定对各组实验数据的比较分为组内和组间比较,分别采用均数和方差分析。
表1家兔肾动脉高血压模型复制(血压变化值)
动物序号结扎前血压值(mmHg)结扎后血压值(mmHg)
1
2
…
29
30
均数X1X2
表2用药前后血压及差值记录
序号A组B组C组
注射利尿剂(n=10)注射卡托普利(n=10)联合注射利尿剂与卡托普利(n=10)
用药前用药后差值用药前用药后差值用药前用药后差值
3
4
5
6
7
8
9
10
均数Ua1Ua2△AUb1Ub2△BUc1Uc2△C
方差Sa^2Sb^2Sc^2
(5)统计数据分析
表1两样本采用均数比较,再采用t检验,如X1与X2两均数的比较,其方法如下:
(1)建立检验假设
H0:
=(两组血压总体均值相等)
H1:
、不等或不全相等,α=0.05。
(2)计算统计量
X=(X1+X2+X3+……+Xn)/nµ
=∑(Xi-X)^2/(n-1)
t=(x-u)/Sx
(3)查t值表,确定P值,得出结论:
若≠且、差值为20mmHg时,说明高血压模型复制成功。
本实验采用计量资料来测定各种指标的数值,所有数据均采用平均数±
标准差(±
s)表示,三组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析,组间血压差值两两比较行q检验,A.B.C组内均数两样本比较采用t检验,均以0.05作为显著性检验水准。
实验数据记录如表2。
三组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析,如各组血压总体均值的比较,其方法如下:
(1)、建立检验假:
H0:
==(各组血压总体均值相等)。
H1:
、、不等或不全相等,α=0.05。
利用统计学专业软件SPSS做One-wayANOVA。
(3)查F值表,确定P值,得出结论。
4、实验方法设计
实验技术路线
实验技术方法
(1)随机抽样:
随机30只正常的家兔,并分别编号,再随机平分成三组,并称重
(2)实验分组:
如统计设计所述。
(3)实验手术:
取兔,称重(婴儿秤)后固定于兔台上,剪去颈部长毛(换药碗装水)。
用1%普鲁卡因局麻(大约三公分长,不同点局麻),切开颈部皮肤(轻点,不要损伤气管和血管),呈钝形分离出气管(分离干净),做倒T形切口,插入气管插管并结扎固定,分离颈外静脉,静脉插管。
(4)模型复制:
a.在距脊椎1-2cm处,从右侧肋骨下缘往下切开皮肤,切口长4-5cm.
b.切开皮下组织和腰背筋膜,并在内斜肌筋膜与外斜肌筋膜连接出切开内斜肌筋膜,即可见肾周围组织。
用手摸到肾脏及肾盂部分的肾动脉,分离出肾动脉。
c.用线将肾动脉结扎,造成肾动脉部分狭窄。
为了便于控制狭窄程度,结扎时在血管表面放置一相当于肾动脉直径1/2的铁丝,结扎后取出铁丝。
d.当第一次手术引起的血压升高下降到正常后,进行第二次手术(左侧)方法同第一次:
注射降压药:
(按照分组情况进行操作);
观察实验兔的血压变化情况并记录。
(三)可行性分析:
1、家兔易得到,容易侍养,在科研工作中被广泛利用。
2、肾血管性高血压升高明显,持久和恒定,较易反映出药物的降压作用。
3、形成高血压所需要的时间短,工作量较少。
4、手术器材和设备均为实验室常用,手术方法我们也相对熟练。
(四)预期效果:
1、肾血管性高血压升高明显,持久和恒定。
2、单一用药有降压作用,但作用不很理想。
3、联合注射利尿剂与卡托普利比其它两组降压作用明显且稳定。
(五)实验设计工作时间安排:
1、共计1D完成药物准备。
2、共计1W完成实验动物模型制备和取材
3、共计0.5D完成统计数据分析
4、总共实验在一周多完成。
三、完成实验的条件
1、仪器设备情况:
本实验采用机能实验室常用设备,具体如下:
BL-410生物信号采集系统,兔台、婴儿磅秤、Y字型气管插管、手术器械、注射器,压力换能器,动脉夹,铁丝等。
2、实验动物情况:
健康的家兔30只。
3、药品试剂来源:
3%戊巴比妥钠,生理盐水,肝素,氢氯噻嗪,卡托普利等。
教研室评审意见
1、实验设计是否合理,可否达到预期目标
2、实验设计和技术路线安排是否恰当
3、实验条件是否具备
实验技术教研室
年月日
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