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对子代的选育
1、基因工程的操作工具有:
。
2、基因工程的操作流程是:
(1);
(2);
(3);
(4)
。
其中核心步骤是:
。
3、获取目的基因的方法有:
;
为了获得更多的目的基因,可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有;
构建基因表达载体的目的是:
。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是;
导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞,原因是。
6、基因表达载体的组成:
。
其中启动子的作用是;
标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是:
(1)分子水平的检测:
用放射性同位素标记的片段做探针进行分子杂交,检测目的基因是否成功转录出mRNA或用技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
(2)个体水平的检测:
。
答案:
1、限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体2、
(1)获取目的基因
(2)基因表达载体的构建(3)将目的基因导入受体细胞(4)目的基因的检测和鉴定基因表达载体的构建3、从基因文库中获取、人工合成目的基因、PCR技术PCR技术4、限制酶、DNA连接酶使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。
5、农杆菌转化法显微注射法受精卵具有全能性6、启动子、终止子、标记基因、目的基因能被RNA聚合酶识别并结合,使目的基因得以表达有利于对目的基因是否导入受体细胞进行检测7、目的基因抗原—抗体杂交看得到的个体是否表现出目的基因所控制的性状。
二、二、蛋白质工程流程图:
预期蛋白质的功能
预期蛋白质的结构
应有的氨基酸序列
早期胚胎
预期的蛋白质
转基因动物
受体
工程是蛋白质工程的基础,从本质上看蛋白质工程是通过改造,从而达到改造的目的。
基因基因结构蛋白质结构
三、植物组织培养:
脱分化
离体的植物器官、
组织或细胞
植物体
胚状体或根、芽
再分化
1、植物组织培养的理论依据是:
。
2、植物细胞表现出全能性的条件:
。
3、植物组织培养的核心技术:
4、愈伤组织的结构特点是:
。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外,还需要添加,目的是。
同时在培养过程中,除必要的温度、光照和氧气等外界条件外,操作过程中还必须保证。
6、植物组织培养技术有哪些应用?
。
7、若要制作人工种子,应进行到哪一阶段?
。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇,应进行到哪一阶段?
。
1、植物细胞的全能性2、脱离母体3、脱分化和再分化4、细胞排列疏松、形态不规则、细胞壁薄等5、植物激素(生长素和细胞分裂素)无菌6、
(1)植物繁殖的新途径:
①微型繁殖②作物脱毒③制作人工种子
(2)作物新品种的培育:
①单倍体育种②突变体的利用③细胞产物的工厂化生产7、胚状体愈伤组织
四、植物体细胞杂交:
植物细胞B
植物细胞A
去壁
原生质体A
原生质体B
原生质体融合
融合原生质体
再生出细胞壁
杂种细胞
杂种植株
1、如何去除细胞壁?
。
2、诱导原生质体融合常用的方法有。
3、植物原生质体融合完成的标志是:
。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是:
。
该技术的原理是:
。
该技术的核心技术是。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是:
1、用纤维素酶和果胶酶处理2、物理法(包括离心、振动和电激)、化学法(用聚乙二醇处理)3、杂种细胞产生新的细胞壁4、植物组织培养脱分化和再分化5、能够克服远缘杂交不亲和障碍
五、动物细胞培养
培养瓶、培养箱
剪碎、酶处理
细胞悬液
分散成单个细胞
动物胚胎或幼龄动物的组织
无限传代细胞
传代培养
原代培养
1、依据的原理是:
2、常选用的材料:
。
3、在使用合成培养基进行胚胎干细胞培养时,通常需加入等天然成分。
4、一般用将组织分散成单个细胞。
5、动物细胞培养的条件:
(1);
(2);
(3);
(4)。
6、培养过程中,需要定期用处理使细胞从瓶壁上脱离下来,以便于分装到更多的培养瓶中继续培养。
7、培养过程中,为保证无菌环境,需要向培养液中加入;
为保证无毒环境,需要。
1、细胞增殖2、胚胎或幼龄动物的组织3、血浆、血清4、胰蛋白酶或胶原蛋白酶5、
(1)无菌、无毒的环境
(2)一定的营养物质(3)适宜的温度和pH(4)一定的气体环境6、胰蛋白酶7、抗生素定期更换培养液
卵巢
六、动物细胞核移植:
采集
卵母细胞
体外培养
供体细胞
MⅡ中期卵母细胞
去核
供体细胞培养
去核卵母细胞
供体细胞核注入去核卵母细胞(核移植)
重组细胞
重组胚胎
代孕母体
克隆动物
1、动物细胞核移植的原理是:
。
2、一般利用未受精的卵细胞去核后作为受体细胞,对卵母细胞的去核处理一般选择在时期进行。
3、通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因:
。
1、动物细胞核的全能性2、减数第二次分裂中期3、
(1)体积大、易操作
(2)营养物质丰富(3)含有促进细胞核的全能性表达的物质
七、单克隆抗体的制备:
特定抗原
小鼠
效应B细胞
筛选
细胞融合
杂交瘤细胞
多种细胞
骨髓瘤细胞
提取
单克隆抗体
体内、体外培养
能产生特异性抗
体的杂交瘤细胞
专一抗体检测
克隆化培养
1、制备单克隆抗体的原理:
。
2、制备单克隆抗体常用的动物细胞工程技术手段有:
。
3、不同细胞能够融合的原因是:
4、杂交瘤细胞的特点是:
。
5、单克隆抗体的优点是:
。
6、诱导动物细胞融合的方法有:
。
与植物原生质体融合相比,特有的诱导方法是。
7、两次筛选的目的是:
第一次是筛选;
第二次是筛选。
8、经过融合可形成种类型的融合细胞(仅考虑两个细胞间的融合)。
9、单克隆抗体与抗癌药物结合制成“生物导弹”,可明显减少用药量和副作用,原因是:
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