还原糖脂肪和蛋白质的鉴定Word下载.docx
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学生回答:
略。
如果回答不全教师补充:
④染色(质)体+醋酸洋红(或龙胆紫)红色(或紫色)
⑤淀粉+碘液蓝色
⑥DNA+二苯胺试剂蓝色(水浴加热)
⑦大肠杆菌+伊红-美蓝产生紫色,略带金属光泽
今天,我们学习鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
(一)、还原糖的鉴定
1、还原糖的鉴定步骤:
选材:
苹果:
洗净、去皮、切块,取5g放如研钵中
制备组织样液研磨成浆:
加石英砂,加5ml水研磨
注入组织样液2ml过滤:
将玻璃漏斗插入试管中,漏斗上垫一层纱布
加斐林试剂:
2ml(由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入)
水浴加热:
煮沸2min
观察溶液颜色变化:
浅蓝色→棕色→砖红色。
结论:
还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀
2、实验成功的要点:
①还原糖的鉴定实验:
选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织,以苹果、梨为最好。
②斐林试剂要两液混合均匀且现配现用。
斐林试剂的配制过程示意:
斐林试剂甲液(0.1g/ml的NaOH溶液)
斐林试剂乙液(0.05g/ml的CuSO4溶液)
③在鉴定尿液中是否含有葡萄糖时还能用其他那些鉴定方法?
还可以用斑氏试剂产生砖红色沉淀;
及糖尿试纸据糖的由少到多产生浅蓝、浅绿、棕或深棕色。
(二)、脂肪的鉴定
1、脂肪的鉴定步骤:
取材:
花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄片
取理想薄片
在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液
去浮色
制成临时装片
观察:
先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察。
细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。
①.脂肪的鉴定实验:
选择富含脂肪的种子,以花生种子为最好(实验前浸泡3h~4h)。
②该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。
③滴苏丹Ⅲ染液染液染色2-3min,时间不宜过长,以防细胞的其他部分被染色。
(三)、蛋白质的鉴定
1、蛋白质的鉴定步骤:
卵清稀释液或黄豆(浸泡1-2d)豆浆滤液
蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。
①蛋白质的鉴定实验:
可用浸泡1d~2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液)。
②双缩脲试剂的使用,一定要先加入A液(即0.1g/ml的NaOH溶液),再加入双缩脲试剂B液(即0.01g/ml的CuSO4溶液)。
③还可设计一只加底物的试管,不加双缩脲试剂,进行空白对照,说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应,而不是空气的氧化引起。
教学小结:
1、斐林试剂和双缩脲试剂的比较
相同点:
①都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成;
②斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液。
不同点:
①CuSO4溶液浓度不一样:
斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液,双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液。
②配制比例不一样。
③使用方法不一样:
斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用,双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B。
④鉴定的对象不一样:
斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。
⑤反应本质及颜色反应不一样。
2、还原糖、脂肪、蛋白质鉴定之比较
还原糖的鉴定
脂肪的鉴定
蛋白质的鉴定
材料的选取:
富含糖,颜色为白色或近于白色
富含脂肪
富含蛋白质
材料的处理:
去皮、研磨
浸泡
——
试剂的使用:
甲液与乙液混合均匀后使用
染色和洗浮色不宜过长
先加A液再滴加B液
反应的本质:
新制的Cu(OH)2溶液与—CHO(还原糖的醛基)反应
碱性条件下Cu2+与肽键反应
3、苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较
都是用来鉴定脂肪。
苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同时要求染色时间更短
课后作业:
基础检测
1.可用于鉴定生物组织中还原糖的试剂是()
A.斐林试剂B.双缩脲试剂C.苏丹Ⅲ染液D.苏丹Ⅳ染液
2.下列哪个实验用到显微镜()
A.还原糖的鉴定B.蛋白质的鉴定
C.脂肪的鉴定D.淀粉的鉴定
3.下列哪组试剂在使用过程中,必须经过加热()
A.斐林试剂鉴定还原糖的过程中
B.苏丹Ⅲ和苏丹Ⅳ染液在鉴定动物组织中的脂肪时
C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时
D.碘化钾溶液鉴定淀粉时
4.用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液颜色的变化过程为()
A.无色一砖红色(沉淀)B.浅蓝色一砖红色(沉淀)
C.浅蓝色一蓝色一砖红色(沉淀)D.浅蓝色一棕色一砖红色(沉淀)
5、用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色时,可用来冲洗浮色的药品是()
A.吸水纸B.H2OC.50%的酒精D.无水酒精
6.用斐林试剂鉴定还原糖时,必须注意以下几点:
(1)被鉴定材料应选择含较高,颜色为的植物组织,以为最好。
(2)斐林试剂很不,必须时再配制并立即使用。
配制的方法是将4-5滴滴入2m1中。
(3)鉴定反应必须在中进行。
7.在鉴定花生种子细胞内含脂肪的实验过程中,应先将花生子叶薄片用染色,然后用洗去,再制成最后,镜检结果是.
8.鉴定豆浆中的蛋白质时,应先加入2m1,摇荡均匀后,再加入3-4滴,再摇荡均匀后,颜色变化是.
能力素质提高
9.下列物质中,能被苏丹IV染液染成红色的是()
A.马铃薯块茎B.浸软的蓖麻种子
C.蛋清液D.苹果
10.下列可用于鉴定脂肪的实验材料是()
A.苹果B.梨C.卵白D.花生种子
11.对斐林试剂和双缩脲试剂的配方,叙述不正确的是()
A.都含有NaOH溶液和CuSO4溶液
B.斐林试剂的配制是将4-5滴0.05g/ml的CuSO4溶液滴入2ml0.1g/ml的NaOH溶液中即成
C.双缩脲试剂是将3-4滴0.01g/ml的CuSO4溶液滴入2ML0.1g/ml的NaOH溶
液中混合而成的
D.双缩脲试剂含有两种试剂:
质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为0.O1g/ml的CuSO4溶液
12.鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是()
A.先加A液,混合后再加B液摇匀观察
B.先加B液,混合后再加A液摇匀观察
C.A、B液混合后加入,摇匀后观察
D.A、B液同时加入样液,摇匀后观察
迁移与扩展
13.与硫酸铜溶液在碱性环境中反应,生成紫色物质的是()
A.淀粉B.脂肪
C.蛋白质D.核酸
14.将面团包在纱布中在清水中搓洗,鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是()
A.碘液、苏丹Ⅲ溶液B.双缩脲试剂、碘液
C.亚甲基蓝溶液、苏丹ⅢD.碘液、斐林试剂
15.下列实验中所用试剂错误的是()
A.在观察植物细胞有丝分裂实验中,使用醋酸洋红溶液使染色体着色
B.在提取叶绿体色素实验中,使用丙酮提取色素
C.在DNA的粗提取与鉴定实验中,使用氯化钠溶液析出DNA
D.在蛋白质的鉴定实验中,使用苏丹Ⅲ染液鉴定蛋白质
练习答案:
1—5:
ACADC
6、
(1)糖,白色或近白色,苹果、梨
(2)稳定,使用,斐林试剂乙液,斐林试剂甲液
(3)加热条件
7、苏丹Ⅲ染液,50%酒精,浮色,临时装片,细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色
8、双缩脲试剂A,双缩脲试剂B,变成紫色
9—15:
BDCACBD。
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- 关 键 词:
- 还原 糖脂 蛋白质 鉴定
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