36种常用微生物培养基配制汇总Word格式文档下载.docx
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4.马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培养)
马铃薯(去皮)200g,蔗糖(或葡萄糖)20g,水1000mL,配制方法如下:
将马铃署去皮,切成约2cm2的小块,放入1500mL的烧杯中煮沸30min,注意用玻棒搅拌以防糊底,然后用双层纱布过滤,取其滤液加糖,再补足至1000mL,自然pH,霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
5.察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基)(用于霉菌培养)
蔗糖30g,NaNO32g,K2HPO41g,MgSO4•7H2O0.5g,KCl0.5g,FeSO4•7H2O0.1g,水1000mL,pH7.0~7.2。
6.Hayflik培养基(用于支原体培养)
牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万单位以上)0.5mL,以上混合后倾注平板。
*注意:
醋酸铊是极毒的药品,需特别注意安全操作。
7.麦氏(McCLary)培养基(醋酸钠培养基)
葡萄糖0.1g,KCl0.18g,酵母膏0.25g,醋酸钠0.82g,琼脂l.5g,蒸馏水l00mL。
溶解后分装试管,1l5℃湿热灭菌15min。
8.葡萄糖蛋白胨水培养基(用于V.P.反应和甲基红试验)
蛋白胨0.5g,葡萄糖0.5g,K2HPO40.2g,水100mL,pH7.2,1l5℃湿热灭菌20min。
9.蛋白胨水培养基(用于吲哚试验)
蛋白胨10g,NaCl5g,水1000mL,pH7.2~7.4,121℃湿热灭菌20min。
10.糖发酵培养基(用于细菌糖发酵试验)
蛋白胨0.2g,NaCl0.5g,K2HPO40.02g,水100mL,溴麝香草酚蓝(1%水溶液)0.3mL,糖类lg。
分别称取蛋白胨和NaCl溶于热水中,调pH至7.4,再加入溴麝香草酚蓝(先用少量95%乙醇溶解后,再加水配成1%水溶液),加入糖类,分装试管,装量4~5cm高,并倒放入一杜氏小管(管口向下,管内充满培养液)。
115℃湿热灭菌20min。
灭菌时注意适当延长煮沸时间,尽量把冷空气排尽以使杜氏小管内不残存气泡。
常用的糖类,如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖等(后两种糖的用量常加大为1.5%)。
11.RCM培养基(强化梭菌培养基)、(用于厌氧菌培养)
酵母膏3g,牛肉膏l0g,蛋白胨10g,可溶性淀粉lg,葡萄糖5g,半胱氨酸盐酸盐0.5g,NaCl3g,NaAc3g,水l000mL,pH8.5,刃天青3mg/L,l2l℃湿热灭菌30min。
12.TYA培养基(用于厌氧菌培养)
葡萄糖40g,牛肉膏2g,酵母膏2g,胰蛋白胨(bacto-typetone)6g,醋酸铵3g,KH2PO40.5g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH6.5,121℃湿热灭菌30min。
13.玉米醪培养基(用于厌氧菌培养)
玉米粉65g,自来水1000mL,混匀,煮10min成糊状,自然pH,121℃湿热灭菌30min。
14.中性红培养基(用于厌氧菌培养)
葡萄糖40g,胰蛋白胨6g,酵母膏2g,牛肉膏2g,醋酸铵3g,KH2PO45g,中性红0.2g,MgSO4•7H2O0.2g,FeSO4•7H2O0.01g,水1000mL,pH6.2,121℃湿热灭菌30min。
15.CaCO3明胶麦芽汁培养基(用于厌氧菌培养)
麦芽汁(6波美)1000mL,水1000mL,CaCO310g,明胶10g,pH6.8,121℃湿热灭菌30min。
16.BCG牛乳培养基(用于乳酸发酵)
(A)溶液:
脱脂乳粉100g,水500mL,加入1.6%溴甲酚绿(B.C.G)乙醇溶液1mL,80℃灭菌20min。
(B)溶液:
酵母膏10g,水500mL,琼脂20g,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。
以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。
17.乳酸菌培养基(用于乳酸发酵)
牛肉膏5g,酵母膏5g,蛋白胨10g,葡萄糖10g,乳糖5g,NaCl5g,水1000mL,pH6.8,121℃湿热灭菌20min。
18.酒精发酵培养基(用于酒精发酵)
蔗糖10g,MgSO4•7H2O0.5g,NH4NO30.5g,20%豆芽汁2mL,KH2PO40.5g,水100mL,自然pH。
19.柯索夫培养基(用于钩端螺旋体培养)
优质蛋白胨0.4g,NaCl0.7g,KCl0.02g,NaHCO30.01g,CaCl0.02g,KH2PO40.09g,NaH2PO40.48g,蒸馏水500mL,无菌兔血清40mL。
制法:
除兔血清外的其余各成分混合,加热溶解,调pH至7.2,121℃湿热灭菌20min,待冷却后,加入无菌兔血清,制成8%血清溶液,然后分装试管(5~10mL/管),56℃水浴灭活lh后备用。
20.豆芽汁培养基
黄豆芽500g,加水1000mL,煮沸lh,过滤后补足水分,121℃湿热灭菌后存放备用,此即为50%的豆芽汁;
用于细菌培养:
10%豆芽汁200mL,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800mL,pH7.2~7.4。
用于霉菌或酵母菌培养:
10%豆芽汁200mL,糖50g,水800mL,自然pH。
霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖。
21.LB(Luria—Bertani)培养基(细菌培养,常在分子生物学中应用)
