艾滋病检测原理和技术规范课件PPT格式课件下载.ppt
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将PA、dot-EIA、胶体硒法纳入快速检测规范方法,因此可以使用。
有研究指出:
任何一种快速试剂可以筛查出99%以上的阴性样本;
两种快速试剂均为阳性时,可以筛查出98%以上的阳性样本;
两种快速试剂结果不一致时,可用ELISA复检;
单独使用或两种同时使用时,特异性差别无显著意义。
2022/10/15,16,针对各种病毒蛋白的特异抗体区分ELISA真阳性与假阳性检测HIV-1和HIV-2,WesternBlot免疫印迹法,2022/10/15,17,HIV的主要基因及其产物(HIV标志物),2022/10/15,18,ss-RNA,2022/10/15,19,全自动免疫印迹仪,2022/10/15,20,HIV抗体阳性诊断标准:
2条env(gp160/gp120+gp41),1条env+p24,2022/10/15,21,筛查试验:
诊断出阴性样本,并为阳性/可疑样本排除非特异条带。
复检1(试剂A):
对阳性/可疑样本排除操作误差。
复检2(试剂B):
对阳性/可疑样本排除试剂误差。
确证试验:
诊断出阳性样本。
筛查试验和确证试验的作用,2022/10/15,22,HIV/AIDS诊断标准(GB16000-1995),2022/10/15,23,2022/10/15,24,HIV!
HIV?
HIV感染母亲所生婴儿:
分别于12个月、18个月追踪检测阴性者为阴性,18个月仍阳性者为阳性。
2022/10/15,25,三、艾滋病检测技术规范,2022/10/15,26,主要内容:
样品采集和处理检测方法(HIV抗体、病毒核酸、病毒载量、CD4、HIV抗原检测)安全防护、职业暴露质量管理(质量保证、质量控制、质量评价)实验室质量考评HIV诊断试剂质量评估,2022/10/15,27,筛查试验(试剂A),阳性可疑,均阴性,均阳性,阴性,重复检测(试剂A+B),阴性,阳性,确证试验,筛查实验室,一阴一阳,确证实验室,复核检测(试剂A/B/C),阳性可疑,阴性,筛查报告(阴性),确认报告(阴性),确认报告(阳性),2022/10/15,28,HIV抗体检测结果处理规范,2022/10/15,29,HIV待确证样品,HIV阳性确证报告原件,感染者,确认报告原件,确认报告复印件备案,筛查实验室所在单位,筛查实验室所在单位,确证实验室,筛查实验室,艾滋病样本确证、报告流程:
2022/10/15,30,认真填写各类表格(最好能打印),及时上报。
2022/10/15,31,各筛查实验室每月5日前上报上月检测数据:
2022/10/15,32,四、艾滋病检测的质量控制,2022/10/15,33,行政支持重视、投入、理解实验室规范化建设规范、制度、程序人员要求资质条件、培训和轮训,室内质控质控图的建立和应用检验期间核查试剂对照、外部质控品对照、平行双样结果关联性(不同方法、不同实验室结果、人群特征等),可实时校验:
样品、试剂、仪器、操作等环节。
实验室室间质量考评,2022/10/15,34,建立各项规章制度和操作程序,定期检查;
人员定期接受培训和复训,培养良好的业务素质;
2022/10/15,35,仪器设备运作正常,定期检定和校准,妥善维护;
样品流转有序,记录详细,保存规范;
采用合格试剂,经常核查试剂质量,正确保存和使用;
环境条件符合要求,有监控有记录;
严格按照规范和试剂说明书操作;
建立各类质量记录表格,资料保存完整,溯源性强;
坚持开展室内质控,参加室间比对和能力验证;
安全防护、废物处理措施落实,建立人员健康监护档案。
2022/10/15,36,每个实验室必须配备至少2种不同原理/不同厂家的试剂,其中一种必须是ELISA(第三代、双抗原夹心、两步法)。
第一次筛查试验推荐使用高敏感性的ELISA法,快速法可用于应急试验或复核试验。
按政府招标目录采购,保存供应商的资质证明文件,试剂批批检报告。
登记试剂采购和使用情况,注意保存条件并实行监控。
试剂和样品应分开存放,过期试剂必须及时处理。
不同品牌、不同批号的试剂不能混用(包括阳性对照)。
2022/10/15,37,严格按照说明书操作和判断。
实验室环境条件(温度、湿度)的控制。
试剂使用前室温平衡的重要性。
正确使用恒温设备(校准温度、放置方式、放置位置)。
固定样品排列方式,固定对照品位置。
统一加样的方式方法(加样器使用习惯、样品加样顺序)。
加样过程避免污染(气溶胶、加样器移动路线)。
按加样顺序加入各种试剂,加入质控对照前必须摇匀。
严格控制反应温度和时间。
2022/10/15,38,每次实验必须设立内部质控对照和外部质控对照。
内部对照质控血清必须使用同批号试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清,其数量和结果控制范围,按该试剂盒说明书的要求设立和判定。
设立内部质控对照可以有效监控该试剂盒的检测能力和操作过程的正确性。
外部对照质控血清包括强阳性、弱阳性和阴性对照血清(由权威检验质控机构供应的定值产品),但通常可以只设一个弱阳性对照。
使用外部质控对照制作质控图,可有效监控检测的重复性和稳定性、以及试剂盒的批间或孔间差异。
2022/10/15,39,
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