微生物实验报告_精品文档Word文档格式.docx
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A培养基的制备(已提前制备好)
B周围环境中的微生物的检测,在牛肉膏蛋白胨培养基平板上作如下实验
1取三个平板,用100μL的取液器分别吸取100μL的河水、豆浆、豆奶,均匀加在三个培养基上,并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次,时间约1-2分钟,使细菌均匀分布)。
2再取三个平板,三个同学分别用手指(未洗过)在培养基上涂抹几秒钟,一个同学对应一个平板。
3再取一个平板,其中一个同学将手用肥皂洗过后,再在培养基上涂抹。
4再取一个平板,打开皿盖,一个同学对着培养基咳嗽,使口腔中的气流和飞沫落到培养基上。
5再取一个平板,打开皿盖,在空气中放置10min左右,关上皿盖。
6将上述9个平板放置在35℃的培养箱中培养24h。
C土壤中分离微生物
1采土样,制备土壤稀释液(已准备好)
2取三个平板,每个培养基上用取液器添加100μL的土壤稀释液,并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次,时间约1-2分钟,使细菌均匀分布)。
3将平板依旧放在35℃的培养箱中培养24h。
D菌落计数
培养24h后,取出培养平板,算出每个平板上的菌落数量。
其中,土样中的微生物含量可用以下式子计算
土壤中的细菌含量(个/g土壤)=菌落平均数×
10×
稀释倍数
实验结果及数据:
实验结果如附图。
开盖10min手指直接按压
手指直接按压手指直接按压
1号的手指经肥皂洗后按压对着培养基咳嗽
豆奶河水
土壤溶液土壤溶液
豆浆土壤溶液
实验讨论及感想:
1根据你对周围环境中微生物存在的观察,你认为无菌操作要注意什么?
在进行无菌操作的时候,应该要注意始终在明火旁边操作,既不能离得太远,也不能离得太近。
因为在明火旁边可以减少空气中的微生物进入操作器具中的概率。
2在日常生活中如何让讲究饮食和生活卫生?
生活中,剩菜剩饭应该存放在冰箱内或是干燥低温处,尽量避免适宜微生物生长繁殖环境。
3试解释夏天时煮好的饭如果放在锅中保持盖着锅盖不动,不容易变质,而一旦盛在碗里饭就容易变质,如果是吃剩的剩饭就更容易变质的原因。
煮好的饭由于高温,本身含有的微生物被杀死,保持盖着锅盖不动,外界的微生物难以进入,但是一旦盛在碗里,抑或是吃剩的剩饭,由于跟空气直接接触,大量微生物会在其表面生长繁殖,导致其变质。
4根据实验结果,试从微生物的角度批驳“洁癖行为”。
完全的洁癖行为是不存在的。
就算东西收拾的再干净,也有无数肉眼看不见的微生物依然停留在器具表面,无法完全清除掉,所以,“洁癖行为”是永远无法达到的。
二固定化酵母细菌发酵啤酒实验与酸奶制作
1了解固定化细胞技术的方法和意义
2了解酵母发酵产生啤酒的过程
3学习酸奶制作方法
4了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的区别
1无菌滴管,无菌封口膜封好的100ml三角瓶
2发酵培养基:
100ml8%-10%的麦芽汁装于250ml三角瓶中
3浓度为2.5%的海藻酸钠溶液5ml,灭菌
4浓度为1.5%的CaCl250ml,灭菌
5浓度为0.9%的无菌生理盐水,5ml
6袋装巴氏消毒的牛奶,
7啤酒菌种:
啤酒酵母
8酸奶菌种:
市售酸奶
A固定化酵母细胞发酵啤酒
1菌体培养:
将培养了24h的新鲜斜面菌种接种于三角瓶中培养。
2细胞固定化:
在预热至35℃的海藻酸钠溶液中加入2ml预热至35℃的酵母培养液,混合均匀,以无菌滴管(离液面5cm以上,离液面太近无法制得凝胶珠)缓慢而稳定的滴入CaCl2溶液中,即可得到直径约为3mm左右的凝胶珠。
注意无菌操作。
钙化30分钟左右。
3固定化细胞发酵啤酒:
在无菌玻璃棒的帮助下倒掉CaCl2溶液,将生理盐水倒入制得的固定化好的酵母细胞的瓶子中,洗一次凝胶珠,倒掉生理盐水。
将100ml发酵培养基(麦芽汁)倒入制得的固定化小球的瓶子中,用无菌封口膜封好瓶口。
20-28℃静置培养24h。
4放置在4℃的冰箱中冷藏一段时间,品尝啤酒。
B制作酸奶
1取1000ml鲜奶搅拌煮沸消毒,加白糖60g搅拌溶解,乘热分装到干净无菌的100ml三角瓶中,用无菌封口膜封好瓶口。
让其自然冷却(冷却中最好能摇晃三角瓶2-3次,以免乳脂结皮)。
用洁净的封口膜将三角瓶口盖住。
冷至40℃(不烫手)时,取市面上销售的未经过灭菌的原味酸奶按5%(体积分数)比例倒入溶解好的糖的牛奶中,摇匀。
2或直接把是受经过巴氏消毒的“无抗牛奶”分装到干净无菌的100ml三角瓶中,加入6%(质量分数)白糖,摇晃确保使糖分充分溶解,取市面上销售的未经过灭菌的原味酸奶按5%(体积分数)比例倒入溶解好糖的牛奶中,摇匀。
三角瓶可用一次性纸杯或塑料杯代替,封口膜可用白纸代替。
3在42℃的情况下,三角瓶(纸杯或塑料杯)静置发酵培养6-8h(如果用纸杯盛牛奶,白纸封口,由于传热慢,需要发酵10-12h)。
牛奶变为不流动的酸奶时,停止发酵。
4置于4℃的冰箱中24h以上,待冷却老熟后便得到酸奶。
5品尝酸奶。
实验附图
我制作的酸奶 我制作的酸奶
实验讨论及心得
1谈谈固定化细胞技术的意义。
固定化技术就是将生物酶或细胞固定在一定的基质上。
与传统方法相比,该技术具有能多次使用菌体的特点,简化了操作步骤。
2试述纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差异。
纯种发酵对无菌操作的要求较高,因为是在成分单一的发酵基质中,仅接入一种微生物,通过对该种微生物的培养,得到纯度较高的单一性产物,所以对无菌操作的要求也较高一些。
3为何有的同学用无菌滴管把海藻酸钙与酵母菌混合液滴加入CaCl2溶液时,未得到凝胶珠,而得到了不规则形状的固体?
可能是在滴加的时候没有保证逐滴加入,使得大量的混合液聚集在一起,形成了不规则形状的固体。
4在制作酸奶时,为什么要使用“无抗奶”作为原料?
“无抗奶”即不含抗生素的牛奶,在制备酸奶的时候,如果不使用无抗奶的话,牛奶中含有的抗生素会杀死原味酸奶中的乳酸菌,导致无法正常发酵,也就无法制成酸奶。
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