乳腺癌HERFISH检测判读及报告Word格式文档下载.docx
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0、1+或3+,根据条件,可再
做FISH验证.
Figmre1PwreinandGeneAnnpldkertion
0『2+A
IHC瞿eehqL,v电I
表1:
(2004)HER2AmplificationRatiosby
FluorescenceInSituHybridizationand
CorrelationwithImmunohistochemistryina
Cohortof6556BreastCancerTissues.Clinical
BreastCancer
IHC-
FISH
阳性率
〔%〕
阴性
阳性
892
56
5.9
1+
514
211
29.1
2+
327
415
55.9
3+
74
660
89.9
表2:
2007年卫生部科教司牵头组织全国73家三级
以上医院历时2年完成“荧光原位杂交技术〔FISH〕
用于乳腺癌患者Her-2检测的临床研究〞课题,检测
标本达3368例
因此,?
2021年NCCN乳腺癌临床实践指南?
乳腺癌HER2检测指南〔2021
版〕?
均建议先进行HER2蛋白的IHC检测,IHC2+样本进行ISH〔FISH、DISH或CISH〕
检测.
►HER2H
IMP虹
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三.样本准备:
1.标本类型:
〔1〕手术切除标本;
〔2〕粗针穿刺活检标本;
〔3〕活检标本.
2.标本固定:
所有乳腺癌标本离体后都应尽快固定〔1h内固定〕.固定时应将标本每隔5〜
10mm切开,并可在组织间嵌入纱布或滤纸等物.固定液量与所浸泡组织的比例应足够.
固定时间以6—72h为宜.
3.固定液类型:
4%中性〔磷酸缓冲〕甲醛固定液.
4.组织切片:
〔1〕切片厚度3-5um;
〔2〕应有HE染色切片作为对照.
四.临床上哪些患者需要进行HER2检测
1.所有乳腺原发性浸润癌都应进行HER2检测;
2.只要能获取肿瘤组织,对复发灶或转移灶也应该进行HER2检测;
3.如HER2检测结果为阴性,但疾病复发且生物学行为提示可能为HER2阳性肿瘤时,应重
复HER2检测;
4.如HER2检测结果与组织病理学特征不相符时,如组织学分级为I级的浸润性乳腺癌HER2
阳性,应重复HER2检测.
组织学1级的类型腺癌:
?
浸润性导管或小叶癌,ER和PR阳性
小管癌〔至少90%为纯小管癌〕
粘液癌〔至少90%为纯粘液癌〕
筛状癌〔至少90%为纯筛状癌〕
腺样囊性癌〔至少90%为纯腺样囊性癌〕且常为三阴性
孚L腺癌HER2FISH检测-判读
一.信号观察流程
1.首先在HE/IHC切片上确认肿瘤区域;
2.在10X物镜下,于FISH标本上找到与HE染色切片上相同的组织细胞结构;
3.在40X物镜下扫描整张切片,观察是否存在异质性,要求至少找到2个浸润癌区域,计
数至少20个浸润癌细胞.满意的标本应是75%以上癌细胞核中有杂交信号;
4.在100X物镜下观察癌细胞核的FISH结果进行信号计数,注意上下调整焦距,以免遗漏信号.
二.实验失败、不能判读的情况
1.因操作等原因,细胞核被损坏,边界不完整;
2.组织过度消化,细胞核边界不完整,DAPI染色浅;
3.组织消化缺乏,25%以上的细胞核无信号;
4.自发荧光很强或细胞核分辨差,10%细胞核外有信号.