双蒸馏水950mL,胰蛋白胨l0g,NaCll0g,酵母提取物(bacto-yeastextract)5g,用lmol/LNaOH(约lmL)调节pH值至7.0,加双蒸馏水至总体积为1L,121℃湿热灭菌30min。
含氨苄青霉素LB培养基:
待LB培养基灭菌后冷至50℃左右加入抗生素,至终浓度为80~100mg/L。
22.复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)、(用于水体中大肠菌群测定)蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母浸膏5g,琼脂20g,乳糖10g,K2HPO40.5g,无水亚硫酸钠5g,5%碱性复红乙醇溶液20mL,蒸馏水1000mL。
制作过程:
先将蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏和琼脂加入到900mL水中,加热溶解,再加入K2PO4,溶解后补充水至l000mL,调pH至7.2~7.4。
随后加入乳糖,混匀溶解后,于115℃湿热灭菌20min。
再称取亚硫酸钠至一无菌空试管中,用少许无菌水使其溶解,在水浴中煮沸10min后,立即滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色转变为淡粉红色为止。
将此混合液全部加入到上述已灭菌的并仍保持融化状态的培养基中,混匀后立即倒平板,待凝固后存放冰箱备用,若颜色由淡红变为深红,则不能再用。
23.乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中大肠菌群测定)
蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,酵母膏5g,乳糖10g,琼脂5g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,分装试管(l0mL/管),115℃湿热灭菌20min。
24.乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中大肠菌群)
蛋白胨10g,牛肉膏3g,乳糖5g,NaCl5g,蒸馏水l000mL,1.6%溴甲酚紫乙醇溶液lmL。
调pH至7.2,分装试管(l0mL/管),并放入倒置杜氏小管,l15℃湿热灭菌20min。
25.三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中大肠菌群测定)
将乳糖蛋白胨培养液中各营养成分以扩大3倍加入到l000mL水中,制法同上,分装于放有倒置杜氏小管的试管中,每管5mL,1l5℃湿热灭菌20min。
26.伊红美蓝培养基(EMB培养基)(用于水体中大肠菌群测定和细菌转导)
蛋白胨l0g,乳糖10g,K2HPO42g,琼脂25g,2%/伊红Y(曙红)水溶液20mL,0.5%美蓝(亚甲蓝)水溶液l3mL,pH7.4。
先将蛋白胨、乳糖、K2HPO4和琼脂混匀,加热溶解后,调pH至7.4,1l5℃湿热灭菌20min,然后加入已分别灭菌的伊红液和美蓝液,充分混匀,防止产生气泡。
待培养基冷却到50℃左右倒平皿。
如培养基太热会产生过多的凝集水,可在平板凝固后倒置存于冰箱备用。
在细菌转导实验中用半乳糖代替乳糖,其余成分不变。
27.加倍肉汤培养基(用于细菌转导)
牛肉膏6g,蛋白胨20g,NaCl10g,水1000mL,pH7.4~7.6。
28.半固体素琼脂(用于细菌转导)琼脂1g,水100mL,121℃湿热灭菌30min。
29.豆饼斜面培养基(用于产蛋白酶霉菌菌株筛选)
豆饼100g加水5~6倍,煮出滤汁100mL,汁内加入KH2PO40.1%,MgSO40.05%,(NH4)2SO40.05%,可溶性淀粉2%,pH6,琼脂2%~2.5%。
30.酪素培养基(用于蛋白酶菌株筛选)
分别配制A液和B液。
A液:
称取Na2HPO4•7H2O1.07g。
干酪素4g,加适量蒸馏水,并加热溶解。
B液:
称取KH2PO40.36g,加水溶解。
A、B液混合后,加入酪素水解液0.3mL,加琼脂20g,最后用蒸馏水定容至1000mL。
酪素水解液的配制:
1g酪蛋白溶于碱性缓冲液中,加入1%的枯草芽孢杆菌蛋白酶25mL加水至100mL,30℃水解lh。
用于配制培养基时,其用量为1000mL,培养基中加入100mL以上水解液。
31.细菌基本培养基(用于筛选营养缺陷型)
Na2HPO4•7H2O1g,MgSO4•7H2O0.2g,葡萄糖5g,NaCl5g,K2HPO4lg,水l000mL,pH7.0,1l5℃湿热灭菌30min。
32.YEPD培养基(用于酵母原生质体融合)
酵母粉10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH6.0,115℃湿热灭菌20min。
33.YEPD高渗培养基(用于酵母原生质体融合)
在YEPD培养基中加入0.6mol/L的NaCL,3%琼脂。
34.YNB基本培养基(用于酵母原生质体融合)
0.67%酵母氮碱基(YNB,不含氨基酸,Difco),2%葡萄糖,3%琼脂,pH6.2。
另一配方为:
葡萄糖10g(NH4)2SO41g,K2HPO40.125g,KHPO40.875g,KI0.0001g,MgSO4•7H2O0.5g,CaCl2•2H2O0.lg,NaCl0.1g,维量元素母液lmL,维生素母液lmL(母液均按常规配制),水1000mL,pH5.8~6.0。
35.YNB高渗基本培养基(用于原生质体融合)
在YNB基本培养基中加入0.6mol/LNaCl。
36.酚红半固体柱状培养基(用于检查氧与菌生长的关系)
蛋白胨1g,葡萄糖10g,玉米浆10g,琼脂7g,水1000mL,pH7.2。
在调好pH后,加入1.6%酚红
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- 36 常用 微生物 培养基 配制 汇总
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