三.计数要求
1.计数区域可结合苏木精伊红染色进行肿瘤细胞标识;
2.选择具较好核分界的区域,要求细胞核大小根本一致、边界完整,DAPI染色均匀、核无
重叠,绿色着丝粒信号清楚;
3.随机计数确定的肿瘤区域中20〜30个细胞核中的双色信号,不要主观选择信号多的核计
数;
4.不要计数仅显示一种颜色信号的细胞核;
5.防止计数分裂像的细胞核或被细胞核分裂及边界不完整核;
6.如果2个同样大小的橘红信号之间距离缺乏一个常规橘红信号大小,只计为一个信号;
7.假设红、绿两信号的比值>
20或众多信号连接成簇时可不计数,视为基因扩增;
8.假设为临界值,那么需要再计数20个细胞核中的信号或由另外一个观察者重新计数,如仍为
临界值,那么应在FISH检测报告中注明,或换其它方法或其它蜡块重新检测;
9.假设HER2基因扩增在不同癌细胞中存在异质性时,应在另一癌区域再计算20〜30个癌细
胞核中的红、绿信号值,报告其最大值,并加以注释;
10.判读时可以将乳腺组织中的正常细胞〔如成纤维细胞、血管内皮细胞、淋巴细胞、正常乳
腺上皮细胞〕的HER2信号和CSP17信号作为内对照.
如•修局部里包伯号不在国♦区域内.
〕|^卜渊胞松内为两个投色一两个绿色
讣数为:
两个柢也佑号和何不绿色心号.个粮色信号扩敬.
不口改如吐枝后仆,W:
"
隹/肝〞枇细嘀嶂K域进行价并.有此假号在川收乂除网.
讣收内:
阴个超色信“利曲小绿色小出色的号他裂开,
计数为,个料色埼弓和曲外绿色依年.个瞅
计也为,明十种色门号和个微色喷号.
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色格号眩瞿什.根也格的也被裂开.
-揖包扉针,CEP17
•-ffiftW,LSIHCn-^rieu
一些常见信号类型及计数方法
[摘自乳腺癌HER-2基因检测t剂盒〔FISH法〕说明书一AbbottMoleularInc.]
四.结果判读
在清楚的肿瘤区域,按以上计数要求在至少20个核内计数GSPHER2〔红色〕和CSP17
〔绿色〕信号,分别记录GSPHER2和CSP17的信号总数,再计算平均每个细胞HER2拷
贝数、平均每个细胞CSP17拷贝数以及GSPHER2和CSP17比值.
A.假设HER2/CSP17<
2.0,且平均HER2拷贝数/细胞<
4.0,HER2阴性;
B.假设HER2/CSP17<
2.0,且平均HER2拷贝数/细胞<
6.0,但>
4.0寸,HER2结果不确
定;
C.假设HER2/CSP17>
2.0,明ER2/CSP17<
2.0而HER2拷贝数/细胞>
6.0HER2阳
性.
乳腺癌HER2检测指南2021版〉〉
注:
a:
对于HER2/CSP17比值〕2.0,但平HER2拷贝数/细胞<
4.0的病例是否应该视为FISH阳性目
前尚存争议,建议对这局部病例在报告中加以备注,提示目前的争议,建议临床医师参考免疫组织化学
检测结果并与患者进行必要的沟通;
b:
见于均质、连续的浸润细胞,且占浸润癌的10%以上
五.HER2FISH判读标准的变化
乳腺癌HER2检测指南2021版?
判读标准:
1.8,HER2阴性;
B.假设HER2/CSP17>
1.8,12.2,HER2结果不确定;
CHER2/CSP172.2HER2.
新旧判读标准的比拟:
①2021版新标准的截断值为2.0,2021版老标准的截断值为1.8和2.2;
②2021版新标准不只是HER2/CSP17的比值,需结合HER2基因的拷贝数进行判读;
2021
版那么仅根据HER2/CSP17的比值进行判读,不考虑HER2基因拷贝数.
新旧判读标准衔接中可能出现的问题:
①2021版新标准出现HER2检测结果不确定的情况会比2021版标准更少;
②2021版新标准判读阴阳性结合了HER2基因的拷贝数,有些2021版标准判读结果为阴
性的标本,如果HER2基因拷贝数?
62021版新标准那么判为阳性.
[?
与?
]
乳腺癌HER2FISH检测-报告及结果解释
一.报告要求
要求检测报告包括如下内容:
患者信息〔包括姓名、
性别、年龄、门诊/住院号〕、送检医师姓名、送检日期、标本信息〔包括病理号和蜡块号卜
标本部位和类型、探针信息、检测方法、是否使
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